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绢丝昆虫茧丝蛋白酶抑制剂的研究

裘智勇  
【摘要】: 以六种绢丝昆虫的茧壳及丝胶茧、裸蛹所吐的少量丝等为材料,对茧丝中蛋白酶抑制剂(Proteinase Inhibitor,PI)的含量进行了研究。结果表明:家蚕的茧丝中含有相对较多的蛋白酶抑制剂;天蚕绿茧、野蚕的茧丝中有少量的蛋白酶抑制剂存在;蓖麻蚕的茧丝中有微量蛋白酶抑制剂存在。天蚕黄茧、柞蚕茧、樗蚕茧的茧丝中基本无蛋白酶抑制剂存在;丝胶茧(Nd-s)中有少量蛋白酶抑制剂存在,裸蛹(Nd)所吐的少量丝胶中无蛋白酶抑制剂存在。 通过对家蚕茧丝蛋白酶抑制剂的进一步研究表明:不同家蚕品种间茧丝蛋白酶抑制剂的含量差异极显著,外层丝中含量较多,F_1代的含量呈双亲中间型,偏向于含量较多的亲本,雌雄间含量无显著差异。 以中国系统、日本系统、欧洲系统、多化性系统品种各11个的茧壳为材料,对茧丝蛋白酶抑制剂的含量及其与一些主要经济性状的相关性进行了研究。结果表明:家蚕系统间茧丝蛋白酶抑制剂的含量为中国系统>日本系统>欧洲系统>多化性系统,中、日、欧三个系统的茧丝蛋白酶抑制剂含量与多化性系统间有极显著的差异;家蚕茧丝蛋白酶抑制剂的含量与茧层量、茧层率呈极显著的正相关,与全茧量、死笼率、幼生率、虫蛹率无显著的相关性。 通过对家蚕品种B_2的内外茧层粗提、透析纯化和HPLC分离纯化后,获得了纯度较高的茧丝蛋白酶抑制剂。抑制活性回收率接近100%,纯化倍数达到50倍以上,在Tricine-SDS-PAGE上基本呈现一条比较均一的蛋白带,内层茧丝PI和外层茧丝PI的分子量均约为7500左右。 经过对纯化的家蚕茧丝蛋白酶抑制剂的热处理后研究发现,家蚕茧丝蛋白酶抑制剂的热稳定性较强。中系品种C_(12)和日系品种J_(12)茧丝蛋白酶抑制剂的热稳定性很强,欧系品种罗尼9号和多化性品种四海茧丝蛋白酶抑制剂的热稳定性相对较弱。


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