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《中国农业科学院》 2011年
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我国棉花黄萎病菌遗传多样性分析

尹志新  
【摘要】:本研究以来自全国12个省(自治区)96个县的棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)为研究对象,从培养性状、SSR和ISSR指纹图谱等方面对其进行了群体遗传多样性的研究,并结合致病力测定结果及地理来源进行了全面分析。对其中部分培养性状特殊的菌株进行了生理特性和分子鉴定;选择致病力不同的菌株,研究了生理特性与致病力的关系。为进一步研究我国棉花黄萎病菌的遗传变异、致病机理、棉花的抗病育种、抗性品种的合理布局、抗性丧失的原因,品种与病菌的互作等提供依据。得到的主要研究结果如下: 1.我国的棉花黄萎病菌在PDA培养基上存在5种不同的培养类型,B型菌株表现为菌核多,均匀密布,菌落边缘有白色圆环,占72.9%;C型菌株表现为菌核较少,大多分布在菌落周围,形成黑色圆环,菌落中间为白色,散生少量或极少菌核,占23.6%。长江流域菌株变异最大,其次是黄河流域,新疆棉区的变异最小。野生菌株均为杂合体,其单孢后代在培养性状上也存在明显的变异。 2.分离的308个野生菌株中,有14个菌株在PDA培养基上培养性状特殊,对其进行温度反应鉴定和特异性引物的分子检测。结果表明,供试菌株均为大丽轮枝菌。采用落叶型特异引物D-1/D-2和非落叶性特异引物ND-1/ND-2对供试菌株进一步检测,结果表明供试菌株中落叶型菌株为155个,约占91.2%;非落叶型菌株为15个,其中11个新疆菌株,约占新疆菌株总数的45.8%,表明我国的棉花黄萎病菌绝大多数为落叶型棉花黄萎病菌。 3.在一致的生长条件下,测定了12个致病力不同菌株的生长速率、分生孢子产量和毒素分泌量。结果表明,不同菌株的生长速率、分生孢子产量及毒素分泌量存在很大的差异,而且与菌株的致病力均有一定的正相关性;菌株的生长速率和分生孢子产量与是否落叶不存在相关性,而菌株的毒素分泌量与是否落叶存在一定的相关性。 4.依据莴苣黄萎病菌(Verticillium dahliae)全基因组序列设计SSR引物,建立并优化SSR反应体系,筛选出13对多态性较高的引物,选择170个代表菌株,进行SSR指纹图谱分析。UPGMA聚类结果显示, 170个供试菌株明显划分为2个群体,群体Ⅰ共包括26个菌株,其中18个为新疆菌株,约占69.2%;群体Ⅱ包括144个菌株,内地菌株有138个,约占95.8%。分析表明菌株的亲缘关系与地理来源存在一定的相关性,即新疆菌系与内地的菌系亲缘关系较远,而新疆菌株之间及内地各省份的菌株之间的亲缘关系很接近;结合菌株致病力测定的结果分析表明,SSR指纹图谱与菌株致病力强弱没有表现出相关性。 5.本研究选用了9对ISSR引物对170个代表菌株进行遗传多样性分析,结果表现出丰富的位点多态性。聚类分析结果表明,170个供试菌株被划分为3个不同的致病力群体:群体Ⅰ属于弱致病力群体;群体Ⅱ属于强致病力群体;群体Ⅲ属于中等致病力群体。由此表明,供试菌株的ISSR指纹图谱与菌株的致病力存在明显的相关性,而与菌株的地理来源无关。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S435.62

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【引证文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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