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《中国科学院研究生院(武汉病毒研究所)》 2007年
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食品卫生微生物快速测试卡的研制

孙永  
【摘要】: 快速测试卡是近年来发展起来的一种微生物快速检测方法,以滤纸为载体和以Petrifilm为载体的测试卡已被众多检测部门认可和应用。但滤纸不透明,生长于其中的细菌肉眼往往不可见,从而造成计数结果偏少;3M公司Petrifilm所用凝胶剂吸水性能不好,稀释液在凝胶层上扩散不规则,往往成股流动,溢出测试卡;另外,Petrifilm载体底板不透明,光源不能透射,不能用自动计数仪计数,需更多人力物力。因此,克服这些缺点,改进微生物快速测试卡是微生物快速检测的迫切需求。本研究提出将高吸水性树脂聚丙烯酸钠用作凝胶剂的设想,通过水溶液聚合法合成高吸水性树脂聚丙烯酸钠,从应用于培养基凝胶剂的基本条件出发,研究了其用于微生物培养基凝胶剂的可行性;然后选用吸水速度快、透明度好的卡拉胶和聚丙烯酸钠进行组合和优化,以增加胶体的吸水和凝固性能;最后设计和筛选测试卡的其它组件,研制出测试卡。 1.聚丙烯酸钠的化学合成 采用水溶液聚合法合成聚丙烯酸钠;改变合成的4个重要因素,通过正交优化法,合成聚丙烯酸钠的最大吸水率为:414.1±15.2g/g,吸收9g/L NaCl溶液为:46.65±4.01 g/g。 2.聚丙烯酸钠的生物学性能研究 聚丙烯酸钠对16种测试菌株均无抑制作用出现;微生物不能以聚丙烯酸钠为唯一碳源生长;在聚丙烯酸钠载体上,微生物可以长出单菌落且数量和琼脂平板在统计学上无显著差异。可初步确定聚丙烯酸钠可以用作快速测试卡的凝胶剂。 3.胶体的优化与其它组件的选择 卡拉胶和聚丙烯酸钠以8∶1混和后吸冷水可形成较好凝胶,1ml去离子水在凝胶层上扩散区域为直径5.8cm的圆形;筛选出水胶用作胶粘剂,将凝胶剂粉末粘附于PET透明塑料上。 4.测试卡的组装 测试卡通过上、中、下三层粘合来实现:下层为透明底板,通过水胶粘附营养物质,厚度为0.2mm,长度为9.0cm,宽度为7.5cm;中层为中空的吹塑纸,厚度为0.10mm,中空部分为直径6.0cm的圆形,形成微生物培养的凹面;上层PET塑料厚度为0.08mm,长度为9cm,宽度为7.5cm,通过水胶粘附吸水性凝胶剂;将三层粘合为完整的测试卡,灭菌后即可使用。
【学位授予单位】:中国科学院研究生院(武汉病毒研究所)
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:TS207.3

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【引证文献】
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【同被引文献】
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