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毛囊干细胞与毛乳头细胞体外培养重建类毛囊器官

李哲昊  
【摘要】:本文主要阐述毛囊的器官结构,同时给出提取毛乳头细胞(DS)以及毛囊干细胞(HFSC)的方法和鉴定标记物和鉴定方法,目的是在体外培养毛囊干细胞与毛乳头细胞,同时在体外培养两种细胞的类毛囊器官,为临床治疗脱发开辟新的治疗手段。当今社会,脱发朝年轻化、普遍化下发展,脱发问题除了对病人外观产生不利影响,还极大危及病人的生活质量与心理状态。毛发移植则为长效解决脱发问题唯一途径。毛发移植的根本就是将自体的资源进行人为的再次分配,然而,当前的毛发移植术所面临的最大问题就是无法找到可以提供大量毛发的供区。FUE是指自体供区直接提取单个毛囊单位移植物的技术,也就是说通过环钻切取供应毛囊的部分,与真皮中层,将毛囊单位和附近组织的连接切断,借助取出整个毛囊单位。此技术存在诸多优势,包括无需缝合、低创伤性、术后快速愈合等,对头皮张力较大或瘢痕体质病人尤其适用,然而此项技术也存在下述不足:①提取毛囊单位所需时间过长,只能应用在植发不大的患者中;②进行此项操作时,易导致毛囊受损,使得移植毛发存活率下降。毛发移植的根本就是将自体的资源进行人为的再次分配,但是所面临的最大问题就是无法找到可以提供大量毛发的供区。经研究发现,HFSC具备慢周期性,此细胞于体内通常呈静止态,进行体内培养时或受到内环境刺激,其可显示出超强的增殖活性。毛囊干细胞是一种能向多个组织分化的潜在组织,其能分化的组织包括表皮、毛囊、各种腺体等,并且在机体遭遇到创伤后的愈合机理中再次生成的毛囊可对直接抑制瘢痕增生。毛乳头细胞在体外也可分化为毛乳头型的细胞群,使毛囊干细胞的繁殖生长提供适合的条件,毛囊干细胞的多种分化潜能促使两种细胞具备生出毛发的功能,应用来自同一个种属的毛囊干细胞和毛乳头细胞解决抗性问题并为未来的毛发移植提供一种新的选择。所以,体外培育毛囊干细胞也是一种增加毛囊细胞的方式,能够获得足够的自体毛囊单位,这样的培养方法在理论上来说能够彻底解决毛囊供区不足的问题。同时,在高速发展的组织工程以及克隆技术推动下,有希望可成功筛选与克隆毛发干细胞,为此类细胞的培养分化与扩增技术奠定了基础。本文通过研究和总结国内外各种试验培育筛选毛囊干细胞以及毛乳头细胞的方法,找寻出最合适的提取和筛选毛囊干细胞和毛乳头细胞的方法,并进行体外培育扩增,通过两者混合制造出细胞悬液并进行动物实验,通过将混合物悬液注射入裸鼠背部,并观察生长出的毛发,之后对毛发进行染色切片以观察重建的类毛囊器官结构,并观察重建后的类毛囊器官的功能。


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