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《中国农业科学院》 2017年
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水稻tree1增变表型的分子遗传学研究

胡兴明  
【摘要】:生物体内DNA损伤错配修复系统是保证生物体内细胞基因组稳定和忠实性传递一条重要途径。人类中遗传性直肠癌研究表明损伤修复系统中MSH2基因突变会导致组织中细胞出现增变表型,但不断增变表型产生的分子机理并不清楚。水稻tree1是植物特有的MSH7基因突变而致的增变表型,表现为水稻植株分蘖增多,株高变矮,生长时期转换推迟等。分子遗传学分析发现tree1增变表型很大一部分与miR156b/c基因高转录水平紧密相关,而导致miR156b/c基因错误高转录表达推测可能是表观遗传基因OsLHP1突变造成的。
【关键词】:水稻 异时性 MSH7(Mismatch Homolog7) miR156b/c OsLHP1
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:博士后
【学位授予年份】:2017
【分类号】:S511
【目录】:
  • 摘要5-6
  • ABSTRACT6-8
  • 第一章 文献综述8-23
  • 1 DNA损伤与修复8-20
  • 1.1 光致复活作用9-10
  • 1.2 碱基切除修复10-12
  • 1.3 核苷酸切除修复(Nucleiotide excision repair)12-14
  • 1.4 错配修复(Mismatch repair)14-16
  • 1.5 双链断裂修复(Double-strand break repair)16-20
  • 2 水稻miR156/SPLs和miR172/AP2控制分蘖与穗分枝的分子通路20-22
  • 3 研究问题的提出22-23
  • 第二章 材料与方法23-32
  • 2.1 实验材料23
  • 2.1.1 植物材料23
  • 2.1.2 菌株和载体23
  • 2.1.3 常用分子生物学试剂23
  • 2.2 实验方法23-32
  • 2.2.1 水稻材料的田间栽培及伸长节间的测量24
  • 2.2.2 水稻EMS诱变处理方法24
  • 2.2.3 定位群体的构建24
  • 2.2.4 图位克隆24-25
  • 2.2.5 功能验证25-26
  • 2.2.6 RNA提取和RT-PCR分析26-27
  • 2.2.7 荧光实时定量PCR(Real-Time PCR)27
  • 2.2.8 microRNA垂直电泳与半干法转膜27-28
  • 2.2.9 microRNA Northern blot检测28-29
  • 2.2.10 全基因组甲基化测序29-30
  • 2.2.11 CRISPR-CAS9基因编辑(Catalog.No.VK005-01)30-32
  • 第三章 结果与分析32-38
  • 3.1 tree1(tr1)是一个异时性(heterochrony)半显性突变体32
  • 3.2 错误高转录的miR156b/c与tr1中多分蘖、异时性表型高度连锁32-34
  • 3.3 tr1的增变表型(mutator phenotype)是由于msh7突变所致34-35
  • 3.4 OsLHP1调控miR156的表达和生育期的转换35-36
  • 3.5 tr1有潜在的育种利用价值36-38
  • 第四章 结论与讨论38-39
  • 致谢39-40
  • 参考文献40-44
  • 作者简历44-45

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1 胡兴明;水稻tree1增变表型的分子遗传学研究[D];中国农业科学院;2017年
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