收藏本站
《中国农业科学院》 2012年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

小菜蛾对BT毒素蛋白CrylAc抗性相关基因的筛选

雷妍圆  
【摘要】:小菜蛾作为一种世界性的十字花科蔬菜重要害虫,是最早发现在田间对Bt产生抗性的害虫,日前的研究结果尚不能完全解释其Bt抗性机理,许多重要的抗性相关因素有待进一步探明。小菜蛾体内的Bt毒素受体仍是一个激烈争论的问题,Bt毒素的作用过程可能有多个受体参与,但许多潜在受体尚未被发现,受体的功能和机理仍没有完全明确。本研究在室内构建了小菜蛾抗BT毒素蛋白Cry1Ac近等基因品系,用RNA-Seq测序技术从RNA总体水平上筛选出小菜蛾CrylAc抗性和敏感品系间与Bt抗性相关的差异基因,并通过QPCR方法检测了这些抗性相关基因在抗敏种群中的基因表达量。结果如下: (1)小菜蛾抗Bt毒素CrylAc近等基因系抗性和敏感种群的构建。采用了两种杂交方法构建CrylAc近等基因系。杂交方案一为自交和回交相间隔连续6轮;杂交方案二是先自交6代之后分开两个种群独立汰选和反汰选。利用ISSR技术对杂交和亲本种群背景进行了检测,结果显示杂交方案一的抗性品系经过多代回交,最终获得了与敏感品系相同的背景;而杂交方案二的正汰和反汰种群也获得了相同的背景,但由于分开隔离多代饲养,遗传距离远于杂交方案一。 (2)小菜蛾抗性和敏感种群RNA-Seq测序。对小菜蛾2个抗性种群(美国抗性和广州抗性)和1个敏感种群(美国敏感)的小菜蛾中肠组织进行RNA-Seq测序,将表达谱数据比对到美国抗性种群中肠转录组文库(Accession No.:SRX101299)。一共得到36742801个clean reads。美国抗性和美国敏感之间(MK-VS-MM)显著差异基因(DEUs)个数为2925,广州抗性和美国敏感之间(GK-VS-MM) DEUs个数为2967,对这5892个DEUs进行GO分析,发现其主要集中在oxidoreductase activity和membrane lipid metabolic process上。KEGG分析表明,抗性种群与敏感种群的DEUs共同显著富集在9条pathway中。对ABC transporter pathway的分析表明,小菜蛾CrylAc抗性可能与该超家族ABCC2和ABCC10的下调表达和ABCG2的上调表达有关。分析结果为挖掘小菜蛾潜在的Bt受体基因提供了大量的数据资料。 (3) RNA-Seq测序结果的QPCR验证。通过QPCR技术,用小菜蛾抗CrylAc近等基因系,对测序结果中挑选出的潜在抗性相关差异基因进行了表达量验证。结果表明,高表达、催化活性、代谢相关和ABC transporters DEUs在抗性品系中的表达量显著高于敏感品系表达量,证明了测序结果的可靠性,同时也表明这些基因的表达量变化与小菜蛾对Bt的抗性之间存在一定的联系,小菜蛾CrylAc抗性种群有可能通过增强催化、代谢活性以及ABCtransporters基因的作用来抵御或延缓抗性的发展。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:博士后
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S481.4

【共引文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 陈万梅,符悦冠,彭正强;海南3地区瓜绢螟种群对3种药剂的敏感性及其酶系比活性的测定[J];热带作物学报;2004年02期
2 赵建庄,范志金,安健,闫雪峰,梁桂芝,王占英;薄层层析—酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸酯类杀虫药剂[J];四川师范大学学报(自然科学版);2001年05期
3 孙兆贵,王元秀;生理适应导致贮粮昆虫对辛硫磷的耐受性[J];山东科学;2005年02期
4 张元建;王真;竹傲;朱福兴;;溴氰菊酯和辛硫磷亚致死剂量对甜菜夜蛾酶活性的影响[J];天津农业科学;2009年05期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 赵锋;李建洪;;小菜蛾抗药性研究进展[A];第三届湖北湖南植保农药学术研讨会论文集[C];2004年
2 王骞春;高继国;宋福平;张杰;;昆虫Bt毒素受体类钙黏蛋白研究进展[A];科技创新与绿色植保——中国植物保护学会2006学术年会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 杨宙;双价Bt抗虫水稻的培育和转基因水稻回交效应分析[D];华中农业大学;2011年
2 袁国瑞;小菜蛾GABA受体基因克隆及棉铃虫羧酸酯酶的功能表达[D];南京农业大学;2011年
3 杨亚军;棉铃虫Cry1Ac抗性相关钙粘蛋白基因突变的鉴定与检测[D];南京农业大学;2010年
4 龚佑静;小菜蛾对Bt毒素Cry1Ac抗性的生化与分子机理[D];南京农业大学;2010年
5 宋萍;苏云金芽胞杆菌分离鉴定及对马铃薯二十八星瓢虫特异活性菌株研究[D];河北农业大学;2012年
6 王建军;小菜蛾Plutella xylostella (L.)杀虫剂靶标抗性的分子生物学研究[D];南京农业大学;2001年
7 何林;朱砂叶螨(Tetranychus Cinnabarinus)抗药性机理及抗性适合度研究[D];西南农业大学;2003年
8 兰亦全;甜菜夜蛾对拟除虫菊酯类杀虫剂抗药性及其机理研究[D];福建农林大学;2004年
9 刘泽文;褐飞虱对吡虫啉的抗性及其机理研究[D];南京农业大学;2004年
10 刘凯于;粉纹夜蛾细胞对Bt Cry1Ac毒素的抗性特点及其机制的研究[D];华中师范大学;2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吕桂贞;杀虫剂混配对小菜蛾毒力联合作用及生化机理研究[D];华中农业大学;2010年
2 姚锋娜;小菜蛾抗药性监测、对丁醚脲抗性选育及抗性机理的研究[D];华中农业大学;2010年
3 王晓燕;β-丙氨酸对甜菜夜蛾生长发育及体内酶活性的影响[D];华中农业大学;2010年
4 沈福英;张家口地区小菜蛾抗性水平监测及抗性治理研究[D];中国农业科学院;2010年
5 牛芳;小菜蛾对氯虫苯甲酰胺的防御、代谢及抗性风险评估[D];山东农业大学;2011年
6 张永栋;棉铃虫氨肽酶N毒素结合区片段对Cry1Ac增效的研究[D];西南大学;2011年
7 柳峰;GluCl受体在小菜蛾对阿维菌素抗性中的作用研究[D];中国农业科学院;2011年
8 仪登霞;甘蓝转crylIa8和crylBa3双价Bt基因的研究[D];中国农业科学院;2011年
9 邹朗云;棉铃虫中肠cDNA文库的构建、V-ATP酶亚基B基因的克隆与功能研究[D];中国农业科学院;2011年
10 秦悦;小菜蛾对Bt杀虫蛋白Cry1Ac抗性的分子机制研究[D];中国农业科学院;2011年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴世昌,顾言真;杀灭菊酯对小菜蛾的毒效检测[J];植物保护;1986年03期
2 周林松;几种杀虫剂防治甘蓝菜小菜蛾试验初报[J];内蒙古农业科技;2004年S2期
3 戴志聪;;OMI-88防治花菜小菜蛾的药效试验[J];福建农业科技;2006年01期
4 陆晓莉;王依明;张家驯;;几种新农药防治甘蓝小菜蛾试验[J];上海蔬菜;2006年06期
5 劳赛国;;27%丁醚脲·高氯防治小菜蛾田间试验[J];广西热带农业;2009年05期
6 李容宇;;防治油菜害虫[J];新农业;1975年09期
7 柯礼道;方菊莲;;小菜蛾生物学研究——生活习性的观察[J];植物保护学报;1980年03期
8 徐肇坤,张雄飞;小菜蛾生活习性的研究[J];湖南农业科学;1984年04期
9 何复梅;郑志东;黄秉资;;小菜蛾性信息素田间应用研究[J];昆虫天敌;1988年04期
10 武美云;;用性信息诱杀小菜蛾[J];现代农业;1989年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 冯夏;帅应垣;陈焕瑜;;小菜蛾对Bt的抗药性及其治理技术研究[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
2 赵建周;卢美光;范贤林;朱国仁;魏岑;;小菜蛾和棉铃虫对Bt制剂的抗性监测方法研究[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
3 张鹏飞;孟琳琳;王进忠;张志勇;张民照;;蛇床子素对小菜蛾的生物活性及对虫体内解毒酶活性的影响[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
4 陆增法;沈淑平;陈守坚;罗广宁;;利用HD-1制剂防治小菜蛾的研究[A];全国生物防治学术讨论会论文集[C];1991年
5 吴伟坚;;小菜蛾对寄主的选择性及机制[A];昆虫与环境——中国昆虫学会2001年学术年会论文集[C];2001年
6 孟晓云;张月英;;小菜蛾性信息素田间活性[A];北京昆虫学会成立四十周年学术讨论会论文摘要汇编[C];1990年
7 李广宏;朱应;蔡汪洋;孟小林;梁东瑞;;Vc、胆碱对小菜蛾产卵的影响[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
8 侯有明;尤民生;;非嗜食植物次生物在小菜蛾生态控制中的应用[A];中国青年农业科学学术年报[C];2002年
9 蒋继宏;吴薇;黄小花;王秀琴;;苦豆碱对小莱蛾体内保护酶系统活力的影响[A];第二届全国绿色环保农药新技术、新产品交流会论文集[C];2003年
10 梁东瑞;孟小林;朱应;李广宏;叶林柏;郜金荣;;小菜蛾病毒—Bt复合生物杀虫剂[A];全国生物防治学术讨论会论文摘要集[C];1995年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 张翕;油菜小菜蛾虫害的防治[N];山西科技报;2004年
2 林勇文 余德亿;小菜蛾综合防治技术[N];福建科技报;2005年
3 陈英侠;小菜蛾的发生与防治[N];河南科技报;2007年
4 山东省枣庄市农业局 翟洪民;蔬菜小菜蛾防治技术[N];河北科技报;2008年
5 左楚才;暖冬谨防油菜小菜蛾[N];农民日报;2004年
6 本报记者;小菜蛾中等偏重发生[N];瓜果蔬菜报.农业信息周刊;2007年
7 辛集市植保站 周芳;抓紧防治小菜蛾、菜青虫[N];河北科技报;2009年
8 金素英;小菜蛾防治方法[N];河南科技报;2007年
9 北农;蔬菜小菜蛾防治技术[N];河南科技报;2008年
10 冯国明;小菜蛾的生活习性[N];陕西科技报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 雷妍圆;小菜蛾对BT毒素蛋白CrylAc抗性相关基因的筛选[D];中国农业科学院;2012年
2 龚佑静;小菜蛾对Bt毒素Cry1Ac抗性的生化与分子机理[D];南京农业大学;2010年
3 杨广;十字花科蔬菜——小菜蛾——小菜蛾绒茧峰之间的相互作用[D];福建农林大学;2001年
4 杨峰山;抗Bt小菜蛾的选育、受体基因克隆及PTD对Cry1Ac的增效作用[D];中国农业大学;2004年
5 孙丽娜;小菜蛾和甜菜夜蛾鱼尼丁受体基因克隆及分子药理学研究[D];中国农业科学院;2012年
6 王延锋;转Bt基因抗虫玉米田间试验与遗传稳定性分析[D];东北农业大学;2010年
7 魏辉;植物次生物质对小菜蛾控制作用的研究[D];福建农林大学;2002年
8 王音;绿僵菌LD65和LF68菌株生物学特性及对小菜蛾的致病机理[D];中国农业大学;2005年
9 李艳梅;棉铃虫对Bt毒素Cry1Ac抗性的分子遗传机理研究[D];东北农业大学;2009年
10 曹广春;小菜蛾Plutella xylostella (L.)对虫酰肼的抗性及其机理研究[D];南京农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 苏旭;苍耳次生物质对小菜蛾的产卵忌避活性及其化学成分[D];湖南师范大学;2010年
2 李慧冬;Avermectin系列化合物对小菜蛾实验生态毒理学研究[D];山东农业大学;2002年
3 李阿根;小菜蛾对氟虫腈的抗性机理研究[D];南京农业大学;2004年
4 郭莹;小菜蛾对毒死蜱的抗性与饲养温度关系的研究[D];福建农林大学;2004年
5 覃伟权;热带植物次生物质对小菜蛾种群的控制作用[D];华南热带农业大学;2004年
6 何玉仙;小菜蛾对阿维菌素的抗药性研究[D];福建农林大学;2000年
7 刘海涛;小菜蛾主要捕食性天敌捕食功能系统及其助增机理研究[D];扬州大学;2001年
8 吕桂贞;杀虫剂混配对小菜蛾毒力联合作用及生化机理研究[D];华中农业大学;2010年
9 施英利;温州蜜桔桔皮提取物对小菜蛾的生物活性[D];浙江大学;2004年
10 张晓飞;小菜蛾对三种杀虫剂抗药性的遗传基础研究[D];南京师范大学;2003年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026