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《中国科学院研究生院(海洋研究所)》 2005年
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中国明对虾体内凝结反应过程中相关免疫基因的克隆与表达研究

刘逸尘  
【摘要】:对虾疾病在世界范围内的频频爆发,给地区经济造成了重大损失。然而到目前为止,我们对于对虾免疫系统的分子机制还知之甚少,深入了解其免疫应答过程,包括异物识别,信息传递以及作用方式等是从根本上解决疾病问题的关键之一。甲壳动物具有开放的循环系统,它们必须通过有效的凝结系统来封固伤口以防止血淋巴的损失以及捕获病原微生物防止它们扩散进入血腔。C型凝集素(C-type lectin)作为宿主防御系统中的一种模式识别受体,在病原识别和细胞间的相互作用上具有重要作用,此外它们还参与止血、凝固、物质运输和创伤修复等一系列作用;谷氨酰胺转移酶(TG)和丝氨酸蛋白酶(SP)及其抑制剂(SPI)家族分别是在无脊椎动物中发现的两种凝结机制中的主要参与者。本论文从中国明对虾血细胞中分别克隆了一种C型凝集素基因(Fclectin)、参与凝结过程的谷氨酰胺转移酶基因(FcTG)以及参与凝结级联反应和酚氧化酶原激活系统的两种丝氨酸蛋白酶基因(SP-1和SP-2)和两种丝氨酸蛋白酶抑制剂基因(SPI-1和SPI-2),分析了它们的分子结构特征,预测了其可能的作用,并对它们的组织分布及应答不同病原感染的表达变化模式进行了研究。 首次从对虾中克隆了C型凝集素基因(Fclectin),它具有两个串联的参与模式识别的功能域(CRD),该分子含有保守的Ca2+结合位点1和具有糖结合潜能的Ca2+结合位点2,比对结果发现该基因可能具有半乳糖结合功能,它属于C型凝集素超家族的成员之一;Northern blot和原位杂交结果显示,Fclectin基因在部分血细胞中呈组成型表达;利用毛细管电泳半定量RT-PCR方法分别研究了细菌和病毒感染后该基因的表达特征,并初步尝试了利用体外培养的原代血细胞系统研究LPS刺激后Fclectin的表达变化。该基因在感染或刺激后表达水平有明显的改变。 利用3'和5'RACE技术从中国明对虾血细胞中克隆了一个FcTG基因,它与斑节对虾的谷氨酰胺转移酶基因有93%的相似性;比对结果发现该基因包含一个TG特有的催化核心结构域和一个相对保守的Ca2+结合位点,可能编码一种具有活性的TG;原位杂交结果显示FcTG主要在血细胞中表达,在淋巴器官管腔的血细胞中表达尤为丰富,推断该基因可能主要在吞噬细胞中表达;病原的刺激未
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(海洋研究所)
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S917.4

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【引证文献】
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中国博士学位论文全文数据库 前4条
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中国硕士学位论文全文数据库 前9条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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10 程伟,刘志昕;对虾白斑综合症病毒的分子生物学研究进展[J];水产科学;2005年05期
中国重要会议论文全文数据库 前3条
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3 郭志勋;李卓佳;林黑着;叶乐;冯娟;杨莺莺;陈永青;;芽孢杆菌对凡纳对虾生长及免疫的影响[A];可持续水产养殖——资源、环境、质量——2003水产科技论坛论文集[C];2003年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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2 张彦娇;盐度和温度对大菱鲆非特异性免疫力的影响及淡水螯虾相关免疫因子的研究[D];中国海洋大学;2010年
3 贾爱荣;大菱鲆4种免疫相关基因的克隆、表达分析及溶藻弧菌溶血素的研究[D];中国海洋大学;2010年
4 丁森;海水和淡水条件下不同蜕壳时期凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)生理生态学的比较研究[D];中国海洋大学;2010年
5 孟宪红;中国对虾“黄海2号”对WSSV的抗病性分析[D];中国海洋大学;2010年
6 赖晓芳;中国对虾应答WSSV侵染相关基因的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 王丽燕;面包酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)对中国卤虫(Artemia sinica)抗弧菌感染的影响与酚氧化酶原在卤虫早期发育过程中表达时相的研究[D];中国海洋大学;2010年
8 李云;高压氧、2ME2和Cystamine对全脑缺血模型中凋亡相关因子的多重作用及对海马神经元的保护机制[D];山东大学;2010年
9 王孟强;栉孔扇贝(Chlamys farreri) Toll样受体信号通路免疫功能研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
10 罗展;凡纳滨对虾两种C-型凝集素的基因克隆和功能研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郭慧芝;中华绒鳌蟹cDNA文库的构建及免疫相关基因的克隆与表达[D];华中农业大学;2010年
2 周慧慧;刺参(Apostichopus japonicus)肠道益生菌的应用研究[D];中国海洋大学;2010年
3 岳峰;三疣梭子蟹在氨氮胁迫下免疫应答与解毒代谢机制的研究[D];中国海洋大学;2010年
4 谷珉;仿刺参(Apostichopus japonicus)免疫增强剂的体外筛选与养殖试验的评估[D];中国海洋大学;2010年
5 白楠;凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei、仿刺参Apostichopus japonicus免疫增强剂使用频率和免疫疲劳的研究[D];中国海洋大学;2010年
6 谢鹏;脂多糖、多巴胺对凡纳滨对虾血细胞作用机制的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 刘君;对虾抗白斑综合征病毒益生菌的筛选及其作用效果[D];中国海洋大学;2010年
8 杜以帅;酶解海藻产物对刺参(Apostichopus japonicus)肠道菌群和免疫相关因子的影响[D];中国海洋大学;2010年
9 夏书琴;产谷氨酰胺转胺酶茂源链轮丝菌诱变育种及发酵条件研究[D];江南大学;2010年
10 尚祖萍;牛肉重组方法及效果研究[D];吉林大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 夏西超;KK-42对凡纳滨对虾生长发育相关基因时空表达的影响[D];河南师范大学;2011年
2 章跃陵;南美白对虾类Ig的定性、功能和免疫分子进化的研究[D];厦门大学;2003年
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9 邱丽梅;栉孔扇贝(Chlamys farreri)Toll样受体及其信号传递相关基因的克隆与表达[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2006年
10 黄文树;锯缘青蟹一种新的阴离子抗菌肽scygonadin及其基因的分离与鉴定[D];厦门大学;2006年
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3 黄洪敏;细菌基因组DNA对鱼类免疫活性的调节作用[D];浙江大学;2005年
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6 严芳;凡纳滨对虾血蓝蛋白免疫学活性及其作用机制的研究[D];汕头大学;2008年
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8 罗秀萍;蛋白质折叠的计算机模拟研究[D];山东师范大学;2009年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前6条
1 赵大显;陈立侨;;中华绒螯蟹免疫相关基因的研究进展[J];水产科学;2010年04期
2 张红英;李义;郭明凯;郝向举;孙汉;王玥;;枯草芽孢杆菌基因组DNA对中华绒螯蟹非特异性免疫因子的影响[J];淡水渔业;2010年01期
3 周小燕;魏育红;杨贺;贡成良;薛仁宇;曹广力;朱越雄;;LAMP和巢式PCR检测克氏原螯虾白斑综合征病毒(WSSV)的比较[J];江苏农业科学;2011年01期
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中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 王丽燕;面包酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)对中国卤虫(Artemia sinica)抗弧菌感染的影响与酚氧化酶原在卤虫早期发育过程中表达时相的研究[D];中国海洋大学;2010年
2 刘媛;三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)cDNA文库构建、EST分析及抗脂多糖因子研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
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4 周怡;Fortilin和TAT融合蛋白在毕赤酵母的表达及对凡纳滨对虾免疫功能的影响[D];中国海洋大学;2011年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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7 张红英;细菌基因组DNA对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)免疫功能调节作用的研究[D];苏州大学;2010年
8 李婷;中国明对虾抗脂多糖因子(ALFFc)基因的重组表达[D];河北大学;2010年
9 吕黎;KK-42对感染嗜水气单胞菌的日本沼虾成活率的影响及其可能的机制[D];河南师范大学;2012年
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中国期刊全文数据库 前10条
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10 黄冰心;基于凝胶电泳的中国明对虾血浆蛋白质组学研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张晋康;中国明对虾淋巴器官在弧菌刺激下的差异蛋白质组学研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
2 孙姝娟;中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)TOR基因的分子克隆及相关信号通路的初步研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
3 迟艳红;中国明对虾Rac1/PI3K/Akt通路相关基因的克隆和功能关系的初步研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2012年
4 宋光年;中国明对虾凋亡基因caspase的克隆、表达及功能的初步分析[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
5 田丽萍;中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)金属硫蛋白基因和启动子的克隆与鉴定[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
6 邵明瑜;中国明对虾(Fenneropenaeus Chinensis)淋巴器官和造血组织的细胞学和组织化学及外源物质对其作用的影响[D];中国海洋大学;2004年
7 王维新;酵母双杂交系统用于对虾白斑综合症病毒(WSSV)受体基因的筛选[D];中国海洋大学;2004年
8 姜俊义;对虾甲壳形成机理初步研究[D];中国海洋大学;2004年
9 张绍萍;中国明对虾和玻璃海鞘的核型分析和基因定位研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2004年
10 梁晓辉;中国明对虾雌性蛋白的纯化方法及性质研究[D];河北大学;2005年
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