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《中国农业科学院》 2010年
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猪圆环病毒2型感染对猪肺泡巨噬细胞模式识别受体转录水平的影响

王建立  
【摘要】: 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起仔猪断奶后多系统衰竭综合征等相关疾病的重要病原,并可导致感染猪发生免疫抑制,肺脏和肺泡巨噬细胞(PAM)是其靶器官和靶细胞。本研究分析PCV2感染后肺泡巨噬细胞的模式识别受体(PRR)的mRNA转录动态,旨在从分子水平研究PCV2感染对PAM非特异免疫功能的影响。 应用RT-PCR/PCR技术从PAM中扩增和克隆了猪模式识别受体(PRR)TLR2、TLR4、CD16、CD18和β-actin的部分基因片段,经质粒PCR和测序鉴定,获得了5种分子的阳性重组质粒。通过实时荧光定量PCR方法(Real-time FQ-PCR)建立了标准曲线及回归方程,其相关系数(r2)均在0.99以上。 将24头40日龄左右健康仔猪分为对照组和感染组,经口鼻接种PCV2 B1株细胞毒,分别于感染后3、7、14、28天宰杀获取肺泡巨噬细胞。应用Real-time FQ-PCR检测PCV2感染后PAM模式识别受体TLR2、TLR4、CD16、CD18m RNA的转录动态。结果显示,在接种后3天,TLR2、TLR4、CD16 mRNA的转录水平均高于对照组,且TLR4、CD16差异极显著,而CD18 mRNA的转录水平低于对照组,差异显著;在接种后7天,TLR2、TLR4、CD16 mRNA的转录水平仍高于对照组,差异不显著,而CD18显著高于对照组;在接种后14天,TLR2、TLR4、CD16 mRNA的转录水平低于对照组,TLR2差异显著,CD18mRNA的转录水平仍高于对照组,差异不显著;在接种后28天,TLR2、TLR4、CD16与CD18的mRNA的转录水平均接近对照组。以上结果显示,PCV2感染PAM后可引起PAM对异物识别吞噬功能与吞噬后信号转导功能出现紊乱,影响了PAM吞噬和清除病原微生物的能力。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S858.28

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