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广东红冬蛇菰及其内生真菌和三株动物肠道来源微生物化学成分的研究

范升  
【摘要】:药用植物的化学成分及动植物来源微生物次生代谢产物是天然药物的来源之一。本论文分离并鉴定了广东梅州地区产名贵中药材红冬蛇菰的脂溶性部分的化学成分,结合活性及化学筛选方法选取了 4株共生微生物并分离鉴定了其次生代谢产物的化学成分,主要内容如下:(1)通过形态特征、ITS和16S rDNA基因序列分析对4株候选菌株进行了分类鉴定。菌株Mzz9属于青霉菌属(Penicillium),并且与Penicillium coprophilum具有高于99.9%的ITS序列相似性;菌株BM6属于曲霉菌属(Aspergillus),并且与Aspergillus clavatus、Aspergillus clavatonanicus具有高于99.9%的ITS序列相似性;菌株XM3属于青霉菌属(Penicillium),并且与Penicillium citrinum具有高于99%的ITS序列相似性;菌株TY1属于链霉菌属(Streptomyces)。(2)结合多种柱色谱学分离手段和波谱学鉴定方法,从广东梅州地区产名贵中药材红冬蛇菰的脂溶性部分及结合活性与化学筛选方法选取的4株共生微生物中分离纯化得到28个化合物。分别是,从中药材红冬蛇菰的二氯甲烷萃取物中分离得到5个化合物:羽扇豆醇(1),β-香树脂醇(2),鄁桐甾醇(3),蛇麻脂醇乙酯(4),亚油酸甘油酯(5);从红冬蛇菰茎部分离得到的一株内生真菌Penicillium coprophilum Mzz9中鉴定了 6个化合物:去氯灰黄霉素(6),灰黄霉素(7),脱氢灰黄霉素(8),oxaline(9),4-Megastigmen-3,9-dione(10),对羟基苯乙酮(11);从斑马粪便来源菌株Aspergillus sp.BM6中分离鉴定了 6个化合物:Clavato(12),间羟基苯甲醇(13),邻甲基对苯二酚(14),(Z)-N-(4-羟基苯乙烯基)甲酰胺(15),theobroxide(16),patulin(17);从熊猫粪便来源菌株Penicillium sp.XM3中分离鉴定了 4个化合物:2,4,5-trimethyl benzene-1,3-diol(18),citrinin(19),dicitrinin A(20),penicitrinol A(21);从驼羊粪便来源菌株Streptomyces sp.TY1中分离鉴定了 7个化合物:N-[2-(4-羟基苯基)乙基]乙酰胺(22),N-乙酰色胺(23),对羟基苯乙醇(24),对羟基苯甲酸甲酯(25),3,4-二羟基-4-甲基-2-戊酮(26),N-[3-(1H-吲哚-3-基)丙基]乙酰胺(27),吲唑(28)。(3)对Aspergillus sp.BM6中分离鉴定的部分化合物进行了抗菌活性测试,发现这些化合物具有一定的抗菌活性,其中化合物17棒曲霉素patulin其抗金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、香蕉枯萎病菌、白色念珠菌的MIC值分别为16、8、16、64μg/mL。对部分化合物进行了 MDCK细胞毒性测试,其中化合物14,18,20对MDCK表现出一定的毒性作用,其CC50分别为25,25,25~50μg/mL,而其他化合物在50 μg/mL以内对MDCK细胞没有明显的毒性作用。


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