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《中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)》 2005年
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IL-18在肠缺血—再灌流致肺损伤中作用的研究以及小鼠新型IL-18分子的克隆、表达和功能分析

杨永杰  
【摘要】:多器官功能障碍综合症(MODS),是临床上危重病人的主要死亡原因,而急性呼吸衰竭综合症(ARDS)是其重要组成部分。肠缺血-再灌流(I/R)不仅造成肠自身的损伤,还是临床上引起MODS和ARDS的主要机制。本文主要研究在小鼠肠缺血-再灌流致肺损伤模型中IL-18表达水平的变化、IL-18的功能及其可能的作用机制。采用随机分组的方法分为3组,用夹闭上端肠系膜动脉30分钟、再灌流3小时作为小鼠I/R模型组;假手术组(sham)除了不进行动脉夹闭,与I/R组一样;以及正常小鼠组(不进行手术操作)。1、为研究外源和内源IL-18的作用,在缺血前15分钟尾静脉分别注射IL-18或抗IL-18中和抗体;2、为研究肺组织血管通透性,于缺血前尾静脉注射伊文斯蓝(EBD);3、为研究诱导性一氧化氮合酶(iNOS)对IL-18作用的影响,iNOS的选择性抑制剂L-NIL于缺血前15分钟尾静脉注射。用Western blot和ELISA的方法检测血清IL-18,用免疫组化的方法显示肺组织IL-18水平的变化,用半定量PCR和ELISA分别检测组织和血清TNF-α的表达,通过检测组织EBD的含量、肺组织MPO活性和组织病理学改变以确定肺部的炎症损伤。与正常小鼠血清IL-18水平相比(174±18pg/mL),肠缺血-再灌流显著促进IL-18水平的迅速升高,在再灌流1小时达到峰值(660±153 pg/mL),然后逐渐降至本底水平(3小时);而假手术并不导致血清IL-18水平的明显变化。与I/R模型组相比,外源注入IL-18(I/R+IL-18),能进一步显著促进肺组织的通透性、肺部MPO活性以及组织损伤,相反,抑制内源IL-18的活性(I/R+IL-18Ab)则明显抑制肺组织的MPO活性、组织通透性以及组织损伤。而且,外源IL-18的注入,能在假手术组小鼠而非正常小鼠中,
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(上海生命科学研究院)
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:R363;Q78

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