甜菜夜蛾核多角体病毒中国分离株的分离鉴定及分子生物学研究

【摘要】： 本实验室于2000年在河南安阳从罹病甜菜夜蛾体内分离出一株甜菜夜蛾核多 角体病毒（SeMNPV-CN）。经电镜观察，该病毒为多粒包埋型，病毒囊膜中含1-4 个核衣壳。病毒多角体形态多样，平均大小为1.45μm。生物测定结果表明，其对 二龄、三龄甜菜夜蛾的LC_(50)分别为6.6×10~4和2.62×10~5PIB/ml。限制性内切酶分 析表明它与美洲甜菜夜蛾病毒分离株相似性很强，基因组大小约为125.8kb。以鸟 枪法将SeMNPV-CN基因组EcoR I 20条酶切片段中的14条克隆于质粒载体 pUC18中。以PCR的方法扩增出该病毒的多角体基因及几丁质酶基因，序列测定 结果表明该病毒与美洲分离株的多角体基因完全相同，几丁质酶基因的核苷酸和氨 基酸同源性分别达到98.8％和99.3％。与16种来源于病毒和原核生物几丁质酶的氨 基酸序列比较，结果显示杆状病毒的几丁质酶可能与原核生物的几丁质酶来源于共 同的祖先。