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《中国农业科学院》 2002年
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猪繁殖与呼吸综合征病毒感染猪体内细胞因子与病毒的定量检测

郭海龙  
【摘要】: 本文研究了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)人工感染猪感染早期体内细胞因子的变化、外周血淋巴细胞的分化、病毒在各组织中的复制及其引起的组织病理学变化等,以期初步揭示PRRSV的致病机制。 我们构建了IFN-γ、IL-12 p40、IL-4和IL-10等4种细胞因子的竞争模板,建立了定量检测这几种细胞因子mRNA的竞争PCR技术,用该方法定量分析了PRRSV感染不同时期猪巨噬细胞(PAM)和外周血单个核细胞(PBMC)中上述细胞因子的动态变化。 对PRRSV感染猪PBMC中细胞因子检测结果表明,感染早期IFN-γ表达显著增加,而对IFN-γ表达有增强作用的IL-12 p40的表达水平却呈下降趋势。IFN-γ是Th1类细胞因子的典型代表,并且是促进细胞免疫应答的重要效应因子。IL-4很难检测到。IL-4是Th2类细胞因子的主要代表,主要促进机体的体液反应,推测PRRSV感染后IL-4的表达受到抑制。IL-10的表达水平有轻微的降低。IL-10主要平衡两类细胞因子并促进Th0细胞向Th2细胞极化,推测PRRSV感染体液免疫受到一定程度的抑制。 PRRSV感染初期CD3+、CD4+、CD8+T细胞在PBMC中的比例开始明显下降,随后显著升高,而SWC6+细胞比例一直呈上升趋势,表明机体针对病毒感染造成的T细胞减少,代偿性地加速了幼稚T淋巴细胞的增殖和分化,以参与机体对病毒感染的免疫反应。 猪PRRSV感染后第14天肺脏出现典型的间质性肺炎。对PRRSV ORF2基因的竞争PCR检测结果表明,PRRSV主要在原发性靶器官肺脏中增殖,继之,主要在脾脏、淋巴结中复制,其次是扁桃体。 我们推测在PRRSV感染初期,机体产生的免疫应答以细胞免疫为主,但并不能抑制病毒的复制。 本研究首次用竞争PCR的方法检测了PRRSV感染早期猪体内细胞因子的变化以及病毒在组织中的复制,为阐明PRRSV的免疫致病机制积累了新的线索。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2002
【分类号】:S858.28

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