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《中国科学院研究生院(植物研究所)》 2005年
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农杆菌介导的双价抗盐基因转化番茄的研究

刘晶  
【摘要】:近年来,植物耐盐生物技术研究取得了可喜的进展,特别是通过抗盐基因转化在一定程度上使植物的耐盐性得到了提高。然而,植物的耐盐性是一个多基因控制的复杂性状,依赖于多个基因之间的相互作用。因此,只是将单个基因导入植物获得的抗逆性还是远不能达到满意的效果。一般认为,将多个与耐盐相关的基因转入到同一个植物(即所谓的“复合基因转化”)将会大大提高转基因植物的耐盐能力。 渗透调节是植物抵御盐胁迫的主要方式。植物渗透调节的方式分为两类:一是在细胞中吸收和积累无机盐,如通过离子通道、Na~+/H~+逆向运输蛋白和ATP酶/H~+泵; 二是在细胞中合成有机溶质,如脯氨酸和甘氨酸甜菜碱。 我们通过农杆菌介导法向转AtNHX1(拟南芥Na~+/H~+逆向运输蛋白编码基因)的番茄(Lycopersicum esculentum L.‘Moneymaker’)株系X1OEA1自交二代植株(T2)中转入山菠菜甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)。PCR、Southern、RT-PCR、甜菜碱含量分析结果证明,BADH已经整合到目标植物基因组,并在转基因植株中转录和翻译表达。叶绿素荧光(Fv/Fm)、相对电导率(Rc/Rc’)、叶绿素含量(Chla~+b)、叶绿素a/b比(Chla/b)、光合速率(Pn)测定结果表明,200 mM NaCl胁迫下,二次转化的番茄植株各项生理指标均优于转单基因AtNHX1的番茄。初步证明“复合基因转化”有助于进一步提高植物的耐盐性。同时对番茄的转化系统进行了优化,结果表明使用抗生素‘特美汀’的转化效率明显高于头孢霉素。
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(植物研究所)
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S641.2

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