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《中国农业科学院》 2011年
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柴胡、苦参、大黄、黄柏对人宫颈癌细胞抑制效果的研究

张丽云  
【摘要】:宫颈癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤之一,目前采用的化学合成药物治疗宫颈癌的同时对机体也产生毒害作用。因此,筛选和寻求更为有效、低毒的天然药物成为研究热点。据报道,柴胡、苦参、大黄、黄柏的有效成分对某些肿瘤的预防和治疗具有一定作用,但对宫颈癌的治疗作用鲜有文献报道。本研究选取柴胡、苦参、大黄、黄柏的水提取物,旨在评估四种中药提取物对人源宫颈癌Hela细胞的作用,为探讨其作用机制、开发抗宫颈癌新药提供理论依据。 本研究以体外培养的人宫颈癌Hela细胞为研究对象,用不同浓度的柴胡、苦参、大黄和黄柏水煎剂分别处理Hela细胞24h、48h后,采用光学倒置显微镜对Hela细胞的形态学变化进行观察;通过噻唑蓝法(MTT法)检测四种中药对Hela细胞生长的影响;并通过DNA琼脂糖凝胶电泳分析Hela细胞DNA分段变化,对四种中药水煎剂对Hela细胞作用的机制进行初步探讨。 MTT检测发现,四种中药水煎剂对Hela细胞均有明显的抑制效果,且具有时间-浓度依赖性,其中柴胡水煎剂作用Hela细胞48h后抑制效果明显高于24h,80ml/L浓度组抑制率为52.90%;5ml/L苦参水煎剂48h抑制率即达到23.17%,最高抑制率为57.19%;80ml/L大黄水煎剂作用时间为48h时抑制率达55.06%;黄柏水煎剂对Hela细胞抑制效果明显,抑制率为8.43-62.85%。 Hela细胞分别经浓度为5、10、20、40、80ml/L(生药浓度)的四种中药水煎剂处理24h和48h后的形态学观察可见:对照组细胞呈多边形或不规则状,细胞贴壁良好且链接紧密;柴胡组细胞变圆,生长稀疏,细胞体积增大;大黄组高浓度(80ml/L)组细胞贴壁率差,且48h破碎细胞明显增多;苦参、黄柏组细胞呈圆形,体积变小,细胞核浓缩,多数细胞脱落悬浮于培养基中,随着作用时间的延长,悬浮细胞增多。 DNA琼脂糖凝胶电泳分析显示:苦参水煎剂10ml/L及以上浓度组均呈现明显的DNA梯形(ladder);黄柏水煎剂40ml/L、80ml/L两个高浓度作用Hela细胞48h有明显的DNA梯形条带出现;大黄水煎剂作用Hela细胞48h后80ml/L浓度组出现较弱DNA梯形;柴胡水煎剂处理Hela细胞48h后各组呈现DNA断裂,但梯级格局不明显。 试验结果证明:苦参、黄柏、大黄水煎剂具有抑制Hela细胞生长并诱导其凋亡的作用。其中苦参和黄柏水煎剂对人宫颈癌Hela细胞有明显的抑制效果,最高抑制率达到55%以上,且凝胶电泳有典型的梯形条带,充分说明苦参和黄柏对Hela细胞有诱导凋亡作用,且在本研究采用的浓度范围内效果优于大黄和柴胡。 本研究为四种中药抗肿瘤的进一步研究奠定了基础,同时也为开发和利用四种中药提供了有益的借鉴。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R285.5

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