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《中国科学院研究生院(海洋研究所)》 2003年
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牡蛎非整倍体的制备及其生物学特性研究

巩宁  
【摘要】:非整倍体是指染色体组中有个别染色体缺失或增加的类型。与高等动物不 同,贝类能够耐受个别染色体数目的增减而存活。本研究中,我们通过二倍体和 三倍体杂交的手段,人工制备并筛选了长牡蛎非整倍体,利用荧光原位杂交 (FISH)技术和同工酶方法对非整倍体进行了鉴定,探讨了各种类型非整倍体 的发生频率、存活能力和生长状况,并从生物能量学角度对生长差异进行了分析。 结果如下: 1、在 1 龄和 4 龄时对二倍体、三倍体杂交组长牡蛎进行了染色体计数,发现两 杂交组产生非整倍体的频率不同: (1) DTA 组(2n♀×3n♂)产生了较高比例的非整倍体。1 龄时占 82.5%, 4 龄时占 83.7%。其中 1 龄时 2n 水平的非整倍体占 75%,3n 水平的占 7.5%;4 龄时 2n 水平的占 81.6%,3n 水平的占 2.1%。除了非整倍体 外,还发现了一定比例的二倍体,1 龄时为 17.5%,4 龄时为 16.4%。 未发现三倍体。 (2) TDA 组(3n♀×2n♂)产生了较多的整倍体(88.1%)和少量非整倍 体(11.9%),4 龄时该比例变化不大。在整倍体中,三倍体的比例有 所增加(从 1 龄的 30.9%到 4 龄的 41.1%),二倍体的比例略有下降(从 1 龄的 57.2%到 4 龄的 47.1%)。 从以上结果可以看出,二倍体、三倍体杂交是进行贝类非整倍体制备的 有效手段。在牡蛎中,三倍体父本和母本产生非整倍体子代的比例不同,雄 性三倍体产生了较多的非整倍体后代。 2、本研究共发现 2n+1、2n+2、2n+3、3n-2 和 3n-1 五种类型的长牡蛎非整倍体, 其中 2n+2 和 2n+3 两种类型为首次报道。染色体数为 24-27 的个体可能不能 存活。在 1 龄时发现的 2n+3 和 3n-2 两种类型在 4 龄时未发现,并且 2n+2 类 型非整倍体的比例有所下降。可能是个体死亡或发生了染色体丢失。但作为 一个整体,非整倍体的存活能力与整倍体接近。 - 1 - WP=6 巩宁 牡蛎非整倍体的制备及其生物学特性研究 中国科学院研究生院博士学位论文 3、利用 rDNA 的 ITS1、ITS2 序列作引物,PCR 扩增的方法制备了长牡蛎 10 号 染色体的特异性探针,对长牡蛎的三体 10 进行了荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)鉴定。FISH 方法是进行非整倍体鉴定的有效手段。同 时采用淀粉凝胶和聚丙烯酰胺凝胶电泳,对长牡蛎非整倍体进行了 8 种同工 酶的分析。其中,苹果酸脱氢酶(MDH)的一个位点上,两个非整倍体个体 (三体和双三体)出现了预期的酶谱。该结果对非整倍体的鉴定及利用非整 倍体进行酶基因的染色体定位打下了基础。 4、对人工制备的长牡蛎非整倍体进行了生长研究。在一龄和四龄时,染色体数 目对长牡蛎生长的影响均极其显著。一龄时,三倍体的全湿重在比二倍体大 64.7%;四龄时,三倍体的全湿重在比二倍体大 79%,软体部湿重大 98%。 作为一个整体,非整倍体的各个生长参数均小于二倍体和三倍体。2n+2 型非 整倍体小于其它类型。三体之间的生长差异较大,说明不同染色体的增加对 生长的影响程度不同。对长牡蛎的二倍体、三倍体和非整倍体进行了能量学 研究。三倍体用于生长的能量大于二倍体和非整倍体,二倍体的生长能大于 非整倍体。非整倍体与二倍体能量利用上的差异可能是二者生长差异的原因 之一。 5、对养殖的长牡蛎、近江牡蛎进行了染色体计数。这两种牡蛎的二倍体染色体 数均为 20,但制片中都发现了数目不足 20 的非整倍体细胞。并且个体小的 牡蛎表现出了较高的细胞非整倍体率。经回归分析发现,全湿重与细胞非整 倍体率呈负相关,回归关系显著。
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(海洋研究所)
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:Q953

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【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 郑怀平;海湾扇贝两个养殖群体数量性状及壳色遗传研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 范燕;用实时荧光定量PCR技术鉴定普通荞麦(Fagopyrum esculentum Moench)三体系列[D];贵州师范大学;2008年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 孔素萍;段乃彬;王永清;王克安;杨宁;刘贤娴;曹齐卫;;秋水仙素对枇杷离体茎段培养的影响[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
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5 赵西宁;王文和;郝培;;百合6个品种的染色体核型分析[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
6 江香梅;温强;肖复明;叶金山;江梅;;闽楠群体遗传多样性RAPD分析[A];第三届南方林木育种研讨会论文(摘要)集[C];2006年
7 张洁;陈立侨;周忠良;唐思贤;;中华绒螯蟹同工酶发育遗传学研究 Ⅰ.长江中华绒螯蟹不同组织同工酶的特异性分析[A];动物学专辑——上海市动物学会1996年年会论文集[C];1996年
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 于红;牡蛎良种选育的遗传学基础研究[D];中国海洋大学;2010年
2 丁森;海水和淡水条件下不同蜕壳时期凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)生理生态学的比较研究[D];中国海洋大学;2010年
3 金波昌;池塘养殖刺参(Apostichopus japonicus)食物来源的稳定同位素法研究[D];中国海洋大学;2010年
4 秦伟;新疆野苹果繁育特性及种质资源亲缘关系研究[D];新疆农业大学;2010年
5 李培英;新疆草坪用野生偃麦草种质资源评价[D];新疆农业大学;2010年
6 唐丽;湖南南天竹遗传多样性及园林利用评价体系研究[D];中南林业科技大学;2007年
7 刘卫东;湖南假俭草遗传多样性、生理学特性及护坡性能研究[D];中南林业科技大学;2010年
8 朱彦涛;甘蓝型油菜Polima CMS和陕2A CMS的形态和生化特征及其胞质遗传物质的比较研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 荣立苹;东北地区野生百合种质资源及遗传多样性研究[D];沈阳农业大学;2010年
10 翁天均;基于45S rDNA-FISH与GISH分析的草莓属(Fragaria)野生种亲缘关系与系统分类研究[D];西南大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 朱银城;猪PGM1基因的序列、表达谱及多态性分析[D];华中农业大学;2010年
2 马颖敏;中国侧柏地理种源核型分析与进化趋势[D];山东农业大学;2010年
3 王爱喜;仙客来种质核型及其分类的研究[D];山东农业大学;2010年
4 杨科家;元宝枫叶色、叶形与翅果的变异研究[D];山东农业大学;2010年
5 吴林园;四种形态类型诸葛菜的遗传多样性分析[D];安徽农业大学;2010年
6 蒋玮;不同类型啤酒大麦品种遗传多样性及遗传差异的SSR分析[D];甘肃农业大学;2010年
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8 徐亘博;半滑舌鳎等九种海水鱼微卫星分子标记的开发和应用[D];中国海洋大学;2010年
9 李英;环境因子变化对凡纳滨对虾蜕皮同步性和生理特征影响的实验研究[D];中国海洋大学;2010年
10 马国强;棘头梅童鱼和黑鳃梅童鱼的形态学、遗传学研究[D];中国海洋大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前4条
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前5条
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中国博士学位论文全文数据库 前2条
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中国硕士学位论文全文数据库 前7条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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6 孙玉强;张献龙;;棉花四倍体栽培种和二倍体野生棉原生质体融合产生非整倍体[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
7 唐祈林;荣廷昭;;玉米×四倍体多年生玉米杂种F_2非整倍体的研究[A];中国草学会牧草育种专业委员会2007年学术研讨会论文集[C];2007年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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