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《中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)》 2004年
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产纤维素酶放线菌及其酶学性质和淡水湖底泥微生物区系研究

佟勇  
【摘要】:1.产纤维素酶放线菌及其酶学性质研究 为了对产纤维素酶嗜热放线菌及其酶学性质进行研究,从长期堆积猪牛粪便的堆肥中分离筛选出嗜热嗜碱放线菌5 株,选择其中1 株能够在纤维素刚果红培养基上生长良好、酶活较高的菌株继续进行实验,并命名为NO5。此菌为革兰氏阳性好气菌,基丝生长发育良好,无横隔,也不断裂。孢子丝不长,直,略弯曲。孢子卵圆形,表面光滑。此菌的16S rDNA 经测序,长度为1417bp。在GenBank中进行BLAST 相似性分析,利用Paup 4.0 构建系统发育树,并结合形态特征、培养特征及生理生化特征,确定此菌可以划分为链霉菌属,且与嗜热淀粉酶链霉菌(S. thermodiastaticus)有较近的亲缘关系。对其进行液体发酵实验,结果表明:此菌在培养96-144h 时羧甲基纤维素酶(CMCase)和β-葡萄糖苷酶(BG)活力较高,在120 小时酶活均达到最大值。对其进行固态发酵研究,并进行碳源优化实验,发现在四种固态发酵培养基(碱处理小麦茎杆、碱处理玉米棒、碱处理麸皮、碱处理Whatman 纤维素粉)中,碱处理玉米棒是BG 酶最适碳源,碱处理Whatman 纤维素粉是CMCase 的最适碳源。酶学性质研究结果表明:CMCase 酶最适反应pH 为8.5,在pH 8-9 之间酶活力较高;BG 酶最适反应pH 为9.0,在pH8.5-9.5 之间酶活较高。它们的最适反应温度均为60℃,在50-70℃之间酶活均较高,70℃以后酶活迅速下降。热稳定性研究结果表明:60℃时保温2 小时,CMCase 酶活力可维持在60%左右,70℃时保温2 小时,酶活仍可维持在30%左右。上述研究结果表明,NO5 放线菌为嗜热嗜碱放线菌,其所产纤维素酶在高温强碱性条件下酶活较高,且具有较好的热稳定性。 2.淡水湖底泥微生物区系研究 为调查底泥微生物区系在浅水型淡水生态系统及营养转换过程中的作用,对巢湖与龙感湖底泥微生物区系垂直分布情况进行比较研究。巢湖是全国三大污染湖之一,然而,与其相邻的龙感湖水质较好。龙感湖水中总磷和总氮平均含量分
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:Q939.99

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