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《中国农业科学院》 2019年
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光质和油菜素内酯对棉花胚性愈伤组织影响初析

于娅  
【摘要】:本文以中棉所24为研究材料,从光质和油菜素内酯两个角度对棉花胚性愈伤组织诱导的影响进行了研究,通过生理生化和分子生物学角度进行了实验,旨在提高棉花组织培养和遗传转化的效率,为棉花生物技术提供一定的理论基础。本文的主要结论是:1红光较白光比愈伤组织黄褐色体积适中,能明显促进胚性愈伤组织的分化,表现为分化时间缩短,10天-20天左右即可,分化率为白光的1.5x-3x,EC分化状态良好。愈伤组织鲜重:蓝光红光白光黑暗;酶活:蓝光下POD、SOD活性最高,其活性越高,愈伤组织增殖越大,其酶活性与愈伤组织增殖成正比关系,CAT活性最低,红光下三种酶活性居中。蓝光下可溶性糖和蛋白含量较低。多胺和激素含量:红光处理下腐胺含量较少,总胺含量、精胺和亚精胺含量较高。激素含量,红光处理下生长素较高,且差异显著IAA/ZT比值对胚性愈伤组织发生有正效应;ABA适中水平,可能有利于胚性细胞发生,而较高ABA含量可能不利于胚性细胞的发生。红光下体胚基因AGL15、LEC2、WUS表达量上调,红光处理下的愈伤组织开始具有了胚性细胞的特征,标记基因已明显上调表达。2不同浓度BRZ外施于培养基中,棉花胚性愈伤组织分化率出现显著差异,随着BRZ浓度0-60nm增加,EC分化率逐渐增加;当BRZ浓度为60nm时,EC分化率最高,可以达到89.6%。转录组学、生理生化结合转基因株系实验表明:BR对于棉花胚性愈伤组织分化是必须的,适当浓度的BR能够明显促进胚性愈伤组织的分化,可能原因是由于BRZ抑制作用,使得BRX上调,AUX升高,生长素浓度升高,导致BR合成基因上调,BR浓度适当升高;由于BRZ的作用,导致乙烯相关信号基因ETR1、CTR1、EBF1、ERN3和ERF1/2明显下调,相关不饱和脂肪酸基因ACC、FAD和KCS明显上调,乙烯水平的降低和脂肪酸含量的增加,都促进胚性愈伤组织分化率升高。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:博士后
【学位授予年份】:2019
【分类号】:S562

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