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《中国科学院研究生院(植物研究所)》 2004年
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植物对重金属砷和镉胁迫适应的分子机理初探

何振艳  
【摘要】:随着现代工业的发展,重金属污染日趋严重。重金属污染引发的环境和健康 问题在许多国家都有报道,我国的重金属污染状况也不容乐观。土壤和水体中的 重金属污染可以通过食物链进入人体,对人类健康造成很大的危害,如诱发癌症 和畸胎等。 植物修复是一种利用植物对重金属或有机污染物的超富集能力清除或减低 污染的环境生物技术。植物修复的生物学机制的研究为这项技术走向实用化奠定 了基础。植物修复近期的进展可能来自于可更有效地富集重金属的植物品种的选 择、土壤条件的改善等;但长远看来,植物修复技术的巨大进步将取决于新的可 更好地抵抗重金属或降解有机毒物的基因的鉴定和克隆,并通过转基因技术创造 一批新的植物品种,如可迅速大量富集重金属的高生物量的用作环境净化的植 物,以及可排拒重金属吸收的粮食、蔬菜和水果等作物。 本研究针对砷污染的植物修复机制,以超富集砷的凤尾蕨属植物--蜈蚣草 为试材取得了如下进展: 1. 以从砷污染地区采集的蜈蚣草(Pteris vittata L.)为植物材料,利用抑制 消减杂交(SSH)分离了经砷诱导处理与其对照间表达有差异的cDNA片 段,以期得到与砷富集密切相关的基因。其中筛选到的一个cDNA片段 与ABC transporter(ATP-binding cassette transporter)有较高的同源性。通 过RACE方法对该基因进行了克隆,并进行了初步的结构和功能分析。 结果表明所获得的PvABCT1(Accession No.AY496966) 为一全长 cDNA,长度为2165 bp,其中开读框架为1791 bp,编码597个氨基酸。 该基因所编码的蛋白中含有2个ABC transporter特性结构域,1个 ATP-binding cassette和2个ATP/GTP结合位点(P-loop),没有明显的跨 膜区。 2. 对蜈蚣草在砷胁迫下PvABCT1基因的表达模式进行了研究。转录水平分 析表明PvABCT1的表达受砷的诱导。进一步通过PvABCT1-GFP融合 基因在洋葱细胞中的表达进行亚细胞定位,结果显示该基因可能定位于 细胞质中。 3.为了研究所克隆的尸vABCTI基因的功能,本研究构建了PvABCTI的酵 母表达载体,把该基因转入因ACR了基因缺失而对砷敏感的酵母突变株。 酵母功能互补实验表明尸侧BCT]不仅不能与ACR了基因功能互补,反而 使酵母对砷的敏感性增加,同时酵母细胞中的砷含量较未转化的酵母细 胞增加。即在转入尸vABCTI后,酵母细胞吸收了更多的砷。这暗示该 基因与娱蛤草中砷的高吸收有关。 针对食品重金属污染问题,本研究探讨了减低蔬菜对重金属吸收的方法及其 作用机理,取得了如下进展: 1.研究了钙离子和铜离子对锡离子胁迫下生菜种子萌发和植株生长的影 响,结果表明在种子萌发时外施4 mM CaCI:或0.04m留L La困03)3均可 提高生菜对重金属福的抗性。 2.通过检测0.5 mM CdCI:胁迫下生菜植株中的福含量以及外施钙离子或斓 离子后相应的锅含量,发现4 mM CaCI:可以增加锅胁迫下生菜植株中福 的积累;而0.04m留L La困03)3可以降低锅胁迫下生菜植株中锅的积累。 3.对生菜中植物络合素合酶基因进行了克隆,通过RT一PCR分析以及植物 络合素(phytochelatins,PCs)的检测,探讨了外施钙离子或斓离子对锅 胁迫下生菜植株中植物络合素合酶基因在转录水平的表达量、植物络合 素含量以及福的积累三者之间的关系。结果表明:4 mM CaC12可以提高 锡胁迫下生菜植株中植物络合素合酶基因在转录水平的表达以及植物络 合素的含量,增加锅的积累;而0.04m岁L La伽03)3虽然同样可以提高植 物络合素合酶基因在转录水平的表达以及植物络合素的含量,却能降低 福胁迫下生菜植株中锅的积累。这暗示外施钙离子可以促进用于重金属 污染环境修复的植物对重金属的吸收,而外施斓离子可以用于降低叶菜 类蔬菜中重金属锅的积累。 关键词:砷,超富集,娱蛤草,ABC转运蛋白,尸vABCTI,生菜,锅,钙,斓, 植物络合素合酶,LsPC夕I
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(植物研究所)
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:Q945

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前6条
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前8条
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中国博士学位论文全文数据库 前5条
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中国硕士学位论文全文数据库 前8条
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中国期刊全文数据库 前10条
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