18碳不饱和脂肪酸的氢化及共轭亚油酸前体累积规律研究

【摘要】： 本研究包括5个试验，目的是用瘤胃微生物体外培养法研究游离不饱和脂肪酸混合物(FFAM)和植物油对瘤胃发酵的影响，考察C_(18)UFA的氢化以及牛乳脂共轭亚油酸(CLA)前体物质cis-9，trans-11CLA和TC18:1的累积规律，探索提高牛乳脂CLA含量的可能性。体外培养的条件为：液体培养基，添加0.5g微晶纤维素粉，小剂量接种(5％)，39℃静态培养，培养液总量为100ml。各试验油脂添加量都以100ml为基础。 试验1设置对照组、20mgFFAM-A和FFAM-B等3种处理，研究0-96h的培养期内瘤胃微生物体外发酵的规律。培养液pH、TVFA浓度的变化趋势表明，0-60h是研究瘤胃微生物发酵的理想时间段，60h以后发酵基本停止；添加20mg FFAM严重抑制了瘤胃微生物发酵。 试验2研究FFAM添加量(5-20mg)对60h时间点瘤胃微生物发酵特征和C_(18)UFA氢化的影响，试验3考察5mgFFAM(A和B)处理条件下，0-60h培养期内各种C_(18)UFA的氢化进程及中间产物的累积规律；试验4比较5mg植物油和FFAM对瘤胃微生物发酵影响及其UFA氢化的差异，试验5研究植物油种类(豆油、棉籽油、菜籽油和亚麻油)和添加水平(0mg、5mg、10mg、15mg、20mg、25mg)对瘤胃微生物发酵、C_(18)UFA氢化及中间产物累积的影响，培养时间为60h。结果如下： 1)24h时间点的纤维消失率仅为60h的20％-25％，纤维降解主要发生在24-36h。与对照组相比，添加5mgFFAM-A和FFAM-B分别使60h的纤维消失率下降了27.3％和35.3％，纤维降解受抑制程度分别在FFAM-A添加量达到15mg和FFAM-B添加量达到10mg后超过90％。与此对应，24h时5mgFFAM处理与对照组的TVFA浓度没有显著差异(P＞0.05)，60h时5mgFFAM处理的TVFA浓度显著低于对照组(P＜0.01)。 2)与对照组相比，5mg植物油处理对培养液pH、TVFA浓度、纤维素消失率没有显著影响(P＞0.05。亚麻油、豆油、棉籽油、菜籽油分别在添加量达到10mg、15mg、20mg、25mg时对纤维降解产生显著的抑制作用(P＜0.05)。FFAM-A对纤维降解的抑制效应是豆油的9.3倍。 3)在FFAM和各种植物油处理中，C18:3n-3的消失速度显著大于C18:2n-6，C18:2n-6的消失速度则显著大于油酸(P＜0.01)，瘤胃微生物优先氢化不饱和度更高的UFA。FFAM-B处理中C18:2n-6的消失速率显著低于FFAM-A处理(P＜0.01)，亚麻油处理中C18:2n-6的消失速率显著低于FFAM-A处理(P＜0.01)豆油和菜籽油处理，C18:3n-3的大量存在抑制了C18:2n-6的氢化。 4)随着添加量增加，各步氢化反应的转化率均呈下降趋势，其中C18:3n-3氢化为C18:2n-3、C18:2n-6异构为CLA和CLA氢化为TC18:1等步骤受影响较小，而C18:2n-3氢化为TC18:1、TC18:1和C18:1氢化为硬脂酸等直接加氢步骤受影响较大。在2种FFAM处理中，CLA比例在6h达到最高峰；在FFAM-A处理中， ＊C18：1的比例在24h达到最高峰，随后以非常缓慢的速度减少：在F FAMFAME处理 中，C18：Zn－3在12h达到最高峰，TC18：1一直不断增加，不过36h后增幅不显著 （P＞0刀5）。 5）在sing水平，亚麻油、豆油、棉籽油、菜籽油的氢化完全度分别为90刀2％、 93刀0％、93．70％和 94．36％，FFAM．A、FFAM．B的氢化完全度分s帜有37．36％和 23．62％。随着添加量增加，各种植物油的氢化完全度呈显著下降的趋势（P＜0刀1）。 以豆油、棉籽油和亚麻油处理的数据为基础分析，氢化完全度与添加量、双键数 和纤维消失率之间保持着显著的多元回归关系，UFA在抑制纤维降解的同时抑制 了自身氢化完全的程度。 6）随着添加量增加，植物油处理中各种 CI SUFA的比例均呈显著上升的趋势 （P＜O刀5），不过＊＊A所占比例始终很低，豆油、棉籽油处理中＊C18：1呈线性增 长趋势，在sing时分别为4刀4％、3．30％，到25mg分别达到40石5％、33．92％；亚 麻油处理中TC18l和＊：Zlll均保持着较大的增幅，在sllg时分别为4．42％、 二．28％，到25mg分另达至35．27％、27．32％。