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DNA分子标记技术在海带种质鉴定中的应用

赫英俊  
【摘要】: 本文在CTAB和SDS/K+两种DNA提取方法基础上,综合与改 进,建立了海带配子体DNA的提取和纯化方法。用此法得到了较高 质量的海带配子体DNA,可有效地应用于海带分子标记的研究。采 用RAPD,ISSR和AFLP三种DNA分子标记技术对海带配子体细胞 系进行了种质鉴定和评价,结果表明: 1)RAPD方法可以有效地应用于海带配子体细胞系的鉴定,用 三个RAPD引物(OPC20,OPD20和OPD15)构建的DNA指纹图谱, 不仅能将23个海带配子体细胞系区分开,而且能将每种海带的雌、 雄配子体区分开。 2)在没有其它海带配子体DNA分子标记背景资料的前提下,运 用ISSR标记方法,辅证了RAPD方法的有效性及可靠性,排除了因 原核生物的“污染”,所造成的RAPD标记方法的干扰,同时,也能 辨别非海带配子体,这可以评价海带配子体保存的实际效果。 3)AFLP分子标记结果表明,海带配子体细胞系具有高的多态性, 这对海带具体性状进行连锁标记分析,可能是有效的方法。 4)在RAPD标记的基础上。初步建立海带配子体SCAR标记, 为海带分子标记辅助选种、育种打下基础。 5)对3F、5F、12M三个实验材料,进一步用rDNA转录间隔区 (ITS1)测序分析,与已知海带配子体ITS1的差别很大,说明不是海带 配子体。 综合上述,RAPD,ISSR和AFLP三种DNA分子标记技可以对 海带种质资源进行鉴定、评估,为海带科学保种、选种提供依据。


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