收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

鸡传染性支气管炎重组鸡痘疫苗免疫效力的研究

杨春富  
【摘要】:鸡传染性支气管炎(Avian Infectious Bronchitis)是由冠状病毒属的冠状病毒引起的高度接触性传染病,是严重危害养鸡业的重要疾病之一。我国在防制鸡传染性支气管炎过程中,目前通常采用马萨诸塞(Massachusetts)血清型疫苗H120,H52,还有许多由地方分离株通过鸡胚致弱制备的商品化活疫苗。但由于我国大量鸡传染性支气管炎病毒不同血清型的出现,对感染异种IBV分离株而发病的免疫鸡群不能提供完全的保护作用,造成了我国免疫鸡群中IB频繁发生的原因之一。禽痘病毒载体疫苗在生产实践中已被证实为一种安全有效的疫苗,部分产品已经投入使用。本课题组已构建rFPV-S1-IFNγ和rFPV-S1,前期试验效果良好。本研究对其免疫效力进行了重组鸡痘病毒疫苗同弱毒疫苗比较试验、最小免疫剂量测定、安全性、遗传稳定性、不同条件保存对疫苗效价的影响等工作,为疫苗进一步的中试和推广作铺垫。 为了检测重组病毒的遗传稳定性,rFPV-S1-IFNγ与rFPV-S1用鸡胚成纤维细胞接种传代至30代,取第15、20、25、30代重组病毒作为受检代次。病毒蚀斑检测证明,重组病毒的效价在2×10~5上下波动,X-gal显色后所有蚀斑均呈蓝色;提取重组病毒基因组DNA,分别用S1和鸡Ⅱ型干扰素基因基因特异性引物进行PCR扩增,4个代次的重组病毒rFPV-S1-IFNγ均检测到了大小分别为660bp和500bp目的片段,在重组病毒rFPV-S1中也均检测到了660bp的S1基因特异性片段,序列测定表明2个外源基因在细胞传代过程中没有发生核苷酸和氨基酸的改变;间接免疫荧光检测显示各代次重组病毒中插入的外源基因均能表达,在荧光显微镜下观察到了特异性荧光。结果表明,重组鸡痘病毒具有较好的遗传稳定性,经过30代的传代后外源基因能够稳定表达。 将共表达传染性支气管炎病毒S1基因和鸡Ⅱ型干扰素基因的重组鸡痘病毒用生理盐水恢复至原体积,取0.1ml翅膀内侧无血管处接种1周龄SPF鸡(相当于1.0×10~5PFU/羽)。结果表明,即使采用原倍重组疫苗注射试验鸡也不会引起试验鸡发病,重组疫苗对试验鸡是安全的。 将100只4周龄SPF鸡分为4个组,分别免疫rFPV-S1-IFNγ、rFPV-S1、H120,并设PBS对照,免后4周用IBV LX4株攻击。结果13/22的鸡免疫rFPV-S1-IFNγ后能获得保护,rFPV-S1免疫组和H120的保护率分别是18/24和17/22。rFPV-S1-IFNγ免疫后能缩短IBV呼吸道排毒时间及病毒抗原在肾脏组织中存在时间,仅在攻毒后的6-8d可以在喉拭子和肾脏组织中检测到病毒和病毒抗原,比rFPV-S1和H120弱毒疫苗免疫组分别缩短了2d。H120弱毒疫苗和重组鸡痘病毒免疫组肝、脾、肾、肺和气管的病理变化轻微,rFPV-S1-IFNγ免疫组在攻毒后的第16d观察到病理变化,比rFPV-S1和H120弱毒疫苗免疫组攻毒后病变持续时间短了4d。试验鸡的血清学和外周血T淋巴细胞亚群的监测表明,疫苗接种后3周全部实验鸡均为IBV抗体阳性,其中,H120弱毒疫苗免疫组抗体水平最高,其次是rFPV-S1免疫组,rFPV-S1-IFNγ免疫组的抗IBV抗体水平最低。除了rFPV-S1-IFNγ免疫组CD4~+T淋巴细胞攻毒前下降较为明显,TCRγδ~+和CD8~+T淋巴细胞比例是最高的,其余各免疫组外周血CD4~+T、CD8~+T和TCRγδ~+淋巴细胞变化水平比较平稳。上述试验结果说明rFPV-S1-IFNγ促进了CD8~+T淋巴细胞的成熟,抑制外周血中CD4~+T淋巴细胞数量。提高了机体的细胞免疫水平,限制了机体B淋巴细胞的活化以及特异性抗体的产生;同时,rFPV-S1-IFNγ还能抑制活疫苗免疫接种引起的试验鸡增重降低作用,rFPV-S1-IFNγ的免疫试验鸡的增重没有受到疫苗接种的影响,与rFPV-S1和H120弱毒疫苗免疫组有显著差异。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 闵向波,闵向红,付有丰,闵向松;鸡群暴发肾型传染性支气管炎的报导[J];江西畜牧兽医杂志;2000年01期
2 邢兰君;中西医结合治疗鸡传染性鼻炎与传染性支气管炎混合感染病例[J];中兽医学杂志;2004年04期
3 陈晓清;里克库伯曼;;控制传染性支气管炎[J];国外畜牧学(猪与禽);2009年04期
4 刘广喜;;当前新城疫、禽流感、传染性支气管炎发病新特点[J];北方牧业;2010年05期
5 张宝山;王发强;任锁成;王鑫;;鸡肾病变型传染性支气管炎的综合防治[J];畜牧与饲料科学;2010年01期
6 吴悌霖;;鸡传染性支气管炎疫苗的研究进展[J];中国动物检疫;2011年01期
7 李凯年;抗坏血酸可以控制肉鸡的传染性支气管炎感染[J];中国禽业导刊;1994年01期
8 凌淑萍,张之中;肉鸡肾病型传染性支气管炎并发腹水症调查[J];畜牧与兽医;1995年03期
9 覃仁俊,汪国华;监测传染性支气管炎[J];国外畜牧学.猪与禽;1997年01期
10 赵云侠,车连清,杨彬;鸡腺胃型传染性支气管炎的诊治[J];中国兽医杂志;1999年05期
11 史秋梅;鸡腺胃型传染性支气管炎及其防制[J];河北畜牧兽医;1999年05期
12 庞淑英,胡乃芬,梁志选;鸡腺胃型传染性支气管炎的诊治[J];动物科学与动物医学;1999年01期
13 闵向波,闵向红,付有丰;鸡群暴发肾型传染性支气管炎的报导[J];黑龙江畜牧科技;2000年02期
14 严川宇 ,董清平 ,卢卫东;当前鸡病为何难治疗[J];农家参谋;2005年07期
15 魏建平,王刚,杨雪琴;蛋鸡新城疫传支1日龄同时免传染性囊病弱毒疫苗疫的试验报告[J];养禽与禽病防治;2005年08期
16 靖宁;罗国喜;陈关平;;鸡新城疫与传染性支气管炎二联活疫苗的研究[J];养殖技术顾问;2007年03期
17 赵武;刘伟;陈忠伟;;复方中药防治鸡传染性支气管炎的临床试验[J];中国畜牧兽医;2007年10期
18 邢兰君;;蛋鸡新城疫和肾型传染性支气管炎混合感染的治疗[J];兽药与饲料添加剂;2008年01期
19 王文彪;肾型传染性支气管炎及组织灭活油苗效果观察[J];中国家禽;1994年04期
20 张常印,李超美,肖正国,张敬友,杨昌;鸡肾变型传染性支气管炎的诊断[J];中国动物检疫;1994年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李聚芹;;传染性支气管炎的综合控制[A];“科技支撑高产、优质、高效、生态、安全现代畜牧业”论文集[C];2012年
2 李中华;关育芳;;鸡传染性支气管炎疫苗的研究进展[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(下册)[C];2010年
3 周煜;林健;周蛟;李汉秋;管艺;;鸡马立克氏病Ⅰ型CVI988/Rispens活疫苗最小免疫剂量测定[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
4 詹丽娥;乔忠;薛俊龙;王采仙;李红丽;孟冬霞;乔国峰;田林君;;同胚接种NDV和IBV制备二联灭活苗[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
5 罗开健;辛朝安;薜义山;杨克军;黎崇洪;;禽流感、新城疫、传染性支气管炎三联油乳剂灭活疫苗的研制[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
6 林毅;杨晓梅;曾慧;李力;谢晶;魏勇;;鸡腺胃型传染性支气管炎油乳剂灭活疫苗研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
7 习向锋;;鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感H9亚型、减蛋综合征四联灭活疫苗(La Sota株+M41株+HL株+AV127株)的最小免疫剂量研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
8 王泽霖;王新卫;刘岩;席瑞珍;张建武;;银加强金标免疫技术检测IBV抗原的研究[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2002年
9 何颖;谢芝勋;刘伟;;中药抑制传染性支气管炎病毒IBV增殖的体外试验研究[A];第六届全国会员代表大学暨第11次学术研讨会论文集(下)[C];2005年
10 庄文忠;任红梅;钱风芹;李爱芹;吴清民;;鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合症、传染性法氏囊病四联微囊灭活疫苗的研制[A];中国畜牧兽医学会禽病学会分会第十次学术研讨会论文集[C];2000年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 蒋贻海;传染性支气管炎致腺胃病变毒株变异的分子基础及我国和东南亚分离株的分子流行病学研究[D];南京农业大学;2002年
2 卫广森;新生仔猪大肠杆菌性腹泻K_(88)ac-ST_1-LT_B三价基因工程灭活疫苗的研究与应用[D];南京农业大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨春富;鸡传染性支气管炎重组鸡痘疫苗免疫效力的研究[D];中国农业科学院;2006年
2 刘钧;鸡传染性支气管炎抗体ELISA诊断方法研究[D];中国农业大学;2004年
3 王新卫;银加强金标免疫技术对鸡传染性支气管炎病毒和抗体的研究[D];河南农业大学;2001年
4 康文彪;新城疫—传染性支气管炎—传染性法氏囊病三联弱毒疫苗的研制[D];甘肃农业大学;2004年
5 王文成;鸡嗜肾型传染性支气管炎病毒W株的分离、致弱及其S1基因序列的测定[D];中国人民解放军军需大学;2002年
6 窦文茂;检测鸡传染性支气管炎病毒抗体的HI试验与ELISA相关性比较[D];扬州大学;2008年
7 王海凤;加味麻杏石甘汤防治鸡传染性支气管炎的试验研究[D];河北农业大学;2009年
8 张广峰;鸡肾型传染性支气管炎活疫苗(SK9株)的研究[D];南京农业大学;2007年
9 李阳;抗鸡传染性支气管炎病毒藏药筛选及作用机理研究[D];华中农业大学;2009年
10 郭海兵;猪圆环病毒2型(WH株)灭活疫苗的研究[D];华中农业大学;2009年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 万芳;传染性支气管炎[N];河南科技报;2003年
2 甘肃农业大学动物医学院 王锡祯 王泽华;传染性支气管炎仍是防治鸡病的重点[N];中国畜牧报;2002年
3 ;鸡新城疫、传染性支气管炎 二联活疫苗质量标准(上接10月29日三版)[N];中国畜牧水产报;2000年
4 ;鸡新城疫、传染性支气管炎二联活疫苗质量标准(未完待续)[N];中国畜牧水产报;2000年
5 邢台市兽医院 邢兰君;鸡疫苗的应用现状及趋势[N];河北科技报;2011年
6 山东信得科技股份有限公司 李文鹏;鸡传染性法氏囊炎病的综合控制[N];中国畜牧兽医报;2009年
7 瑞普(保定)生物药业有限公司技术部 李建丽;“优瑞康”和“优瑞安”的特点及其临床运用[N];中国畜牧兽医报;2009年
8 山东省平邑县平邑镇兽医站 林清波;蛋鸡安全生产九要素[N];河南科技报;2010年
9 高福;防治非典 三管齐下[N];人民日报海外版;2003年
10 ;致力家禽主要疫病新型诊断技术及新型疫苗研究与开发[N];科技日报;2008年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978