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《中国农业科学院》 2002年
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小麦耐盐相关基因片段的筛选与克隆

王涛  
【摘要】: 土壤盐渍化是影响农业生产和生态环境的严重问题,耕地的减少和淡水资源的不足将迫使人类开发利用大面积的盐碱地、海岸带和滩涂地带。因此,植物耐盐生化及分子生物学机理研究由于其在理论研究和应用实践方面的重要意义,引起了国内外科学家的高度重视,是当前植物分子生物学研究的热点。在模式植物酵母、拟南芥和水稻中关于耐盐性的研究已经取得了很大的进展,然而对农作物小麦的耐盐机理还知之甚少。为了研究这一问题,我们利用RNA指纹技术cDNA-AFLP(cDNA-amplified fragment length polymophism)分析了耐盐性较强的小麦材料98-160在盐胁迫和非胁迫下基因表达的差异。采用74对引物组合,分离到了26个有差异的cDNA片段,其中包括盐胁迫诱导表达的12个,诱导增强表达的4个和抑制表达的10个,通过Reverse Northern Blot进一步筛选出了3个阳性克隆。Northern Blot结果显示,其中2个cDNA片段(SⅠ、SⅡ)呈阳性反应,在对照叶片中表达量很少,但在盐胁迫的小麦叶片中表达量明显增加,证明这2个片段与盐胁迫有关,表达受盐胁迫诱导。为了进一步弄清SⅠ、SⅡ的结构,我们对它们进行了克隆和测序分析,SⅠ大小307bp,SⅡ大小200bp,GenBank查询结果显示SⅠ与一系列激酶有较高的同源性(50%~70%),很可能是一个与抗渗透胁迫有关的基因片段。SⅡ与已知基因同源性较低,可能是一个新基因的一部分。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S512.1

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【参考文献】
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