收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

硝唑尼特在山羊体内的药物代谢动力学及毒理学研究

赵占中  
【摘要】: 硝唑尼特(nitazoxanide, NTZ)是一种硝基噻唑苯胺类化合物,具有广谱抗微生物活性,对寄生虫,细菌以及病毒有效。体内活性与其脱乙酰基衍生物替唑尼特(tizoxanide, T)有关,具体包括细胞内外的原虫,蠕虫,需氧与厌氧菌,以及病毒。因此,进行硝唑尼特的药理学与毒理学研究将对其进一步开发及应用会产生重要的作用。 我们首先建立了一种用于山羊粪便中硝唑尼特代谢物鉴定的敏感、特异的液相色谱电喷雾串联质谱(liquid chromatography–electrospray ionization tandem mass spectrometry, LC–ESI–MS–MS)方法,并且采用了ESI阴离子模式。样品经前处理后注入XTerra MS C8柱,试验过程中使用的流动相为乙腈(acetonitrile)与10 mM乙酸铵(ammonium acetate),以0.2 ml/min的流速进行线性梯度洗脱(linear gradient elution),随后进行MS–MS检测。代谢物鉴定以及结构解析通过比较原药或其它可用标准的保留时间(retention times, Rt),全扫描,子离子扫描,母离子扫描与中性丢失扫描的MS–MS质谱图来完成。山羊按200 mg/kg的剂量经口给予硝唑尼特后,在其粪便中发现原药(nitazoxanide)及其脱乙酰基代谢物(替唑尼特,Tizoxanide)。给药96 h后,在山羊粪便中仍能检测到替唑尼特。 在上述方法的基础上,建立了一种用于山羊血浆及尿液中硝唑尼特代谢物鉴定的快速,敏感与特异的液相色谱–串联质谱方法。纯化的样品使用XTerra MS C8柱进行分离,流动相为乙腈与10 mM乙酸铵(pH 2.5),采用梯度洗脱的方式,样品检测使用MS–MS。代谢物鉴定以及结构解析通过比较原药或其它可用标准的保留时间(retention times, Rt),全扫描,子离子扫描,母离子扫描与中性丢失扫描的MS–MS质谱图来完成。山羊按200 mg/kg的剂量经口给予硝唑尼特后,在其血浆及尿液中发现并鉴定了四种代谢[替唑尼特(tizoxanide),替唑尼特葡萄糖醛酸化物(tizoxanide glucuronide),替唑尼特硫酸酯化物(tizoxanide sulfate)以及羟基替唑尼特硫酸酯化物(hydroxylated tizoxanide sulfate)]。此外,我们首次提出了硝唑尼特在山羊体内可能的代谢途径。研究结果提示,建立的该方法简单,可靠及敏感,证明适合于硝唑尼特活性代谢物的检测及其结构鉴定,从而有助于更好地理解硝唑尼特的体内代谢。 建立山羊血浆中测定硝唑尼活性代谢物替唑尼特的简单且特异的HPLC–UV方法。血浆样品用乙腈去蛋白提取,选用Diamonsil C18 (250 mm×4.6 mm, 5μm)为反相色谱柱,乙腈–0.02 mol/l KH2PO4(65:35, v/v)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长360 nm。替唑尼特线性范围为0.2–10μg/ml,检测限为0.02μg/ml (S/N3),定量限为0.04μg/ml (S/N6)。样品平均回收率在94.5%以上,日内、日间精密度的RSD均小于10%,准确率的相对误差在1.42到9.05%之间。其它物质干扰替唑尼特的检测。确证方法成功应用于山羊经口给予硝唑尼特后,其血浆中替唑尼特的药物动力学研究。 研究了硝唑尼特活性代谢物替唑尼特在山羊体内的药物代谢物动力学及其在山羊血浆、白蛋白(albumin)与α-1-酸-糖蛋白(α-1-acid-glycoprotein)溶液中的结合能力。使用HPLC–UV方法分析血浆及蛋白质结合样品,检测波长为360 nm,,采用3P97药物动力学程序软件处理药-时数据。山羊血浆中替唑尼特的浓度可以检测到24 h。按200 mg/kg的剂量经口给予山羊硝唑尼特胶囊后,其血浆中替唑尼特浓度–时间数据符合符合一室开放模型(one-compartment open model),并且存在一级吸收(first order absorption)。主要药动学参数分别为:t1/2Ka 2.51±0.41 h, t1/2Ke 3.47±0.32 h, Tmax 4.90±0.13 h, Cmax 2.56±0.25μg/ ml, AUC 27.40±1.54 (μg/ml)×h, V/F(c) 30.17±2.17 l/kg和CL(s) 7.34±1.21 l/(kg×h)。血浆样品β-葡萄糖苷酸酶(β-glucuronidase)酶解后,t1/2ke, Cmax, Tmax, AUC增加,而V/F(c)与CL(s)却减小。体外蛋白质结合能力研究结果表明,4μg/ml的替唑尼特在山羊血浆与白蛋白(albumin)溶液中的结合率可达95%以上,而在α-1-酸-糖蛋白溶液中的结合率仅为49%。这一结果表明,替唑尼特以其酸性特征,同α-1-酸-糖蛋白相比,可能与白蛋白具有较强的结合能力。 最后,进行了硝唑尼特体内外毒理学以及潜在作用机制的研究。按照200 mg/kg的剂量给口给予山羊硝唑尼特。通过11项尿常规分析与心脏,肝脏,脾脏,肺脏,肾脏,膀胱及胆囊的组织学检查评价了硝唑尼特的系统毒性。结果证实,硝唑尼特无毒,尿常规分析的11项指标正常,而且无器官组织病变出现。MTT试验证实,低于10μg/ml的硝唑尼特对Chang氏肝细胞与Vero细胞的生长无影响,而对两种细胞的敏感性不同。然而,当浓度为10~100μg/ml时,对两种细胞的生长均有量效相关的抑制作用,且对Chang氏肝细胞与Vero细胞的IC50分别为37μg/ml与41μg/ml。同空白细胞对照相比,药物处理特别是较高剂量的硝唑尼特作用可以使293T细胞数量减少,皱缩明显,凋亡增多。用Western blot进一步分析,结果发现,硝唑尼特可以促进p53表达,且作用剂量为10μg/ml时不影响细胞周期。总之,硝唑尼特具有良好的耐受性,而且能促进p53表达,从而导致细胞凋亡。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 钟景林,胡中和;开展临床药学工作、促进合理用药[J];中国冶金工业医学杂志;1991年04期
2 吴振英!101149北京,高云颂!101149北京;药物代谢动力学及常用参数简介[J];人民军医;1999年01期
3 徐静,周甘平,米健;A型行为对西地那非药物代谢动力学的影响[J];中国行为医学科学;2002年06期
4 ;心血管系统药物[J];国外科技资料目录(医药卫生);2002年01期
5 张晓丽;刘洪海;杜平;张希波;;藏红花酸的研究进展[J];西北药学杂志;2008年06期
6 杨婉花;陈冰;李娟;原永芳;;丙泊酚药物代谢动力学研究概述[J];中国药师;2008年10期
7 王丽萍;郭栋;王果;周宏灏;;中药绿原酸的研究进展[J];时珍国医国药;2011年04期
8 姜朝云;邹清淼;曾俊;李文钧;;药物代谢动力学计算程序(PCP)软件的研制及应用[J];中国现代应用药学;1991年03期
9 胡晓渝,杨雄志;酮康唑对沙奎那韦体外代谢和药物代谢动力学的影响[J];安徽医药;2005年11期
10 徐建平;;妥布霉素经呼吸机进入中老年患者体内后的药物代谢动力学及肺内分布[J];中国老年学杂志;2007年22期
11 陈卓明;黄祖栋;黄培莲;;脑转移瘤鞘内化疗探讨[J];中国实用医药;2008年13期
12 易成文;朱培霞;;中药药物代谢动力学研究现状及问题分析[J];中国药物与临床;2009年08期
13 张瑞;汪电雷;张弦;黄鹏;刘耀武;栗进才;章婷;;高效液相色谱法测定大鼠血浆中白藜芦醇含量及其药物代谢动力学[J];安徽中医学院学报;2010年05期
14 李婧;张丹;;两种紫杉烷类的药物代谢动力学的比较[J];华西药学杂志;2011年01期
15 Fung HL ,陈锺瑛;药物代谢动力学与药物设计[J];国外医学.药学分册;1981年01期
16 高晓彦,陈济民;药物代谢动力学的平均滞留时间(Mean Residence Time MRT)的新概念以及体内代谢物MRT的简便计算方法[J];沈阳药科大学学报;1989年04期
17 陈鸿基;王章敬;邬大元;洪善祥;曾志刚;;改进分光光度法测定血浆中依地酸二钠含量[J];福建医科大学学报;1991年01期
18 宋建国,桂常青,黄志力;苯巴比妥对小鼠的敏感性及药物代谢动力学的昼夜差异[J];中国药理学与毒理学杂志;1992年02期
19 童荣生,叶松柏,陆彬;超氧化物歧化酶脂质体的药物代谢动力学及抗炎作用[J];中国药理学与毒理学杂志;1997年03期
20 王睿;;抗菌药物PK/PD与给药方案优化[J];中国药物应用与监测;2004年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈汇;;转化医学在药物代谢动力学研究中的应用与思考[A];中国药理学会第十一次全国学术会议专刊[C];2011年
2 严其高;黄正明;;中药新药药物代谢动力学的研究进展[A];中国成人医药教育论坛(4)[C];2011年
3 张旭辉;孙永海;张宏;;吗啡PLGA微球的药物代谢动力学研究[A];中国(第七届)肿瘤微创治疗学术大会暨世界影像导引下肿瘤微创治疗学会成立筹备大会论文汇编[C];2011年
4 师少军;刘亚妮;吴健鸿;钟大放;曾繁典;;进口盐酸氟西汀分散片在中国健康人体的药物代谢动力学研究[A];第十二次全国临床药理学学术会议会议论文集[C];2010年
5 龙健晶;孙永海;张宏;;吗啡明胶微球的药物代谢动力学研究[A];中国(第七届)肿瘤微创治疗学术大会暨世界影像导引下肿瘤微创治疗学会成立筹备大会论文汇编[C];2011年
6 包尚联;徐萍芳;;基于MRI的药物代谢动力学方法用于新药研发和药效评估的研究进展[A];中国仪器仪表学会医疗仪器分会第四次全国会员代表大会暨2009年学术年会论文集[C];2009年
7 王广基;;药物代谢动力学在新药设计和研究中的作用[A];中国药理学会第九届制药工业药理学术会议论文摘要汇编[C];2000年
8 张可煜;郑姣妹;王权;薛飞群;;免疫抑制小鼠模型中硝唑尼特抗隐孢子虫活性[A];中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第九次学术讨论会论文与摘要集[C];2006年
9 何培新;张长铠;;裸盖菇素药理学及应用研究概况[A];第八届海峡两岸菌物学学术研讨会论文集[C];2007年
10 张静波;吴光红;孟勇;徐幸莲;;不同给药方式下恩诺沙星在中华绒螯蟹体内代谢动力学研究[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵占中;硝唑尼特在山羊体内的药物代谢动力学及毒理学研究[D];中国农业科学院;2009年
2 周淦;Ⅰ类新药艾普拉唑的临床药物代谢动力学研究[D];中南大学;2010年
3 周淦;I类新药艾普拉唑的临床药物代谢动力学研究[D];中南大学;2010年
4 王晓丹;花旗松素和落新妇苷体外转运和大鼠体内药物代谢动力学研究[D];浙江大学;2009年
5 虞建刚;CYP2D6~*10基因多态性对曲马多代谢和术后镇痛的影响[D];中国医科大学;2006年
6 王向军;十取代芦丁硫酸钠的质量控制和药物代谢动力学研究[D];浙江大学;2006年
7 安潇;基于微透析技术的支气管动脉灌注化疗的药物代谢动力学研究[D];第二军医大学;2007年
8 赵芸慧;CYP2C9对氯胺酮代谢的催化作用及基因多态性对其药代动力学的影响[D];中国医科大学;2007年
9 王春英;何首乌有效成分二苯乙烯苷的降血脂作用与药物代谢动力学研究[D];河北医科大学;2008年
10 刘丽;人工免疫网络研究及应用[D];江南大学;2008年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 吕斌;硝唑尼特的合成及结晶工艺研究[D];河北科技大学;2011年
2 张晗;硝唑尼特衍生物的合成及其抗菌定量构效关系研究[D];中国农业科学院;2012年
3 袁国锋;氟苯尼考在草鱼体内的药物代谢动力学研究[D];苏州大学;2012年
4 童心玥;福安特动物药物代谢动力学及联合用药药效学研究[D];华中科技大学;2010年
5 于晓蕾;米尔贝肟片在犬血浆中的药物代谢动力学研究[D];东北农业大学;2011年
6 张锋;重组人内抑素在猕猴体内药物代谢动力学研究[D];安徽医科大学;2011年
7 张瑞岩;硝唑尼特对杜氏利什曼原虫的药效学及一般毒性研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2010年
8 陈星星;氟苯尼考在欧洲鳗鲡体内的药物代谢动力学研究[D];福建农林大学;2006年
9 崔鹏博;奶牛皮肤真菌病病原分离及抗真菌药物的筛选[D];东北农业大学;2008年
10 张坤;地塞米松眼局部给药在兔眼房水和玻璃体中的药物代谢动力学研究[D];吉林大学;2005年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 黄晓燕 译;硝唑尼特可改善慢性丙肝的病毒学应答[N];中国医药报;2009年
2 记者 路平;白云山和黄中药引院士加盟[N];广东科技报;2009年
3 王欣子;白云山迎来首位院士[N];中国证券报;2009年
4 ;维生素C可以提高免疫力吗[N];华夏时报;2004年
5 吕工;应重指导轻参与[N];医药经济报;2002年
6 张仲源;对“外治之药,亦即内治之药”的质疑[N];中国中医药报;2005年
7 曲立新 邹祥海;浅谈鸡的合理用药[N];中国畜牧报;2004年
8 张原;建设国家生物医药产业示范城市[N];人民政协报;2010年
9 王功立;药师应成为“全科”人才[N];中国医药报;2005年
10 肖 平;用药中的主要问题[N];大众科技报;2003年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978