收藏本站
《中国农业科学院》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

棉花黄萎病毒素诱导表达的陆地棉cDNA序列的克隆与定位

王力华  
【摘要】: 棉花黄萎病(Cotton Verticillium wilt)是由真菌病原大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)引起的维管束病害,在世界范围内流行,是棉花生产中的主要病害之一,迄今为止,棉花黄萎病尚不能得到有效控制。由于棉花黄萎病是一种土传性病害利用物理化学手段进行黄萎病防治效果甚微,培育抗、耐黄萎病的棉花品种是解决黄萎病危害的最为经济有效的手段,利用基因工程方法培育棉花抗黄萎病品种已成为棉花分子育种的重要途径。因此深入了解棉花黄萎病菌与宿主的相互作用分子基础,克隆棉花在黄萎病菌侵染过程中应激表达基因成为研究热点。 本研究利用棉花黄萎病菌毒素粗提物诱导耐黄萎病陆地棉品种中棉12应激基因的表达,鉴定受黄萎病菌毒素诱导的应激cDNA序列,试图获得棉花黄萎病抗性相关候选基因,为利用基因工程途径育种提供新的基因来源。通过分离毒素诱导棉花幼根24小时后的总RNA,PCR法合成双链cDNA,应用抑制消减杂交获得差异表达的180个克隆。经反Northern Blot筛选出15个受棉花黄萎病菌毒素粗提物诱导应激表达的阳性cDNA克隆,将其命名为Vdrg (Response Gene induced by toxin of Verticillium dahliae)并对其进行序列分析和棉花基因组定位。 本研究对获得的15个cDNA序列分析初步表明:Vdrgl序列长度为501bp,含有NBS-LRR保守序列,为NBS-LRR类型抗病蛋白编码基因;Vdrg2序列长度为1048bp,为丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶类似蛋白编码基因;Vdrg3序列长度为409bp,为Zn依赖型脱氢酶类似蛋白编码基因;Vdrg4序列长度1538 bp,为PTS HPR SER型丝-氨酸苏氨酸蛋白激酶类似蛋白编码基因;Vdrg5序列长度为856bp和Vdrg11序列长度为757bp,均为磷酸果糖激酶类似蛋白编码基因;Vdrg6、Vdrg7和Vdrg15序列长度为599bp、986bp、231 bp,均为蛋白激酶类似蛋白编码基因;Vdrg8和Vdrg9序列长度均为409 bp,为细胞色素氧化还原酶类似蛋白编码基因;Vdrg10序列长度为632bp,为糖基化蛋白类似蛋白编码基因;Vdrg12和Vdrg13序列长度分别为708bp、707 bp,均为水解酶类似蛋白编码基因;Vdrg14序列长度为606bp,为细胞色素C类似蛋白编码基因。 利用PimaS6与Acala Maxxa杂交的四倍体棉花海陆杂交群体对12个Vctrg序列进行了棉花基因组定位。定位结果表明:Vdrg1定位于D02连锁群端点,与标记pAR286E4C和Unig22D03bE6D相距5.6cM;Vdrg2定位于18(D)染色体上和A01连锁群,在18(D)染色体上距离端点166.0cM,与标记Unig06G03aE6R相距0.9cM,在A01连锁群上距离端点141.8cM,与标记Coau2L21aE4D相距0.5cM,与标记Coau2117E4C相距1.1cM;Vdrg3定位于D04连锁群,距离端点69.4cM,与标记A1212*E5C相距0.1 cM,与标记A1682E6C相距0.8cM;Vdrg4定位于23(D)染色体,距离端点38.1cM,与标记GatelBD04cE6R(A01,A05)相距0.9cM,与标记相距4.6cM;Varg5定位于D02连锁群距离端点165.4cM,与标记pAR922E4D相距3.7cM,与标记相距5.2cM;Vdrg6定位于A06连锁群和14(D)染色体,在A06连锁群上距离端点77.7cM,与标记Unig23D03bE3C相距1.0cM,与标记pAR071E3C相距0.7cM,在14(D)染色体上距离端点102.1cM,与标记A1449bE2D相距0.2cM,与标记A1222.09相距3.3cM;Vdrg8与Vdrg9定位于D07连锁群距离端点43.4cM,与标记Gate4CA09cE6C相距0.3cM,与标记pAR078cE3C相距1.6cM;Vdrg10定位于A01连锁群和A02连锁群,在A01连锁群上距离端点56.9cM, 摘 要 与标记pAR058E4C十足 0.gCM,与标记pM13aE3C不足 22 CM,在 A02连锁群上距 离端点46.7CM与标记PVNC244E3C同一位置,与标记GatCZBF03E4C十足 二.6CM,与 标记COauZA22bE3R相距5.4CM;VdrglZ与VdTgl3定位于18(D)染色厥离端点95刀CM, 与标记 MSAT172lC相距 0.4cM,与标记 Gate3AH03cE3C +R距 2二cM:Vdral4 f{V于染 色体距离端点 37.IcM与标记Gate3BEllbE3D相距 1.4cM,与标记 Unig28E02ESC相距 5.3CM。
【学位授予单位】:

知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 赵建军;;北疆棉花黄萎病发生现状及防治对策[J];植物医生;2011年04期
2 史婕;吴坚;王丽;;偏最小二乘回归算法在棉花黄萎病病情预测中的应用[J];数字技术与应用;2011年08期
3 王俊娟;王德龙;樊伟莉;宋贵方;王帅;叶武威;;陆地棉萌发至三叶期不同生育阶段耐盐特性[J];生态学报;2011年13期
4 周小云;李秋英;马盾;王子霞;海热古力;;陆地棉花粉管通道法的应用研究[J];中国棉花;2011年06期
5 罗佳;;施用微生物有机肥能提高棉花对黄萎病的抗性[J];农家顾问;2011年09期
6 曾浩;;陆地棉早熟性、丰产性基因效应研究[J];北京农业;2011年12期
7 谢晓兵;于霁雯;吴嫚;翟红红;范术丽;宋美珍;庞朝友;李兴丽;张金发;喻树迅;;利用SSCP技术分析棉花纤维差异表达的基因[J];棉花学报;2011年04期
8 刘章伟;徐鹏;张香桂;高媛媛;倪万潮;沈新莲;;盐胁迫下陆地棉苗期差异表达基因的cDNA-AFLP分析[J];江苏农业学报;2011年04期
9 任燕;章晓波;吴穗洁;唐灿明;;陆地棉花药蛋白质组分析中双向电泳技术体系的建立与优化[J];棉花学报;2011年04期
10 赵龙;艾尼瓦尔·阿不都拉;郭峰;彭华;吾甫尔·阿不都;王瑞华;;耐高温陆地棉品种综合评价及优良品种选择[J];中国棉花;2011年06期
11 曹燕燕;李志辉;郭春强;靳巧玲;刘欢乐;姚明镜;杨业华;;35SP-rolB基因在棉花转基因系基因组中转录稳定性研究[J];河南农业科学;2011年07期
12 聂太礼;王梦亮;王婷;杨军;;江西棉区棉花黄萎病高效拮抗菌的筛选、鉴定和抗菌物质研究[J];中国棉花;2011年08期
13 吴大鹏;房嫌嫌;崔闰根;陈进红;祝水金;;国内外陆地棉品种资源的亲缘关系和遗传多态性研究[J];棉花学报;2011年04期
14 徐海江;林涛;田立文;苏秀娟;崔建平;郭仁松;尹亮;;氮肥对南疆膜下滴灌陆地棉铃重、衣分及产量的影响[J];中国棉花;2011年07期
15 周凯;叶武威;王俊娟;王德龙;樊保香;王帅;;陆地棉质体转录活性因子基因GhPTAC的克隆及其耐盐性分析[J];作物学报;2011年09期
16 孔凡金;李俊文;龚举武;石玉真;刘爱英;商海红;龚万奎;王涛;袁有禄;;不同遗传背景下陆地棉衣分和子指性状QTL定位[J];中国农学通报;2011年18期
17 兰孟焦;杨泽茂;石玉真;葛瑞华;李爱国;张保才;李俊文;商海红;刘爱英;王涛;袁有禄;;陆海BC_4F_2和BC_4F_3代换系的评价及纤维产量与品质相关QTL的检测[J];中国农业科学;2011年15期
18 李红亚;李术娜;朱宝成;;棉花黄萎病拮抗细菌B.velezensis6-61拮抗蛋白发酵条件的优化[J];中国农学通报;2011年21期
19 ;2010年美国三大作物农药使用情况[J];农药市场信息;2011年16期
20 姜学健;;滴灌条件下高产棉花水肥技术[J];新疆农业科技;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 赵军胜;王家宝;高明伟;杨静;王秀丽;陈莹;王留明;;陆地棉HB红花近等基因系杂种优势利用研究[A];中国棉花学会2010年年会论文汇编[C];2010年
2 曹志斌;郭旺珍;张天真;;利用CSIL改良新疆陆地棉品系纤维品质的研究[A];现代分子植物育种与粮食安全研讨会论文集[C];2011年
3 张文蔚;王升正;齐放军;简桂良;;黄萎病菌诱导下的陆地棉高抗黄萎病品种SSH文库的初步构建[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
4 商连光;闫勇;华金平;;陆地棉组合F_1、F_2代配合力和杂种优势分析[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
5 贾菲;孙福鼎;李俊文;刘爱英;石玉真;龚举武;商海红;巩万奎;王涛;刘志;袁有禄;;多环境下陆地棉重组自交系纤维品质性状的QTL定位[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
6 贾银华;周忠丽;孙君灵;潘兆娥;何守朴;庞保印;杜雄明;;陆地棉资源群体结构与纤维品质性状的关联分析[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
7 孙玉强;张献龙;金双侠;梁绍光;朱龙付;聂以春;郭小平;;陆地棉Coker 201和克劳茨基棉对称体细胞杂交的研究[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
8 王冬梅;孟庆玉;危晓薇;田颖川;徐遥;于江南;;双抗虫转基因陆地棉抗虫性鉴定评价[A];中国细胞生物学学会第八届会员代表大会暨学术大会论文摘要集[C];2003年
9 张天真;;海岛棉和陆地棉的基因组分化[A];2008中国作物学会学术年会论文摘要集[C];2008年
10 王友华;卢孟柱;覃庆锋;李召虎;翟志席;段留生;;陆地棉巯基蛋白酶抑制剂基因片段克隆及氨基酸序列分析[A];中国棉花学会2005年年会暨青年棉花学术研讨会论文汇编[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者张卫 通讯员王宝霞;精河县建立万亩棉花黄萎病防治示范区[N];博尔塔拉报;2010年
2 记者 赵红梅 通讯员 郭金霞 阎立波;棉花黄萎病防治技术取得重要进展[N];河北日报;2010年
3 建湖县植保植检站 徐红 唐玮 周艳;综合措施防棉花黄萎病暴发[N];江苏农业科技报;2010年
4 本期嘉宾 顾本康 主持人 罗兵前;棉花黄萎病为何流行[N];江苏农业科技报;2003年
5 水清;棉花黄萎病发生重,是杂交抗虫棉惹的祸?[N];江苏农业科技报;2009年
6 顾长青;万里联姻育佳棉[N];江苏经济报;2009年
7 平安期货王兆先;全球棉花将爆发上涨行情[N];证券时报;2006年
8 王棉;棉花黄萎病的传播和消长规律[N];中华合作时报;2004年
9 张军;年初种植意向调查[N];湖北科技报;2007年
10 美协;今年美陆地棉和长绒棉种植总面积585万公顷[N];中国纺织报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈兵;基于多平台棉花黄萎病的遥感监测研究[D];石河子大学;2010年
2 赵付安;棉花黄萎病菌诱导陆地棉和野生棉差异表达分析及抗病相关基因克隆[D];河南大学;2012年
3 钱能;陆地棉遗传多样性与育种目标性状基因(QTL)的关联分析[D];南京农业大学;2009年
4 房卫平;棉花黄萎病抗性机制、遗传及分子标记的研究[D];浙江大学;2001年
5 沈新莲;陆地棉纤维品质QTL的筛选、定位及其应用[D];南京农业大学;2004年
6 杨代刚;陆地棉双列杂交的遗传效应及表达谱分析[D];中国农业科学院;2011年
7 王红梅;棉花抗黄萎病遗传及分子标记研究[D];华中农业大学;2005年
8 张轲;利用三亲本复合杂交群体构建陆地棉遗传连锁图谱与纤维品质QTL定位[D];西南大学;2011年
9 金骏培;陆地棉数量性状遗传分析和产量性状轮回选择的研究[D];南京农业大学;2003年
10 王鹏;陆地棉TM-1背景的海岛棉染色体片段导入系的培育鉴定和纤维强度QTL精细定位[D];南京农业大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王力华;棉花黄萎病毒素诱导表达的陆地棉cDNA序列的克隆与定位[D];中国农业科学院;2003年
2 赵磊;陆地棉NBS类抗病基因同源序列的克隆与分析[D];中国农业科学院;2009年
3 吴世秀;棉花不同杂交类型后代主要性状的遗传效应比较分析[D];河南科技学院;2010年
4 任燕;陆地棉双隐性核雄性不育系及可育系花药差异蛋白质组研究[D];南京农业大学;2009年
5 郑风敏;陆地棉F_2与F_(2:7)重组近交系群体图谱比较[D];西南大学;2010年
6 宋丽艳;陆地棉耐盐相关基因GhVP与GhSAMS的克隆、分析与表达[D];中国农业科学院;2010年
7 倪会娟;陆地棉重组近交系群体SSR标记遗传图谱构建与产量性状QTL定位[D];西南大学;2011年
8 张伟;陆地棉重组近交系中G6主要农艺性状的QTL定位[D];中国农业科学院;2010年
9 栾启福;陆地棉三种主要病害的遗传特性及其相关性研究[D];浙江大学;2003年
10 郗忠玲;陆地棉染色体片段置换系抗病与品质遗传效应的分析[D];石河子大学;2011年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978