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《中国农业科学院》 2000年
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小麦耐盐基因的RAPD标记及其克隆

陈道明  
【摘要】: 本实验以普通小麦(Triticum aesticum L.)盐敏感栽培品种农大 85021为母本和农家耐盐品种茶淀红麦为父本杂交,对其杂交组合的141 株F2分离个体进行耐盐性鉴定,通过遗传分析和卡方检验证实耐盐品种 茶淀红麦含有一个主效耐盐基因,与盐敏感品种农大85021杂交后代分 离符合1:2:1的分离规律。从F2分离群体中选取高度耐盐个体及高度 盐敏感个体各10株,分别建立耐盐基因池和盐敏感基因池,依据混合群 体分组分析(Bulked Segregant Analysis,BSA)法,通过RAPD实 验,从520个10碱基随机引物中筛选出了一个在两池间具有多态性的引 物OPZ09,用双亲、F1、F2单株DNA进行RAPD实验证明了该引物扩增 出的特异性片段OPZ09-590是一个与茶淀红麦耐盐基因连锁的RAPD标 记,用JOINMAP软件计算基因与标记间的重组值为5.674%,连锁距离为 6.557cM。从琼脂糖凝胶中回收了OPZ09-590,与载体pUCm-T连接,并 转入受体菌JM109。提取质粒用EcoRI和HindIII进行双酶切,通过电 泳检测证实了克隆片段确为OPZ09-590,对克隆片段测序进一步表明其 实际大小为591bp,故此标记应记为OPZ09-591。本实验为进一步开展 小麦耐盐育种的分子标记辅助选择及耐盐基因的克隆和定位奠定了基础。
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