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繁茂膜海绵放线菌活性筛选、诱导的研究

郭鹏飞  
【摘要】:海绵体内聚集了大量的种类不同的海洋微生物,多种研究表明,海绵微生物是海绵活性物质生物合成的参与者和直接合成者。论文以繁茂膜海绵相关微生物为研究对象,开展了可培养放线菌的筛选、活性代谢产物分离提取、微生物共培养诱导及海绵胞内菌的多样性等方面的研究。 以繁茂膜海绵中分离的多种放线菌株为材料,采用常规的抗菌、抗肿瘤活性模型对菌株的活性进行了筛选。以菌株稳定性、活性物质稳定性和极性为主要标准,对具有初步活性的相关菌株进行了考察,获得一株目标菌株Hp-109。 对Hp-109产生活性物质的发酵条件进行了优化。在优化发酵条件下获得的Hp-109发酵液,通过萃取、硅胶柱、Sephadex柱PHPLC的组合,分离获得较高纯度的活性物质S。S经结构检测初步显示为两种同系物组成的混合物,Antibase数据库搜索表明两种同系物均可能是新化合物,最终鉴定正在进行中。 参考海绵相关微生物在海绵组织中共生的微生态环境,对海绵微生物共培养诱导活性物质的新思想、新技术作了初步的探索,结果表明共培养诱导能够产生不同于单培养时产生的代谢产物。同时对抗菌活性筛选的培养基进行了考察,得到了优化的培养基SM和M2。 采用细胞分离的方法对海绵细胞胞内微生物的生物多样性进行了研究,结果显示在海绵胞内生存着不同类群的未可培养微生物群体,同时发现海绵胞内存在与降解有机污染物相关的菌株,为筛选以污染物降解为靶向的海绵微生物提供了依据。


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