烟草赤星病抗性分子标记筛选
【摘要】:
烟草是我国重要的经济作物之一。烟草赤星病主要危害成熟期叶片,一旦气候条件适宜极易造成大面积流行,使烟草生产遭受重大的损失。培育抗烟草赤星病的优质品种是预防该病的最经济、有效的途径,分子标记辅助育种又是提高选择效率和加快育种进程的重要手段。本文针对赤星病抗性主要开展三方面的研究:研究烟草赤星病抗性基因的遗传特点:探索适合于烟草的SRAP反应条件和体系;构建并利用F_2代分离群体,用BSA法对烟草赤星病抗性基因进行SRAP分析,寻找与抗病基因连锁的SRAP标记。研究结果表明:(1)Beinhart1000-1对赤星病的抗性由显性单基因控制;净叶黄对赤星病的抗性不完全是由显性单基因控制;(2)确定了适合于烟草的SRAP反应条件及电泳显色方法,(3)用BSA法对Beinhart1000-1和净叶黄两个抗源材料的抗性基因进行了SRAP分析,从800个SRAP引物组合中筛选到一个与Beinhart1000-1的抗赤星病基因连锁的标记SL118_(360),它与目的基因的遗传距离为16.00cM。筛选到一个与净叶黄的抗赤星病基因连锁的标记S2113_(340),它与目的基因的遗传距离为12.88cM。
【关键词】:烟草 赤星病 抗性 SRAP 分子标记 【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S572
【目录】:
- 摘要5-6
- Abstract6-10
- 第一章 文献综述10-19
- 1.1 烟草赤星病研究10-14
- 1.1.1 烟草赤星病的症状11
- 1.1.2 烟草赤星病的病原11-12
- 1.1.3 抗源及抗性遗传12-13
- 1.1.4 抗赤星病品种的选育13-14
- 1.2 几种DNA分子标记技术比较14-17
- 1.2.1 RFLP14-15
- 1.2.2 RAPD15
- 1.2.3 AFLP15
- 1.2.4 SSR15-16
- 1.2.5 ISSR16
- 1.2.6 SRAP16-17
- 1.3 本研究的目的意义及主要内容17-19
- 1.3.1 目的和意义17-18
- 1.3.2 主要研究内容18-19
- 第二章 材料与方法19-27
- 2.1 供试材料19-20
- 2.1.1 烟草材料19
- 2.1.2 烟草赤星病菌19
- 2.1.3 SRAP引物19-20
- 2.2 试验用试剂和仪器20
- 2.3 试验地点20-21
- 2.4 试验设计21-22
- 2.5 试验方法22-27
- 2.5.1 烟草材料的准备22
- 2.5.2 接种菌液的准备22
- 2.5.3 接种方法22
- 2.5.4 基因组DNA的提取22-24
- 2.5.5 SRAP-PCR反应24
- 2.5.6 电泳及染色24-26
- 2.5.7 BSA法建池26
- 2.5.8 数据分析26-27
- 第三章 结果与分析27-34
- 3.1 供试烟草材料赤星病抗性鉴定和遗传分析27-28
- 3.2 烟草基因组DNA的提取28
- 3.3 SRAP反应体系和程序的选择28-29
- 3.4 烟草赤星病抗性基因的SRAP标记筛选29-34
- 3.4.1 多态性引物初筛29-30
- 3.4.2 在抗感基因池间筛选引物30-32
- 3.4.3 用抗感基因池间筛到的多态性引物对F_2代进行单株分析32-34
- 第四章 讨论与结论34-38
- 4.1 电泳及显色方法34
- 4.2 烟草赤星病抗源及其抗性遗传34-35
- 4.3 抗感亲本的SRAP差异及抗性基因的分子标记35
- 4.4 分子标记与烟草研究35-36
- 4.5 结论36-38
- 参考文献38-45
- 致谢45-46
- 作者简历46
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