收藏本站
《中国农业科学院》 2012年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

朝鲜碱茅P5CS基因的克隆及其转化紫花苜蓿的研究

徐博  
【摘要】:本研究利用RT-PCR的方法在朝鲜碱茅(Puccinellia chinampoensis)中分离到一个P5CS的同源新基因,命名为:PuP5CS(Genebank:HQ637435),并通过农杆菌介导法将其转入公农2号紫花苜蓿中,以期改良其耐盐性,结果如下: 表达分析的结果显示,PuP5CS基因在朝鲜碱茅的根部和叶片均有表达,但是根部的表达量较低,叶片中的表达量较高。在根部,PuP5CS基因受盐胁迫、碱胁迫和盐碱复合胁迫诱导的表达量比受干旱胁迫诱导的表达量要高,在叶片中4种胁迫处理均可以诱导PuP5CS基因显著表达,但变化规律不同。 对PuP5CS基因的亚细胞定位的结果显示,其主要表达在细胞膜和细胞核中。 在对转基因烟草进行耐盐性和抗寒性检测中,显示正义转基因烟草在受到高盐胁迫和低温胁迫时,能够明显提高其脯氨酸积累,其叶绿素含量、可溶性糖含量的增长幅度也显著高于对照。而反义转基因烟草在受到非生物胁迫的过程中,其脯氨酸积累、可溶性糖含量等都低于对照。表明PuP5CS基因不仅影响了烟草体内脯氨酸的合成过程,而且还参与了体内可溶性糖、丙二醛、叶绿素a和叶绿素b的代谢调控,从增加渗透调节物质,缓解膜质氧化反应,增强光合作用等几个方面在整体上提高了烟草的抗逆性。 建立了用于公农2号(Medicago sativa L.cv.Gongnong No.2)紫花苜蓿的组织培养高频再生体系。选择子叶作为外植体材料,UM培养基+2mg/L2,4-D+0.25mg/L KT为愈伤诱导培养基,UM培养基+1.2mg/L KT作为分化培养基,1/2MS培养基为生根培养基。共培养时间为3d,转移至含500mg/L头孢霉素的愈伤诱导培养基上进行培养,20d后转至分化培养基上,其中含1.2mg/L KT、500mg/L头孢霉素、2mg/L草铵膦。约20d~40d后,分化出小植株,转入1/2MS+1mg/L草铵膦+500mg/L Cef培养基上,生根后移栽至蛭石:土壤为1:1的混合土壤中,得到了草铵膦阳性植株。经PCR和RT-PCR鉴定,PuP5CS基因已整合至再生植株的基因组上。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S541.9

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 孙启忠;玉柱;马春晖;徐春城;;我国苜蓿产业过去10年发展成就与未来10年发展重点[J];草业科学;2013年03期
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 刘香萍;李国良;迟文峰;崔国文;杜广明;;紫花苜蓿耐盐生理的初步研究[J];现代农业科技;2006年12期
2 杨成民,王宏芝,孙振元,魏建华;利用基因枪共转化法获得转bar与P5CS基因黑麦草[J];草地学报;2005年01期
3 杨青川;康俊梅;郭文山;孙彦;;紫花苜蓿耐盐新种质一般配合力分析与轮回选择[J];草地学报;2006年01期
4 徐春波;米福贵;王勇;;转基因冰草植株耐盐性研究[J];草地学报;2006年01期
5 李瑞年,李学森,朱环元,唐洋,杨江平,牛生和,王华兵;紫花苜蓿对准噶尔盆地西北缘土质荒漠改良效果研究初报[J];草食家畜;2004年02期
6 顾垒,毕玉芬;转基因苜蓿研究的现状和前景[J];草原与草坪;2004年01期
7 刘延吉;张蕾;田晓艳;陈丹;;盐胁迫对碱茅幼苗叶片内源激素、NAD激酶及Ca~(2+)-ATPase的效应[J];草业科学;2008年04期
8 陈月艳,孙国荣,李景信;Na_2CO_3胁迫对星星草种子萌发过程中水分吸收及膜透性的影响[J];草业科学;1997年02期
9 张一弓;张丽静;傅华;;植物维生素E合成酶基因克隆及其逆境生理研究进展[J];草业学报;2009年05期
10 任伟;王志峰;徐安凯;;碱茅耐盐碱基因克隆研究进展[J];草业学报;2010年05期
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 陈吉宝;普通菜豆P5CS基因的克隆、功能验证及单核苷酸多态性[D];中国农业科学院;2008年
2 王涌鑫;根癌农杆菌介导的DREB1C基因转化苜蓿的研究[D];中国农业科学院;2008年
3 金太成;大豆DREB基因GmDREB1改良紫花苜蓿耐盐性的研究[D];东北师范大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 张晓磊;星星草PtDHAR及PtFer基因的克隆与表达分析[D];东北林业大学;2008年
2 刘艳昆;农杆菌介导的acdS基因转化烟草和中苜3号的研究[D];中国农业科学院;2009年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 徐文;海春旭;杨晨;刘瑞;;过氧基异丙苯对雄性小鼠的自由基毒性与遗传毒性的研究[J];癌变.畸变.突变;2006年02期
2 黄霄;杨秀梅;刘训言;孟庆伟;;转正义基因番茄类囊体膜脂不饱和度对抗旱性的影响[J];山东农业科学;2008年03期
3 夏尚光;;NaCl胁迫对5个树种叶肉细胞超微结构的影响[J];安徽林业科技;2011年02期
4 李继平;徐春波;王勇;李兴酉;赵海霞;;紫花苜蓿转基因技术研究进展[J];安徽农学通报;2008年15期
5 李静;;海棠(Malus hupehensis)叶提取物的清除自由基活性和成分分析[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年05期
6 经弘羽;;木绣球花清除自由基活性及其成分分析[J];安徽农学通报(上半月刊);2009年21期
7 王启明,马原松,吴诗光;干旱胁迫对不同生育期大豆叶片质膜透性的影响[J];安徽农业科学;2005年09期
8 于德花;刘玉新;张明兴;;利用转基因技术进行作物遗传改良的研究进展[J];安徽农业科学;2007年11期
9 曾建军;曾川蓉;李晓红;;转基因作物安全性研究回顾与展望[J];安徽农业科学;2007年22期
10 郑国琦;谢亚军;;干旱胁迫对宁夏枸杞幼苗膜脂过氧化及抗氧化保护酶活性的影响[J];安徽农业科学;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈文华;黄国栋;赵凤达;;姜黄水醇提取液对冰乙酸损伤性溃疡性结肠炎大鼠结肠粘膜保护作用及机制研究[A];江西省中西医结合学会第九次活血化瘀学术研讨会活血化瘀临床应用新进展培训班论文集[C];2011年
2 张玉;宋翠艳;刘海涛;孙伟男;;达里诺尔湖和岗更湖瓦氏雅罗抗氧化酶的研究[A];第三届全国现代生态渔业管理与技术研究[C];2011年
3 江岩;;新疆药桑椹花青素延缓衰老作用的研究[A];中国西部第六届营养与健康学术会议论文集[C];2011年
4 曹华斌;郭小权;雷鹏;胡国良;李浩棠;张彩英;国鑫;田山;;不同来源高钙日粮对青年蛋鸡血清和肾脏线粒体自由基代谢的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(上册)[C];2011年
5 倪鸣;袁志航;李荣芳;邬静;袁莉芸;文利新;袁慧;;醋酸棉酚对小鼠黄体细胞凋亡的影响[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(上册)[C];2011年
6 张朝伦;沈连明;王芳;姚鼎山;;宽光谱响应触媒功能纤维研究[A];“力恒杯”第11届功能性纺织品、纳米技术应用及低碳纺织研讨会论文集[C];2011年
7 马文慧;张倩;尚爱芹;赵梁军;;根癌农杆菌介导‘粗枝’大叶黄杨P5CS基因转化扶芳藤的研究[A];中国观赏园艺研究进展 2009[C];2009年
8 郭志勋;李卓佳;林黑着;叶乐;冯娟;杨莺莺;陈永青;;芽孢杆菌对凡纳对虾生长及免疫的影响[A];可持续水产养殖——资源、环境、质量——2003水产科技论坛论文集[C];2003年
9 魏传梅;;衰老与免疫[A];2008年山东省医院药学学术研讨会论文汇编[C];2008年
10 马兰军;赵亮;;篮球运动员焦虑特质与急性心理应激后免疫球蛋白变化的相关研究[A];第8届全国运动心理学学术会议论文汇编[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 韩莹;室旁核活性氧在慢性心力衰竭和肾血管性高血压发病机制中的作用研究[D];南京医科大学;2010年
2 王庆莲;苹果多胺和脯氨酸合成代谢相关基因的功能鉴定[D];山东农业大学;2009年
3 王延秀;浓缩单宁合成的分子调控及紫花苜蓿遗传转化研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 曹春晖;两种赤潮藻对锰的生理生态响应[D];中国海洋大学;2010年
5 盖玉红;盐生和中生植物对盐害的响应及其抗性结构机制研究[D];东北师范大学;2010年
6 李望丰;SsNHX1基因在紫花苜蓿中的表达及其耐盐性研究[D];东北师范大学;2010年
7 胡安辉;高效短程硝化/厌氧氨氧化富集培养物的研究[D];浙江大学;2010年
8 何影;引入甘氨酸甲基化合成甜菜碱途径提高黑麦草抗旱性研究[D];山东大学;2010年
9 黎继烈;金橘活性物质提取及生物活性研究[D];中南林业科技大学;2007年
10 谢雪钦;球孢白僵菌超氧化物岐化酶(SODs)的基因克隆、鉴定及功能分析[D];浙江大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 尹守铮;外源抗氧化剂对肉鸡机体氧化还原状态和生产性能的影响[D];华中农业大学;2010年
2 曹杰;日粮中添加二氢吡啶对奶牛生产性能、抗氧化和抗热应激能力的影响[D];华中农业大学;2010年
3 彭英;水稻脯氨酸累积相关基因多样性及与苗期耐盐性关系[D];华中农业大学;2010年
4 马明勇;环境胁迫对莲草直胸跳甲生存与繁殖的影响[D];中南林业科技大学;2009年
5 王悦琳;过表达玉米ZmMPK7转基因烟草耐盐性研究[D];山东农业大学;2010年
6 孙翠;核桃(Juglans regia L.)坚果仁维生素E含量分析及jrMPBQ基因克隆[D];山东农业大学;2010年
7 马琳;NaCl胁迫对牧草种子萌发与幼苗生理生化的影响及耐盐性评价[D];山东农业大学;2010年
8 朱红梅;玫瑰种质抗旱性评价及产果量数量遗传研究[D];山东农业大学;2010年
9 王金彬;戴氏虫草(Cordyceps taii)的化学成分及其清除自由基活性物质的研究[D];安徽农业大学;2010年
10 张继曼;黑豆红花色苷的优化提取及其降血糖作用的研究[D];安徽农业大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孙启忠,王育青,侯向阳;紫花苜蓿越冬性研究概述[J];草业科学;2004年03期
2 孙启忠;玉柱;徐春城;;我国草业新世纪10年取得的成就和未来10年发展的重点[J];草业科学;2011年12期
3 孙启忠;玉柱;徐春城;;我国苜蓿产业亟待振兴[J];草业科学;2012年02期
4 包爱科;王强龙;张金林;王锁民;;苜蓿基因工程研究进展[J];分子植物育种;2007年S1期
5 孙启忠,桂荣;赤峰地区敖汉苜蓿冻害及其防御技术[J];华北农学报;2001年01期
6 云锦凤,孙启忠;如何发展我国苜蓿产业化[J];中国牧业通讯;2003年21期
7 孙启忠,宁布,李志勇,王育青;抓住机遇推进苜蓿产业化进程[J];中国农业科技导报;2003年01期
8 孙启忠;韩建国;玉柱;陶雅;韩春燕;赵淑芬;;科尔沁沙地苜蓿抗逆增产栽培技术研究[J];中国农业科技导报;2008年05期
9 许鹏;关于发展草业的探讨[J];农业现代化研究;1985年05期
10 杨青川;孙彦;;中国苜蓿育种的历史、现状与发展趋势[J];中国草地学报;2011年06期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 云锦凤;孙启忠;;抓住机遇开创我国苜蓿产业化新局面[A];第二届中国苜蓿发展大会暨牧草种子、机械、产品展示会论文集[C];2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 张丽;烟草柠檬酸合成酶基因对紫花苜蓿的遗传转化[D];西南大学;2008年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 孙启忠;陶雅;徐丽君;;刍议苜蓿产业中的风险及其应对策略[J];草业科学;2013年10期
2 陈立强;师尚礼;马春晖;;野生及栽培苜蓿种质资源遗传多样性的同工酶分析[J];草业科学;2014年06期
3 沈名灿;罗佳捷;张彬;;苜蓿在奶牛生产中的应用进展研究[J];中国乳业;2014年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 潘文杰;基于价值链的甘肃省苜蓿企业发展现状研究[D];兰州大学;2014年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 董晓霞,郭洪海,孔令安,赵树慧;杂交酸模耐盐性鉴定的生理指标筛选[J];山东农业科学;1999年06期
2 李庆芝;尚志华;房玉洁;李玲;;姜基因转化系统的建立及优化[J];山东农业科学;2006年03期
3 程堂云,刘文秀,产焰坤,程福如,路曦结,易成新;作物轮回选择方法及其育种应用[J];安徽农业科学;2004年01期
4 刘香萍;李国良;迟文峰;崔国文;杜广明;;紫花苜蓿耐盐生理的初步研究[J];现代农业科技;2006年12期
5 王瑞刚,陈少良,刘力源,郝志勇,翁海娇,李鹤,杨爽,段杉;盐胁迫下3种杨树的抗氧化能力与耐盐性研究[J];北京林业大学学报;2005年03期
6 王进忠,孙淑玲,杨宝东;转Bt基因植物的研究与应用前景[J];北京农学院学报;2002年03期
7 姜虎生,张常钟,陆静梅,韩丽娟;碱茅抗盐性的研究进展[J];长春师范学院学报;2001年05期
8 王苹,李建东,欧勇玲;松嫩平原盐碱化草地星星草的适应性及耐盐生理特性的研究[J];草地学报;1997年02期
9 于卓,孙祥,戴君峰,郭文;草地早熟禾品种间幼苗耐盐性差异的研究[J];草地学报;1997年02期
10 王萍,周天;在NaCl胁迫下羊草幼苗生理反应及外源钙的缓解效应[J];草地学报;1998年01期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
1 叶纨芝;白菜细胞核雄性不育相关基因mf-CYP450的分子鉴定、克隆和序列分析[D];浙江大学;2001年
2 王玉军;植物耐逆相关基因的克隆与功能研究[D];中国海洋大学;2003年
3 霍秀文;冰草组织培养再生体系建立及耐旱转基因研究[D];内蒙古农业大学;2004年
4 庞晓斌;小麦幼苗水分胁迫应答基因表达谱[D];吉林大学;2006年
5 徐重益;小麦抗旱相关基因TaPP2Ac/a的分离、定位与功能验证[D];中国农业科学院;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 张赤红;普通菜豆种质资源遗传多样性与分类研究[D];中国农业科学院;2004年
2 陈吉宝;小麦TaDREB1基因的单核苷酸多态性及其与抗旱性的关系[D];西北农林科技大学;2005年
3 张晓磊;星星草PtDHAR及PtFer基因的克隆与表达分析[D];东北林业大学;2008年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 武保国;朝鲜碱茅[J];农村实用科技信息;2003年12期
2 武保国;朝鲜碱茅[J];农村养殖技术;2003年14期
3 孙跃春,徐彤宝,董晓玲;朝鲜碱茅的栽培技术[J];特种经济动植物;2003年05期
4 ;牧草“朝鲜碱茅”[J];现代农业;2006年03期
5 恽锐,郑慧莹;松嫩平原碱化草甸朝鲜碱茅、猿毛耐盐碱特性的比较研究[J];植物生态学报;1996年04期
6 郭孝,刘国英,陈桂荣,李先芳,李风玲;朝鲜碱茅和星星草在中原地区适应性及改土效果的研究[J];草业科学;1997年04期
7 杨允菲,祝玲,李建东;松嫩平原碱化草甸朝鲜碱茅种群生殖特性的定量分析[J];草地学报;1995年01期
8 徐恒刚,董润利,王新元;星星草、朝鲜碱茅在分类及栽培学地位上的探讨[J];中国草地;1996年04期
9 徐恒刚,张萍,李临杭;星星草、朝鲜碱茅在河套地区各旗县的区域试验[J];四川草原;1999年04期
10 徐恒刚,包纯志,葛澄明,张萍,李临杭;重度耐盐牧草星星草和朝鲜碱茅的比较研究[J];中国草地;1995年02期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 陈自胜;徐安凯;;碱茅在“三北”地区重盐碱地改良中的重要作用[A];西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集[C];2000年
2 徐安凯;樊奋成;;论碱茅在“三北”地区重盐碱地改良中的作用[A];草业与西部大开发——草业与西部大开发学术研讨会暨中国草原学会2000年学术年会论文集[C];2000年
中国重要报纸全文数据库 前2条
1 ;优质牧草——朝鲜碱茅[N];中国畜牧兽医报;2009年
2 农兴科;提高农产品市场竞争力[N];中国农机化报;2000年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 徐博;朝鲜碱茅P5CS基因的克隆及其转化紫花苜蓿的研究[D];中国农业科学院;2012年
2 李晓玲;中国松嫩平原三种重要耐盐碱牧草的组织培养和体细胞克隆变异研究[D];东北师范大学;2006年
3 姜世成;松嫩盐碱化草地水盐分布格局及盐碱裸地植被快速恢复技术研究[D];东北师范大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前5条
1 宋金辉;松嫩平原朝鲜碱茅茎顶分生组织的分化研究[D];东北师范大学;2008年
2 孙菊;松嫩平原碱化草甸星星草和朝鲜碱茅种群分蘖株延长生殖生长研究[D];东北师范大学;2007年
3 董利苹;淋洗和生物作用改良盐渍化土壤的机制研究[D];兰州大学;2011年
4 闫丽侠;火烧对松嫩草地星星草株丛数量性状及其相互关系的影响[D];东北师范大学;2010年
5 史鹏;同德小花碱茅幼穗分化的观察和种子发育过程中8个生理指标变化的研究[D];青海大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026