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《中国科学院海洋研究所》 2000年
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牙鲆雌核发育分析鉴定与性别决定机制研究

徐成  
【摘要】: 本研究应用同工酶和随机扩增多态性DNA(RAPD)方法,分析了牙鲆野生种 群和雌核发育群体的遗传多样性和遗传分化水平;应用RAPD方法对比分析了雌 核发育牙鲆的亲鱼和子代DNA样品;采用PCR扩增牙鲆SRY同源片段并进行了序 列分析;将RAPD扩增产物中性别连锁DNA片段克隆与测序。主要结果有: 1.牙鲆雌核发育群体同工酶的Ldh-C,Cat两个基因座位发生了重组,基因座位 与着丝点之间的重组率分别为52.6%和29.8%;雌核发育群体RAPD分析发现136 个DNA片段中有22个发生基因分离,但由于研究方法的局限,不能确定是否 发生基因重组。 2.牙鲆雌核发育群体的同工酶多态座位比例和平均杂合度分别为6.90%和 0.0350;研究中提出了RAPD遗传多样性参数修正算法;野生种群RAPD多态片 段比例37.57%,多态座位比例20.88%,平均杂合度0.0852;雌核发育群体RAPD 多态片段比例16.18%,多态座位比例8.98%,平均杂合度0.03898。同工酶与 RAPD方法得出结果基本一致。 3.牙鲆雌核发育群体与野生群体之间的RAPD遗传相似度I=0.9036,遗传距离 D=0.1014,已超过一般鱼类地理种群之间的遗传距离值。雌核发育群体的遗 传多样性指数(H_o=7.1982)远低于野生群体(H_o=28.0986)。雌核发育 野生群体H_(pop)/H_(sp)=0.9716,(H_(sp)-H_(pop))/H_(sp)=0.0284,表明97.16%的遗传多 样性是由群体内不同个体间的差异造成的,只有2.84%遗传多样性与群体间分 化有关。 4.分析过同工酶多态座位比例、同工酶平均杂合度、RAPD多态片段比例、RAPD 多态座位比例、RAPD平均杂合度、群体遗传多样性指数H_o等遗传多样性参数, 牙鲆雌核发育群体各参数比野生群体减少55.39%-77.74%,说明它的遗传多 样性严重损失。 5.采用RAPD对照分析亲本与雌核发育子代胚胎的DNA样品。结果表明,雌鱼有、 雄鱼无的基因,雌核发育子代表达:雌鱼无、雄鱼有的基因,雌核发育子代不 表达,正常受精二倍体对照组表达正常。证明牙鲫雌核发育子代的遗传物质来 自母本,雌核发育诱导使用的精子经过紫外线灭活后,遗传物质己被破坏,其 携带的遗传信息没有传给子代,在DNA水平证明了雌核发育诱导方法和结果的 可靠性。 6.进行了牙怦性别决定机制研究。PCR分析了哺乳动物性别决定基因SRY同源片 段在牙鲫的表达情况。扩增产物均无个体差异,也没有性别差异。将扩槽产物 中信号最强的sry七片段测序,其648bn序列与人SRY基因相应的419bn片段 进行了同源性分析,两者同源性为35%,同源性很低,只有随机的碱基重合。 由于牙鲫 SRY PCR扩增带没有全部分析,不能肯定牙鲫没有 SRY同源片段。RAPD 分析确定3个引物的4条扩增片段与性别相关,分别克隆、测序,5134和5145-S 两个片段得到了完整序列。
【学位授予单位】:中国科学院海洋研究所
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:Q959.4;S965.399

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【引证文献】
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4 邹远超;匙吻鲟雌核发育诱导及其相关机制研究[D];华中农业大学;2011年
5 王静;雌核发育二倍体鲫鲤克隆体系的建立及其衍生后代生物学特性的研究[D];湖南师范大学;2010年
6 孙鹏;牙鲆性腺分化发育及类固醇激素T和E2对性腺分化的影响[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2009年
7 王宏田;牙鲆免疫系统和抗病力的研究[D];中国科学院海洋研究所;2000年
8 潘英;人工诱导扇贝雌核发育的研究[D];中国海洋大学;2003年
9 连建华;性别控制技术与选择标记在牙鲆育种中的应用研究[D];中国海洋大学;2004年
10 游翠红;两种小型鱼类的某些基因组特征研究[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 孙威;牙鲆、异质雌核发育牙鲆子代及大菱鲆的受精细胞学观察[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
2 王丽娟;牙鲆(Paralichtys olivaceus)性别相关基因dax1的克隆与表达分析[D];山东大学;2011年
3 戈文龙;牙鲆染色体操作[D];中国海洋大学;2004年
4 侯吉伦;牙鲆(Paralichthys olivaceus)减数分裂雌核发育和有丝分裂雌核发育的细胞学研究[D];东北农业大学;2010年
5 邹拓谜;人工诱导团头鲂和鲤鱼雌核发育及相关研究[D];湖南师范大学;2011年
6 陈宝增;斑马鱼雌核发育诱导及早期胚胎发育研究[D];河北大学;2009年
7 吴清明;大黄鱼同质雌核发育的诱导及遗传分析[D];集美大学;2009年
8 鲍迪;鲤鲫杂交和鲤鱼雌核发育子代的同工酶及DNA的遗传分析[D];天津师范大学;2012年
9 商文聪;电刺激诱导栉孔扇贝(Chlamys farreri)雌核发育的参数优化及细胞学分析[D];中国海洋大学;2012年
10 江山;金鱼雌核发育及其性别分化相关基因的表达[D];上海海洋大学;2012年
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