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《中国农业科学院》 2006年
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金丝桃素新制剂抗口蹄疫病毒的试验研究及金丝桃素的化学合成

孙瑶  
【摘要】:随着全球“回归自然”浪潮的日益高涨,天然药物以其毒副作用小、环保、安全、有效等特点越来越受到中国乃至世界的关注。金丝桃素作为贯叶连翘的主要活性成分物质之一已经在抗肿瘤、抗病毒、治疗抑郁症等方面已有大量报道,且效果显著。但应用于动物烈性传染病防治方面却鲜有人报道。本文以A类动物烈性传染病之首的口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)为模型,进行金丝桃素新制剂抗RNA病毒的生物试验研究。通过体外试验、动物试验及对小鼠脾淋巴细胞增殖试验,探索性的研究金丝桃素新制剂在重大疫病防治方面的作用。另外,本文还进行了金丝桃素化学合成的部分研究。具体研究如下: (一) 金丝桃素新制剂抗口蹄疫病毒的生物试验研究 1.体外抗口蹄疫病毒试验 本试验分别通过对金丝桃素新制剂在BHK-21细胞和3~4日龄乳鼠中,同利巴韦林和莪术油进行抗口蹄疫病毒的疗效比较,确定金丝桃素新制剂的抗病毒效果。结果表明:金丝桃素新制剂具有很好的抗病毒效果。在BHK-21细胞中,金丝桃素新制剂可以使TCID_(50)从6.22下降到3.22;在乳鼠中,金丝桃素新制剂在25mg·mL~(-1)的浓度下,可分别使OZ和Asia Ⅰ型的FMDV分别下降3~4个滴度,同对照药物相比表现出良好的抗病毒作用,差异显著(P0.05)。 2.体内抗口蹄疫病毒试验 本试验将四头经过检测无感染、无免疫的健康牛随机分成两组,用药组3头,对照组1头。分别舌面攻毒10000ID_(50)。攻毒同时,按照15g·Kg~(-1)给小牛灌服金丝桃素粗品,每天一次持续七天。临床症状结果显示:用药组只有一头轻微发病,对照组发病严重。液相阻断ELISA检测抗体滴度显示:用药组抗体滴度产生晚于对照组,且抗体水平相对较低。说明金丝桃素可能对病毒吸附宿主细胞、病毒自身复制或机体免疫等一种或几种途径有影响。 3.淋巴细胞增殖试验 本试验研究了金丝桃素新制剂对小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果发现金丝桃素新制剂从50μg·mL~(-1)开始至800μg·mL~(-1)六个浓度均可使小鼠脾脏淋巴细胞显著增加(P0.01),且具有明显的剂量依赖关系,可以间接推测金丝桃素新制剂具有一定提高免疫力的功能。 (二) 金丝桃素(Hypericin,HY)的化学合成 本研究综合国内外的文献资料,对其化学对照品合成路线进行了探索,将一些合成工艺进行了必要的改进,利用1,6,8-二羟基-3-甲基蒽醌在碱性、96℃与催化剂氢醌、氢氧化钾等共同作用,通过TLC跟踪、调节pH值、萃取、制备等一系列的过程,在光照条件下反应两周,制取目标化合物金丝桃素。 目标产物金丝桃素的结构经过薄层色谱法(TLC)、红外光谱(IR)、核磁共振氢谱(~1HNMR)及DEPC谱的确证。并运用高效液相色谱法(HPLC)对金丝桃素的含量进行了测定,达到85%。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S859.79

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【参考文献】
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