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《中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)》 2002年
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人精子膜Cl~-通道的特性和男性抗生育药对Ca~(2+)通道的作用

白俊平  
【摘要】: 哺乳动物精子膜离子通道对精子的成熟、获能和顶体反应(acrosome reaction, AR)有重要作用,已有的资料表明,当精子所在环境中缺乏Cl-或Cl-通道阻断剂存在时,AR受到抑制。但由于精子太小以及它特殊的立体结构和高度分化特点,目前还难以用膜片箝技术直接记录人精子膜离子通道电流,从而获得有关人精子膜Cl-道类别及电生理特性的基本资料。本文报告,将抽提的人精子膜蛋白重组于脂质体脂双层膜,并进而通过脱水-复水法使之融合成可用于膜片箝研究的巨脂质体(直径10 (m),在NMDG-Cl溶液中记录到三种不同单位电导的通道活动。它们都可被Cl-通道阻断剂SITS浓度依赖地抑制。研究还表明,它们的开放有一定的电压依赖性;对其开放、关闭时间分布进行拟合,可得到两个开放和两个关闭时间常数;还观察到电导亚态和簇状发放的存在。 近来的研究发现,某些中药成份具雄性抗生育作用。其中以棉酚(gossypol)和雷公藤(Tripterygium wilfordii)为代表,已受到人们的广泛关注,目前已从雷公藤中分离出多种具雄性抗生育作用的单体成份。但关于这些药物对通道影响方面的研究还很缺乏。我们利用精子的前体细胞,生精细胞为实验模型,结合膜片箝全细胞记录技术分析了男性抗生育药物:棉酚、雷公藤总甙(multi-glycosides of Tripterygium wilfordii, GTW)及其中的三种单体成份demethylzeylasteral (TZ)、南蛇藤素(celastrol)和L-表儿茶酸(L-epicatechin)对小鼠生精细胞离子通道的作用;并利用金霉素(chlortetracycline)荧光染色法观察了TZ对成熟精子AR的作用。观察到这 WP=6 些药物均明显抑制小鼠生精细胞的T型Ca2+通道。实验还观察到TZ在抑制Ca2+通道的有效浓度范围内抑制孕酮诱发的AR,作用具浓度依赖性。这些结果表明药物抑制Ca2+通道并进而抑制AR,可能是它们产生雄性抗生育作用的机制之一。
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:R33;R285

【参考文献】
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