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《中国农业科学院》 2007年
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青海血蜱幼蜱cDNA表达文库的构建及其免疫学筛选

赵海平  
【摘要】: 青海血蜱是我国首次命名的一种体外寄生虫,它除可通过叮咬吸血使宿主生产性能降低外,还可以传播多种血液原虫病,严重制约着我国蓄牧业的发展。 本实验构建了青海血蜱幼蜱的cDNA表达文库,经测定末扩增的初级文库的库容量为5.0×10~5 PFU/ml,扩增后库容为8×10~9 PFU/ml;用兔抗青海血蜱幼蜱阳性血清进行免疫学筛选,对筛选到的阳性噬菌体进行亚克隆,提取质粒,转化宿主菌JM109。测序分析结果表明:共得到幼蜱阳性克隆11个,分别命名为HqL01、HqL02、HqL03、HqL04、HqL05、HqL06、HqL07、HqL08、HqL09、HqL10、HqL11,通过与已知序列进行比对,其中6个为新基因,将序列HqL07、HqL08、HqL09、HqL11提交至GenBank/NCBI获取序列号,序列号分别为EF605263、EF605264、EF605265、EF605266。选择可能具有较好免疫原性的HqL07、HqL08、HqL09基因进行表达,表达产物的分子量为60kD、35kD、70kD,通过western blot进行初步免疫学鉴定,发现分子量为60kD的HqL07基因的表达产物具有较好的免疫原性。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S852.7

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 赵金国;小亚璃眼蜱唾液腺cDNA表达文库构建及4D8基因的克隆与原核表达[D];甘肃农业大学;2008年
2 王玙;微小牛蜱Bm91基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达[D];甘肃农业大学;2008年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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10 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
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3 刘冬光;廖娟红;于清龙;陈颖钰;陈焕春;郭爱珍;;融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[A];中国奶业协会年会论文集2009(上册)[C];2009年
4 王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
5 唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
6 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
7 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
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9 郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
10 于占东;赵双宜;何启伟;王翠花;牟晋华;刘春香;;抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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3 李克生;禽流感H5亚型、结核分支杆菌及弓形虫感染金标快速检测技术研究[D];甘肃农业大学;2009年
4 郭宪;抑制素基因工程疫苗的研究与应用[D];甘肃农业大学;2010年
5 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
6 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
8 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
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10 朱彦涛;甘蓝型油菜Polima CMS和陕2A CMS的形态和生化特征及其胞质遗传物质的比较研究[D];西北农林科技大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
2 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
3 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
4 王伟;恶臭假单胞菌表面展示细菌漆酶及对染料的脱色性能[D];华中农业大学;2010年
5 黄辉;哈维弧菌表面抗原的克隆和真核表达[D];华中农业大学;2010年
6 段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
7 龚瑞;粘附素ClfA和Cna对金黄色葡萄球菌乳腺炎的免疫保护研究[D];华中农业大学;2010年
8 刘源;猪胸膜肺炎放线杆菌双组分调控系统ΔnarQ/narP突变株构建及功能研究[D];华中农业大学;2010年
9 杨兆光;棉花航天诱变芽黄突变体中棉所58Vsp的遗传及基因表达差异分析[D];华中农业大学;2010年
10 李善文;蟾蜍灵对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响[D];南京医科大学;2009年
【同被引文献】
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1 阿布力克木·阿不都热西提;李冰;蒋卫;于心;;吐鲁番地区首次发现小亚璃眼蜱的报告[J];地方病通报;2006年06期
2 周金林;蜱的功能分子研究及其应用前景[J];动物医学进展;2004年01期
3 樊瑞泉;罗建勋;杨孝朴;殷宏;高金亮;关贵全;刘志杰;党志胜;马米玲;任巧云;刘爱红;;微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达[J];甘肃农业大学学报;2007年01期
4 赵忠芳;孔繁瑶;索勋;;兔非特异性免疫力抗长角血蜱幼虫感染能力的研究[J];中国农业大学学报;1998年S2期
5 欧阳立明,张惠展,张嗣良,刘志敏;巴斯德毕赤酵母的基因表达系统研究进展[J];生物化学与生物物理进展;2000年02期
6 彭毅,杨希才,康良仪;影响甲醇酵母中外源蛋白表达的因素[J];生物技术通报;2000年04期
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中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 袁改玲;青海血蜱生活史及不同发育阶段蛋白分析[D];内蒙古农业大学;2002年
2 高金亮;青海血蜱cDNA表达文库的构建和“隐藏抗原”基因的筛选、克隆与表达[D];中国农业科学院;2004年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前6条
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中国硕士学位论文全文数据库 前3条
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2 孙明;蜱病原真菌的分离、鉴定及其生物学特性研究[D];甘肃农业大学;2011年
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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7 李永彬;内蒙古镫口黄河扬水灌区的管理和水价改革[J];内蒙古水利;2001年02期
8 赵雪彬;对三盛公水利枢纽工程水费计收难原因的分析[J];内蒙古水利;2001年S1期
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 高金亮;青海血蜱cDNA表达文库的构建和“隐藏抗原”基因的筛选、克隆与表达[D];中国农业科学院;2004年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高金亮;罗建勋;樊瑞泉;魏永红;李文卉;任巧云;关贵全;殷宏;;青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选和阳性克隆的鉴定[J];中国兽医学报;2006年06期
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3 李雯;郭巍;张霞;;甜菜夜蛾中肠cDNA表达文库免疫学筛选、克隆及序列分析[J];华北农学报;2010年05期
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7 刘光远;谢俊仁;田占成;李知新;龚真莉;王路;柴慧萍;才学鹏;;长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA表达文库的免疫筛选与初步分析[J];甘肃农业大学学报;2008年01期
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2 刘志刚;高波;何毅华;;蒿属花粉变应原cDNA表达文库的构建[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编[C];2002年
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4 陈守义;余新炳;徐劲;吴德;林睿;;华支睾吸虫cDNA表达文库的构建及鉴定[A];中国动物学会第七届全国青年寄生虫学工作者学术讨论会论文摘要集[C];2002年
5 马立新;马琪;徐松;;新型、简捷、有效的方法构建基于腺病毒载体系统的cDNA表达文库[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
6 李文卉;盖文燕;王鸿盛;姚菊霞;曲自刚;王艳华;张德林;贾万忠;Radu Blaga;付宝权;;多头带绦虫多头蚴cDNA表达文库的构建及初步分析[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
7 高金亮;殷宏;关贵全;刘志杰;党志胜;马米玲;刘爱红;李文卉;任巧云;罗建勋;;青海血蜱cDNA表达文库的构建和免疫原基因的筛选、克隆与表达[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第五次代表大会暨第八次学术研讨会论文集[C];2004年
8 林青;才学鹏;窦永喜;翟军军;闫鸿斌;张彦明;田广孚;景志忠;;柔嫩艾美耳球虫子孢子cDNA表达文库的构建及其基因的克隆与鉴定[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第九次学术研讨会论文摘要集[C];2006年
9 王秦秦;;肺癌相关蛋白N35的cDNA克隆初步分析[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
10 刘昀;孙秀珍;张王刚;李唯;冯向莉;徐晶;;霜天蛾主要变应原的克隆和筛选及序列分析[A];中华医学会第五次全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第一次大会论文汇编[C];2006年
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10 张霞;昆虫中肠围食膜靶标蛋白分离鉴定的研究[D];河北农业大学;2008年
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1 赵海平;青海血蜱幼蜱cDNA表达文库的构建及其免疫学筛选[D];中国农业科学院;2007年
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3 李知新;长角血蜱生物学特性研究及免疫原基因的筛选[D];甘肃农业大学;2007年
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6 谢俊仁;长角血蜱雌蜱唾液腺cDNA文库的构建及免疫学筛选[D];甘肃农业大学;2007年
7 赵金国;小亚璃眼蜱唾液腺cDNA表达文库构建及4D8基因的克隆与原核表达[D];甘肃农业大学;2008年
8 李文卉;微小牛蜱Bm86基因的克隆、真核表达及cDNA文库的构建[D];甘肃农业大学;2005年
9 郑薇;弓形虫ME49株速殖子cDNA表达文库的构建与免疫学筛选[D];吉林大学;2012年
10 杨满;系统性红斑狼疮血管炎相关自身抗原的血清学筛选[D];四川大学;2006年
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