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《中国农业科学院》 2011年
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发根农杆菌介导的棉花遗传转化的研究

张程程  
【摘要】:棉花是我国重要的经济作物,但由于我国可耕地面积和水资源十分有限以及病虫害严重导致棉花生产安全压力很大。随着生物技术的迅猛发展,利用基因工程的手段将外源有益基因转入棉花的研究也越来越热。目前,转基因常用的方法是以根癌农杆菌介导棉花遗传转化,但该方法受到棉花基因型的限制、转化效率低和转化周期长等不利因素的影响从而制约了棉花转基因的发展和运用。 本论文创新性地采用发根农杆菌遗传转化棉花,通过毛状根的诱导和培养,获得了再生植株,并获得转有三个MYB转录因子基因的棉花毛状根。 (1)利用子叶穿孔的方法,建立了无菌条件下获得棉花毛状根的体系。获得的棉花毛状根在无激素的培养基上表现出自发性生长和部分失去向地性等典型的毛状根性状。 (2)利用三种不同的发根农杆菌A4、K599和ATCC15834分别侵染诱导三种陆地棉品种石远321、YZ-1和柯字312,讨论了菌种和品种对棉花毛状根诱导的影响。经rolAB基因的PCR检测筛选阳性棉花毛状根,发现由野生型A4发根农杆菌介导柯字312棉花品种转化的毛状根得率最高。 (3)讨论了棉花毛状根诱导的最佳外植体部位和苗龄。实验结果表明10-15天苗龄的棉花子叶最适合诱导毛状根。 (4)讨论了诱导棉花毛状根的固体培养基在碳源、无机盐和有机成分上的最优组合。研究表明,以葡萄糖30g/L为碳源的MS培养基最优。 (5)初步建立了棉花毛状根再生植株的培养体系,获得了3株再生植株。 (6)将外源的三个MYB转录因子-GmMYBZD2、GmMYBJL6和GmMYBJL7转入发根农杆菌,诱导棉花获得了转基因棉花毛状根,并进行了基因组PCR和Southern-blot的分子鉴定以及液体培养的生长曲线测定。研究发现在实验中所选取的棉花毛状根中,转基因毛状根要比未转入外源基因的毛状根生长旺盛。并结合以往研究结果,推测棉花毛状根具有生产棉酚的能力,并且棉酚的合成量与毛状根的生长能力成正比。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S567.239

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【引证文献】
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1 曹庆丰;发根农杆菌K599侵染黄瓜形成转基因毛状根的初步研究及orf14基因的克隆[D];杭州师范大学;2012年
【参考文献】
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1 ;Hairy roots induced by Agrobacterium rhizogenes and production of regenerative plants in hairy root cultures in maize[J];Science in China(Series C:Life Sciences);2006年04期
2 蔡国琴,李国珍,叶和春,李国凤;Ri质粒转化的青蒿发根培养及青蒿素的生物合成[J];生物工程学报;1995年04期
3 王莉,于荣敏,张辉,程克棣;何首乌毛状根培养及其活性成分的产生[J];生物工程学报;2002年01期
4 韩晓玲;步怀宇;郝建国;赵宇玮;贾敬芬;;农杆菌转化的小冠花发状根的诱导及其植株再生[J];生物工程学报;2006年01期
5 于荣敏;马娜;严春艳;赵昱;;外源激素对何首乌毛状根生长及蒽醌类成分生物合成的影响[J];生物工程学报;2006年04期
6 贾海燕;赵兵;王晓东;王玉春;;纤维植物罗布麻发根的诱导及植株再生(英文)[J];生物工程学报;2008年10期
7 步怀宇,景建洲,贾敬芬;发根农杆菌对骆驼刺的转化及转化组织的形态发生[J];实验生物学报;2001年02期
8 周延清;牛敬媛;郝瑞文;林雪;贾敬芬;郝建国;卢龙斗;;发根农杆菌转化怀地黄再生植株[J];分子细胞生物学报;2007年04期
9 张汉明,李博华,许铁峰,丁如贤;RiT-DNA对四倍体菘蓝的遗传转化及其植株再生[J];中国中药杂志;2000年11期
10 晏琼;胡宗定;吴建勇;;生物与非生物诱导子协同作用对丹参毛状根培养生产丹参酮的影响[J];中国中药杂志;2006年03期
【共引文献】
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1 王宗文;;国内外抗除草剂棉花研究应用现状[J];山东农业科学;2011年01期
2 王娟;余渝;孔宪辉;刘丽;王旭文;;棉花转基因育种研究现状与前景展望[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年15期
3 张家辉;杨蕊;;农杆菌介导的药用植物遗传转化[J];安徽农业科学;2006年23期
4 刘运华;王凌晖;曹福亮;韦原莲;韦立秀;;何首乌丰产栽培技术研究进展[J];安徽农业科学;2007年18期
5 华智锐;李小玲;;黄芩组织培养研究进展[J];安徽农业科学;2008年13期
6 阳立恒;郝秀英;曲延英;;农杆菌介导外源基因转化棉花上胚轴方法的研究[J];安徽农业科学;2008年19期
7 赵福永;;棉花茎尖农杆菌转化体系的建立[J];安徽农业科学;2009年02期
8 闻玉莉;杨世海;;罗勒毛状根的诱导及培养[J];安徽农业科学;2010年04期
9 侍福梅;王超;;绿色棉花再生体系建立的研究[J];安徽农业科学;2010年06期
10 邓寒霜;汪麦;胡帅;牟琼;;激光照射对丹参愈伤组织中丹参酮Ⅱ_A含量的影响[J];安徽农业科学;2010年28期
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1 王海光;李自超;;植物干旱胁迫应答基因及其产物研究进展[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
2 赵树进;陈念;韩丽萍;;药用植物生物工程技术研究进展[A];广东省药学会2009学术年会论文集[C];2010年
3 慕萍丽;崔红;宋志红;刘国顺;;不同理化因子对烟草发状根生长及烟碱合成的影响[A];中国烟草学会2004年学术年会论文集[C];2004年
4 吴庆华;董青松;;何首乌人工栽培研究进展[A];中国植物园(第十二期)[C];2009年
5 胡世林;冯学锋;;黄芩研究的某些新进展[A];2002中药研究论文集[C];2002年
6 郑顺利;陈金湘;周仲华;;影响棉花组织培养及植株再生的主要因素[A];中国棉花学会2013年年会论文集[C];2013年
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1 赵鑫;优质蓝莓转LEA基因及耐寒性分析研究[D];东北林业大学;2011年
2 耿丽丽;转Bt cry8Ea1、cry8Ha1基因花生的研究[D];中国农业科学院;2011年
3 崔翠菊;叶绿体基因工程与植物细胞器基因组进化研究[D];华中科技大学;2010年
4 缪卫国;转hpa1_(Xoo)基因棉花抗病虫防卫反应与全基因组转录谱分析及棉花角斑病菌hpa_(Xm)基因的功能[D];南京农业大学;2009年
5 杨水平;重庆青蒿资源调查、种质筛选及栽培中合理的氮磷钾肥和密度[D];西南大学;2011年
6 燕树锋;转基因抗草甘膦棉花种质系的创造及利用[D];浙江大学;2011年
7 王自章;农杆菌介导海藻糖合酶基因遗传转化甘蔗研究[D];福建农林大学;2001年
8 王红;真菌诱导子对青蒿发根生长和青蒿素生物合成的影响及开花与青蒿素生物合成的相关性研究[D];中国科学院植物研究所;2001年
9 杨广东;基因工程改良几种重要蔬菜的抗虫性[D];浙江大学;2002年
10 刘彦;青蒿素生物合成相关基因的克隆、大肠杆菌表达与分子分析[D];中国科学院研究生院(植物研究所);2002年
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1 付雪林;转Bt基因甘蓝的抗虫性研究[D];华中农业大学;2010年
2 李清清;苹果中六个胁迫相关的转录因子表达特性及与醇酰基转移酶基因表达相关性分析[D];山东农业大学;2010年
3 彭金环;中草药轮叶党参再生体系的建立[D];山东农业大学;2010年
4 刘浩;萝卜细胞系的建立及萝卜硫素的提取与检测[D];甘肃农业大学;2010年
5 张丽娟;桃儿七离体培养体系的建立与发状根诱导研究[D];甘肃农业大学;2010年
6 魏韩英;春兰‘宋梅’组织培养及兰花菌根真菌的研究[D];浙江农林大学;2010年
7 赖黎丽;基于芯片杂交结果克隆疏叶骆驼刺、苦马豆相关基因的研究[D];新疆农业大学;2010年
8 陈顺钦;从抗氧化代谢途径对黄芩品质形成“逆境效应”的研究[D];武汉工业学院;2010年
9 罗晓丹;四倍体刺槐诱导及其体外植株再生的研究[D];中南林业科技大学;2009年
10 李燕;转EPSPS基因棉花的筛选及草甘膦对其育性的影响[D];山东农业大学;2011年
【同被引文献】
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1 许明;黄志伟;程祖锌;刘峰;卓学铭;郑金贵;;以DsRed2基因为可视标记的双T-DNA共转化载体的构建[J];福建农林大学学报(自然科学版);2010年03期
2 姜伊娜;武天龙;;毛状根的研究进展及应用[J];中国农业科技导报;2009年01期
3 施和平,梁朋,权宏;商陆毛状根的诱导、培养及其皂甙的产生[J];生物工程学报;2003年01期
4 赵寿经,李昌禹,钱延春,骆晓佩,张昕,王雪松,康波愈;人参发根的诱导及其适宜培养条件的研究[J];生物工程学报;2004年02期
5 施和平;齐莹;张悦;梁山;;黄瓜毛状根的诱导及细胞分裂素6-BA对其生长和形态的影响[J];生物工程学报;2006年03期
6 张悦;施和平;;培养基磷缺乏对黄瓜毛状根生长、抗氧化酶活性及氮源利用的影响[J];生物工程学报;2008年09期
7 欧少云;施和平;曾宝强;;南美蟛蜞菊毛状根诱导及其离体培养[J];生物工程学报;2010年03期
8 吴晓凤;施和平;TSANG Po Keung Eric;;褐脉少花龙葵毛状根的诱导、培养及其澳洲茄胺的产生[J];分子细胞生物学报;2008年03期
9 向太和,王利琳,庞基良,陈敏,许超;发根农杆菌K599对大豆、黄瓜和凤仙花活体感染生根的研究[J];遗传;2005年05期
10 陈建民;姚泉洪;熊爱生;马鸿翔;洪义欢;;植物转基因整合座位的结构[J];遗传;2007年02期
【二级引证文献】
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1 杜苏瑞;三叶青转基因毛状根的诱导繁殖及其分析[D];杭州师范大学;2013年
【二级参考文献】
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1 丁亚平,杨道麒,吴庆生,于力文,徐云;安徽霍山三种石斛总生物碱的测定及其分布规律研究[J];安徽农业大学学报;1994年04期
2 常振战,沈昕,果德安,鲁宽科,王沙生,郑俊华;天山大黄发根培养物中蒽醌化合物的产生[J];北京医科大学学报;1998年05期
3 许铁峰,张汉明,张威,丁如贤,李博华;应用发根农杆菌RiT-DNA建立菘蓝的毛状根优质株系和植株再生系统[J];第二军医大学学报;2000年10期
4 汪程远,张浩,孟莉,张承平;HPLC测定地黄及其制剂中梓醇的含量[J];华西药学杂志;2003年02期
5 冯斌,赵春晖,王关林;发根农杆菌A_4转化黄瓜获得发状根再生植株[J];辽宁师范大学学报(自然科学版);2000年02期
6 刘红彦 ,徐玉红 ,杨贵军;85-5怀地黄优质栽培管理技术[J];河南农业;2004年03期
7 孙敏;汤绍虎;杨兰英;;转化毛状根获得萝芙木生物碱的研究[J];生物工程学报;1993年03期
8 苗志奇,未作君,元英进;水杨酸在紫杉醇生物合成中诱导作用的研究[J];生物工程学报;2000年04期
9 王莉,于荣敏,张辉,程克棣;何首乌毛状根培养及其活性成分的产生[J];生物工程学报;2002年01期
10 付春祥,金治平,杨睿,吴风燕,赵德修;新疆雪莲毛状根的诱导及其植株再生体系的建立[J];生物工程学报;2004年03期
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1 王莉,于荣敏,张辉,朱江,程克棣;何首乌毛状根的诱导及其培养[J];药物生物技术;2002年02期
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4 刘士平;沙爱华;薛艳红;李金泉;宋志红;;三裂叶葛毛状根的诱导及葛根素的产生[J];湖北农业科学;2006年02期
5 苗晓燕;于树宏;沈银柱;黄占景;;利用基因转化提高虎杖毛状根中活性成分的含量[J];药学学报;2007年09期
6 魏琦超;畅丽萍;周岩;;毛状根在药用植物次生代谢产物生产中的应用概况[J];湖北农业科学;2009年05期
7 闻玉莉;杨世海;;罗勒毛状根的诱导及培养[J];安徽农业科学;2010年04期
8 徐立新;赵寿经;梁彦龙;钱延春;金士琨;;外源调节物质对人参毛状根生长及皂苷合成的影响[J];吉林大学学报(工学版);2010年06期
9 陈伟莉;牟旭鹏;刘冬影;;毛状根在植物次生代谢产物生产方面应用的研究进展[J];黑河学院学报;2010年04期
10 赵爽;潘少丽;;毛状根培养技术在中草药中的应用[J];时珍国医国药;2011年06期
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1 ;虎杖毛状根的诱导、优化培养及白藜芦醇和虎杖苷的产生[A];第六届全国药用植物和植物药学术研讨会论文集[C];2006年
2 郝瑞文;贾敬芬;林雪;郝建国;;怀牛膝毛状根转化系的建立及其齐墩果酸含量的分析[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
3 傅承新;姜维梅;王沛;王晓韵;陈绍媛;;八角莲毛状根的诱导及其鬼臼毒素的产生[A];第六届全国药用植物和植物药学术研讨会论文集[C];2006年
4 刘峻;丁家宜;周倩耘;何林;;真菌诱导子对人参毛状根皂苷生物合成和生长的影响[A];全国第5届天然药物资源学术研讨会论文集[C];2002年
5 杨世海;毕晓秀;;紫锥菊毛状根培养体系的建立及生物活性成分分析[A];中国植物学会七十五周年年会论文摘要汇编(1933-2008)[C];2008年
6 胡之璧;刘涤;宋纯清;;生物技术研究与产业开发是药物资源可持续利用的重要途径[A];中国自然资源学会全国第三届天然药物资源学术研讨会论文集[C];1998年
7 刘成洪;段艳冰;张磊;张汉明;陈万生;;短葶飞蓬毛状根的诱导及黄酮含量测定[A];长三角现代植物生物学与农业专题论坛论文集[C];2005年
8 郝瑞文;贾敬芬;郝建国;;发根农杆菌介导牛膝遗传转化及转化体的齐墩果酸含量测定[A];第二届热带亚热带植物资源的遗传多样性与基因发掘利用研讨会论文集[C];2006年
9 肖雄健;范文毅;杨敬平;朱凌;杨永华;;甘草细胞次生物形成和调控的初步研究[A];中国农业生物技术学会第三届会员代表大会暨学术交流会论文摘要集[C];2006年
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1 王华锋;上海中医药大学黄芪毛状根培养获突破[N];中国医药报;2006年
2 张建中 季文;黄芪毛状根培养体系建成[N];健康报;2006年
3 记者 王阳;让中药材长出更多有效成分[N];上海科技报;2008年
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1 徐洪伟;发根农杆菌诱导玉米毛状根再生植株及抗旱性研究[D];东北师范大学;2007年
2 翟丹丹;青蒿毛状根中活性化合物的分离分析及其生物合成调控探索[D];华东理工大学;2010年
3 肖璇;发根农杆菌介导的柑橘遗传转化体系建立及转基因柑橘溃疡病抗性分析[D];华中农业大学;2014年
4 王春丽;丹参中次生物质积累与可溶性糖代谢及激素关系的研究[D];西北农林科技大学;2012年
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1 于海娣;木豆毛状根培养体系的建立及相关生理生化研究[D];东北林业大学;2012年
2 田恬;绞股蓝毛状根的诱导及培养条件优化[D];西南大学;2009年
3 郭乐康;黄芩毛状根培养体系的研究-Ⅱ[D];陕西科技大学;2009年
4 陈岺曦;紫锥菊毛状根培养体系的建立及其培养装置的构建[D];重庆大学;2007年
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6 彭飞宇;利用黄芩毛状根生物合成熊果苷工艺研究[D];陕西科技大学;2012年
7 苏莹莹;豆科两种植物毛状根体系的建立[D];吉林农业大学;2008年
8 毕晓秀;紫锥菊毛状根培养体系的建立及次生代谢产物研究[D];吉林农业大学;2008年
9 李翠芳;新疆紫草毛状根生物学活性研究[D];新疆农业大学;2009年
10 邱立鹏;转基因何首乌毛状根诱导和培养及其代谢产物的初步研究[D];沈阳药科大学;2004年
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