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《中国农业科学院》 2009年
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西藏米拉山高寒草甸土壤微生物多样性研究

芦晓飞  
【摘要】: 青藏高原是世界上海拔最高的高原,其平均海拔在4 000米以上,高寒、缺氧、降水少、日照长、辐射强,独特的自然地理环境使其富含特殊的微生物资源。但是由于全球气候的变化导致青藏高原气温不断升高,加之人类过度放牧的影响使得高寒草甸逐年退化,微生物生态系统被严重破坏。此外,由于能够利用培养技术获得的微生物种类不足自然环境中存在的1%,目前对该类型土壤的微生物多样性和资源调查存在很大的不足,阻碍了这些特殊微生物资源的开发应用。提取环境微生物宏基因组DNA及构建文库是研究未培养微生物的重要方法。因此,本研究利用宏基因组学技术首次对西藏米拉山高寒草甸土壤的微生物群落结构、功能微生物及微生物基因资源多样性进行了系统的研究,主要结果与结论如下: (1)针对高寒草甸土壤中腐植酸和有机质含量高、DNA提取非常困难的特点,首次选择和优化了适合该类型土壤样品不同分子量DNA提取及纯化的技术路线。通过对比不同DNA提取和纯化方法的研究表明:直接法提取的DNA片段小、杂质含量高,但是由于其提取效率高,结合操作简便的柱纯化方法,适合于微生物多样性研究;结合低速离心和Nycodenz密度梯度离心先分离出微生物细胞的间接法虽然DNA产率降低,但是纯度高、片段长,结合电泳纯化法更适合于构建大插入片段文库。 (2)分别以pUC19质粒载体和pCC2FOS?载体构建了西藏米拉山高寒草甸土壤微生物宏基因组文库,为进一步开发利用其微生物资源奠定了基础。其中两个pUC19质粒文库(ZMp-1和ZMp-2)的平均插入片段长度分别为1 kb和4 kb;Fosmid文库(ZMf-vsmfba)包含30 624个克隆,平均插入片段为35 kb左右,库容量超过1 Gb;部分文库克隆末端测序结果表明,尽管构建两种文库的DNA提取和纯化方法不同,但是文库插入片段序列多样性丰富,都含有大量的未知微生物物种。 (3)在直接提取宏基因组DNA的基础上,采用16S rRNA基因克隆文库技术研究表明:西藏米拉山高寒草甸土壤中细菌和古菌多样性具有一定特殊性;但是由于受到气候变化和人类活动的影响,退化草甸土壤的微生物群落结构发生了改变。古菌文库中与GenBank中序列相似性很低的未分类古菌类型占有很大比例,但是古菌类型非常单一,仅发现了嗜泉古菌界(Crenarchaeota)的未分类热变形菌纲门(Unclassified_Thermoprotei),其余为未分类古菌(Unclassified_Archaea),没有发现广域古菌界(Euryarchaeota)克隆;相比之下细菌类型丰富,基本涵盖了大部分土壤细菌基本类群。 (4)由于草甸的退化使储藏在土壤中的大量碳氮加速释放将造成严重的环境问题,本研究进一步以氨单加氧酶(ammonia monooxygenase, amoA)基因为分子标记比较了不同退化程度草甸土壤样品中的氨氧化微生物(ammonia-oxidizing microorganisms, AOM)多样性发现:氨氧化古菌(ammonia-oxidizing archaea, AOA)在伴随草甸退化的硝化作用增强过程中的作用高于氨氧化细菌(ammonia-oxidizing bacteria, AOB),并且退化草甸土壤的硝化作用模式类似于温室保护地土壤。 (5)根据已报道许多微生物能够分泌胞外蛋白酶降解线虫体壁及卵鞘的原理,新型蛋白酶的开发和利用在植物病原线虫的生物防治中具有重要作用。本研究在西藏高寒草甸土壤微生物的宏基因组DNA和文库的基础上,以蛋白酶为靶标对其微生物基因资源进行了调查,结果根据同源克隆方法得到了75条新丝氨酸蛋白酶基因片段;通过pUC19质粒文库克隆末端测序分析得到了7条新的类蛋白酶基因片段;利用Fosmid文库的大插入片段表达特性筛选到了2个新蛋白酶基因序列,表明西藏高寒草甸中蕴含着丰富的可利用新基因资源,具有极高开发利用价值。 综合以上结果,本研究表明西藏高寒草甸土壤微生物群落的组成具有特殊性,其中有大量的未知微生物及其基因信息有待挖掘和开发利用。但是由受到环境和人为活动的影响,高寒草甸的退化导致微生物群落为适应环境压力而通过改变其活性、生物量和结构来进行调整。无论是从资源角度还是环境角度来看,对西藏高寒草甸的保护及恢复都至关重要。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S812.2

【引证文献】
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1 罗建峰;曲东;;西藏高原土壤中可培养细菌群落结构分析[J];水土保持学报;2013年02期
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1 罗坤;土壤宏基因组文库PKS基因的筛选及其代谢物杀线虫活性测定[D];湖南农业大学;2010年
2 刘天增;陇东典型草原土壤硝化微生物及硝化作用对绵羊放牧强度的响应[D];兰州大学;2012年
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1 朱嘉睿;疏勒河上游不同生境土壤中原核微生物群落结构多样性研究[D];兰州大学;2012年
【参考文献】
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1 康兴成;青藏高原地区近40年来气候变化的特征[J];冰川冻土;1996年S1期
2 王根绪,程国栋,沈永平;青藏高原草地土壤有机碳库及其全球意义[J];冰川冻土;2002年06期
3 任书杰;曹明奎;陶波;李克让;;陆地生态系统氮状态对碳循环的限制作用研究进展[J];地理科学进展;2006年04期
4 王绍强,周成虎;中国陆地土壤有机碳库的估算[J];地理研究;1999年04期
5 黄金玲;刘志明;刘纪霜;陆秀红;潘萍红;;植物寄生线虫生防细菌的研究进展[J];广西农业生物科学;2008年03期
6 洪义国,孙谧,郑家声,王跃军,张云波,郝建华,王瑞娟,向悟生;黄海黄杆菌YS-9412-130低温碱性蛋白酶的基因克隆和序列测定[J];海洋水产研究;2000年04期
7 曾胤新;俞勇;李会荣;陈波;;北极海洋细菌BSw20353的胞外蛋白酶性质[J];极地研究;2006年03期
8 丁洪,王跃思,项虹艳,李卫华;福建省几种主要红壤性水稻土的硝化与反硝化活性[J];农业环境科学学报;2003年06期
9 赵勇,周志华,李武,刘彬彬,潘迎捷,赵立平;土壤微生物分子生态学研究中总DNA的提取[J];农业环境科学学报;2005年05期
10 王慧春;赵修堂;王启兰;;青海高寒草甸不同植被土壤微生物生物量的测定[J];青海草业;2006年04期
【共引文献】
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1 吴利;余育和;冯伟松;;PCR-DGGE技术在环境微型生物群落研究中的应用[J];合肥师范学院学报;2010年06期
2 张立宾;刘玉新;张明兴;;星星草的耐盐能力及其对滨海盐渍土的改良效果研究[J];山东农业科学;2006年04期
3 赵征宇;蔡葵;赵明;;畜禽有机肥料对土壤有效铜锌铁锰含量的影响[J];山东农业科学;2006年05期
4 郑福丽;刘兆辉;张文君;江丽华;王梅;林海涛;;不同钾肥用量对玉米产量和土壤养分的影响[J];山东农业科学;2006年06期
5 林海涛;江丽华;刘兆辉;宋效宗;郑福丽;王梅;张文君;;施用硫酸钾镁对苹果产量、品质和叶片矿质营养的影响[J];山东农业科学;2007年06期
6 赵明;赵征宇;蔡葵;于秋华;王文娇;;有机肥料对土壤可溶性氮素变化的影响及肥效研究[J];山东农业科学;2008年01期
7 李祥云;宋朝玉;王瑞英;王圣健;高峻岭;朱丕生;;畜禽粪肥不同用量对青花菜生长和土壤肥力的影响[J];山东农业科学;2008年03期
8 吴焕涛;魏珉;杨凤娟;王秀峰;;轮作和休茬对日光温室黄瓜连作土壤的改良效果[J];山东农业科学;2008年05期
9 赵明;王文娇;蔡葵;赵征宇;于秋华;;崂山绿茶水溶性氟含量及其影响因素分析[J];山东农业科学;2008年09期
10 张英鹏;李彦;张玉凤;董亮;孙明;;水溶性螯合肥对章丘大葱产量及养分含量的影响[J];山东农业科学;2009年04期
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1 李孝良;李健姣;吕宝磊;陈效民;王晓洋;詹国飞;;肥料与石膏配施对滨海盐土玉米生理活性的影响[A];土肥水资源高效利用与农业面源污染防控技术研讨会论文集[C];2011年
2 李敏;叶舒娅;刘枫;袁嫚嫚;;包膜控释尿素和普通尿素配施对油菜产量和氮肥利用率的影响[A];土肥水资源高效利用与农业面源污染防控技术研讨会论文集[C];2011年
3 袁嫚嫚;叶舒娅;刘枫;李敏;吴学忠;;不同控释氮肥对玉米产量和氮肥利用率的影响[A];土肥水资源高效利用与农业面源污染防控技术研讨会论文集[C];2011年
4 蒋光月;郭熙盛;朱宏斌;何传龙;;合肥地区大棚土壤7种重金属相关环境质量评价[A];土肥水资源高效利用与农业面源污染防控技术研讨会论文集[C];2011年
5 秦小光;宁波;殷志强;穆燕;;末次间冰期以来渭南黄土地区土壤有机碳碳库的演变[A];中国科学院地质与地球物理研究所第11届(2011年度)学术年会论文集(中)[C];2012年
6 林琳;曹宏斌;李玉平;;厌氧氨氧化反应器启动研究进展[A];2011中国环境科学学会学术年会论文集(第一卷)[C];2011年
7 文方;姚娜;朱菲菲;周友亚;谷庆宝;李发生;侯红;;铅在我国3种自然土壤中的含量及化学形态分布特征研究[A];2011中国环境科学学会学术年会论文集(第二卷)[C];2011年
8 贾博;张后虎;张毅;王伟;吴睿;张维佳;;利用畜禽废水中氨氮驯化矿化垃圾填料氧化填埋场CH_4的研究[A];矿化垃圾资源化利用与填埋场绿化技术研讨会论文集[C];2011年
9 李欣龙;张敏;段霞瑜;周益林;;丝状真菌遗传转化系统的研究进展[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
10 马鸣超;姜昕;李俊;何江涛;;人工快速渗滤系统中硝化菌群脱氮作用解析[A];微生物与人类健康科技论坛论文汇编[C];2009年
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1 王延平;连作杨树人工林地力衰退研究:酚酸的累积及其化感效应[D];山东农业大学;2010年
2 鱼小军;牦牛粪维系青藏高原高寒草地健康的作用机制[D];甘肃农业大学;2010年
3 王齐;中水灌溉对城市绿地生态系统的影响及安全性评价[D];甘肃农业大学;2010年
4 李振东;东祁连山高寒草地优势植物内生细菌多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
5 张俊忠;东祁连山高寒草地土壤真菌多样性研究[D];甘肃农业大学;2010年
6 焦婷;温性荒漠草原放牧利用退化草地生态系统营养动态研究[D];甘肃农业大学;2010年
7 刘冬雁;川西高原甘孜黄土记录的早更新世晚期以来的古气候变化[D];中国海洋大学;2009年
8 李文金;亚高寒草甸弃耕地恢复演替过程及其生态学机制研究[D];兰州大学;2010年
9 侯钰荣;伊犁绢蒿生理生态适应性的研究[D];新疆农业大学;2010年
10 郭艳平;鼠李糖脂作用下17α-炔雌醇在水/底泥中的迁移转化规律及生物有效性[D];华南理工大学;2010年
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1 翟静雅;猪粪农用对土壤—小麦系统中镉迁移的影响[D];华中农业大学;2010年
2 杨莹莹;不同修复措施下侵蚀红壤的团聚体稳定性与肥力特点[D];华中农业大学;2010年
3 方治伟;洪湖沉积物微生物垂直分布及其对环境变化的响应[D];华中农业大学;2010年
4 胡雪;水稻根际促生菌的分离鉴定及其对水稻作用效果的研究[D];华中农业大学;2010年
5 闫鸿媛;长期施肥下我国典型土壤粮食作物氮肥利用率时空演变特征[D];华中农业大学;2010年
6 夏颖;不同棉花基因型钾吸收和利用效率差异的机理研究[D];华中农业大学;2010年
7 通乐嘎;免耕稻田磷素动态及组分特征的研究[D];华中农业大学;2010年
8 田晓堃;三峡库区两种森林中土壤细菌与环境因子的空间分布关系[D];华中农业大学;2010年
9 冯晓丹;猪链球菌2型强毒株05ZYH33二元信号转导系统CiaRH生物学功能研究[D];南京医科大学;2009年
10 任立研;大环江沿岸典型污染区土壤改良技术及对芥菜品质的影响研究[D];广西师范学院;2010年
【同被引文献】
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1 陈伟;张威;李师翁;王鹭;贠汉柏;伍修锟;胡平;杨轩;冯虎元;刘光琇;;青藏高原不同类型草地生态系统下土壤可培养细菌数量及多样性分布特征研究[J];冰川冻土;2011年06期
2 白可喻,赵萌莉,卫智军,韩国栋,许志信;刈割对荒漠草原几种牧草贮藏碳水化合物的影响[J];草地学报;1996年02期
3 汪诗平,王艳芬,李永宏,陈佐忠;不同放牧率对草原牧草再生性能和地上净初级生产力的影响[J];草地学报;1998年04期
4 赵吉;不同放牧率对冷蒿小禾草草原土壤微生物数量和生物量的影响[J];草地学报;1999年03期
5 张蕴薇,韩建国,李志强;放牧强度对土壤物理性质的影响[J];草地学报;2002年01期
6 阿依丁;冯克明;双胡尔;任继生;雷特生;穆合塔尔;张学洲;;天山北坡高寒草甸和山地草原放牧强度的研究[J];草业科学;1996年03期
7 王明君;韩国栋;赵萌莉;陈海军;王珍;郝晓莉;薄涛;;草甸草原不同放牧强度对土壤有机碳含量的影响[J];草业科学;2007年10期
8 马永年;;环县畜牧业生产现状与发展建设议[J];草业科学;2008年05期
9 尹燕亭;侯向阳;运向军;;气候变化对内蒙古草原生态系统影响的研究进展[J];草业科学;2011年06期
10 尚占环;丁玲玲;龙瑞军;马玉寿;;江河源区退化高寒草地土壤微生物与地上植被及土壤环境的关系[J];草业学报;2007年01期
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1 易维洁;碳源对水稻土中铁还原特征和铁还原菌多样性的影响[D];西北农林科技大学;2011年
2 陈秀蓉;陇东典型草原草地退化与微生物相关性及其优势菌系统发育分析与鉴定[D];甘肃农业大学;2003年
3 张成霞;放牧对陇东黄土高原天然草地土壤理化特性及微生物的影响[D];兰州大学;2008年
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1 郭慧娟;培养与非培养方法对青藏高原土壤细菌多样性的研究[D];河北农业大学;2011年
2 刘芳;草原湿地土壤细菌和氨氧化细菌群落结构分析[D];内蒙古大学;2011年
3 邹雨坤;羊草草原利用方式对土壤微生物多样性及群落结构的影响[D];甘肃农业大学;2011年
4 茆振川;防治根结线虫的原核生防菌的筛选及作用[D];西北农林科技大学;2004年
5 乔鹏云;放牧对陇东半干旱草地土壤微生物的影响[D];兰州大学;2008年
6 宁佳绪;放牧选择下丛枝菌根真菌多样性的初步研究[D];东北师范大学;2009年
7 张永生;放牧对贝加尔针茅草原土壤理化性状及细菌多样性的影响[D];中国农业科学院;2010年
【二级引证文献】
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1 毛文梁;台喜生;伍修锟;刘光琇;陈拓;陈年来;张威;王筠;龙昊知;张宝贵;张勇;高海宁;;黑河上游祁连山区土壤可培养细菌群落生境的垂直分异特征[J];冰川冻土;2013年02期
【二级参考文献】
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1 朱林,张春兰,沈其荣;施用稻草等有机物料对黄瓜连作土壤pH、EC值和微生物的影响[J];安徽农业大学学报;2001年04期
2 康兴成;青藏高原地区近40年来气候变化的特征[J];冰川冻土;1996年S1期
3 王根绪,沈永平,程国栋;黄河源区生态环境变化与成因分析[J];冰川冻土;2000年03期
4 林清,金会军,程国栋,李宁;青藏高原五道梁冻土活动层表面二氧化碳和甲烷的排放[J];冰川冻土;1996年04期
5 吴凤芝,王伟,栾非时;土壤灭菌对大棚连作黄瓜生长发育影响[J];北方园艺;1999年05期
6 王启兰,姜文波;青藏高原金露梅灌丛与矮嵩草草甸枯枝落叶的分解作用[J];草地学报;2001年02期
7 王长庭;龙瑞军;王启基;景增春;丁路明;;不同类型高寒草地群落物种特征和均匀度的重要性[J];草地学报;2005年04期
8 杨允菲;葛滢;;纤毛鹅观草种群籽粒产量性状相关因素的多元分析[J];草业科学;1990年02期
9 陈秀蓉,南志标;细菌多样性及其在农业生态系统中的作用[J];草业科学;2002年09期
10 安登第,何毅,韩爱萍,王晶;不同利用方式对亚高山草甸草地土壤性质和微生物的影响[J];草业科学;2003年06期
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1 钟文辉,蔡祖聪;土壤管理措施及环境因素对土壤微生物多样性影响研究进展[J];生物多样性;2004年04期
2 罗青;;PCR-DGGE技术在土壤微生物多态性研究中的应用[J];信阳农业高等专科学校学报;2006年03期
3 王彬;;土壤微生物对陆地生态系统植物生产力的影响[J];知识经济;2008年07期
4 鲁海燕;徐艾诗;曹靖;;微生物多样性对植物群落影响的研究进展[J];长春理工大学学报(自然科学版);2010年03期
5 罗海峰,齐鸿雁,薛凯,张洪勋;PCR-DGGE技术在农田土壤微生物多样性研究中的应用[J];生态学报;2003年08期
6 黄进勇,李春霞;土壤微生物多样性的主要影响因子及其效应[J];河南科技大学学报(农学版);2004年04期
7 袁三青;薛燕芬;高鹏;汪卫东;马延和;李希明;许国旺;;T-RFLP技术分析油藏微生物多样性[J];微生物学报;2007年02期
8 石兆勇;王发园;;农药污染对微生物多样性的影响[J];安徽农业科学;2007年19期
9 陈敏玲;李伟华;陈章和;;不同层面上微生物多样性研究方法[J];生态学报;2008年12期
10 高启禹;徐光翠;李小英;;变性梯度凝胶电泳(DGGE)在微生物多样性中的研究[J];生物学杂志;2009年05期
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1 黄进勇;周伟;;农田土壤微生物多样性的影响因素及效应[A];生态学与全面·协调·可持续发展——中国生态学会第七届全国会员代表大会论文摘要荟萃[C];2004年
2 吴银宝;史金才;蓝小花;陈文燕;;猪粪和土壤样品中微生物DNA提取方法的比较[A];良好农业规范与畜牧业健康发展——中国畜牧兽医学会家畜生态学分会第六届理事会暨学术研讨会论文集[C];2006年
3 杨子山;;Bt棉花对土壤微生物的安全性评价进展[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
4 郑雪芳;刘波;蓝江林;朱育菁;车建美;苏明星;;植物疫苗植物疫苗无致病力青枯雷尔氏菌胁迫对烟草根系土壤微生物脂肪酸生态学特性的影响[A];第三届全国微生物资源学术暨国家微生物资源平台运行服务研讨会会议论文摘要集[C];2011年
5 宗美娟;张明才;宋百敏;王仁卿;;黄河三角洲柽柳群落土壤微生物多样性[A];生物多样性保护与区域可持续发展——第四届全国生物多样性保护与持续利用研讨会论文集[C];2000年
6 周永章;杨志军;李文;张澄博;何俊国;付伟;杨小强;石贵勇;杨海生;;西藏硅质岩的初步认识[A];中国矿物岩石地球化学学会第九届学术年会论文摘要集[C];2003年
7 刘登忠;陶晓风;朱利东;马润则;;西藏措勤中新生代盆地演化[A];青藏高原及邻区地质与资源环境学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
8 陈晓阳;;西藏林木引种三十余年[A];面向21世纪的中国林木遗传育种——中国林学会林木遗传育种第四届年会文集[C];1997年
9 张超;黄清麟;朱雪林;张晓红;;基于空间分布特征的西藏灌木林遥感分类技术研究[A];第二届中国林业学术大会——S3 森林经理与林业信息化的新使命论文集[C];2009年
10 付德宽;;以国家实施西部大开发战略为契机 实现西藏水利跨越式发展[A];西部大开发 科教先行与可持续发展——中国科协2000年学术年会文集[C];2000年
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1 本报记者 万芳;用胸膛行走色季拉山[N];中国水运报;2005年
2 李继;西藏去年土地出让金近两亿元[N];中国国土资源报;2005年
3 记者 岳富荣;西藏废止一批规章文件[N];人民日报;2000年
4 本报记者 何勇 郑少忠 徐锦庚;叫我怎能不歌唱[N];人民日报;2005年
5 记者王恒涛;西藏野生动物数量增长惊人[N];人民日报海外版;2003年
6 帕巴次诚 作者系西藏自治区交通厅常委书记;从实际出发 加快西藏交通建设[N];西部时报;2005年
7 记者 徐锦庚 郑少忠;西藏基础设施绘出最美图画[N];人民日报海外版;2006年
8 罗先林;西藏电信与西藏农行签约合作[N];人民邮电;2006年
9 杨永猛;西藏移动通信业发展迅速[N];西藏日报;2006年
10 周志强 本报记者 文启润;扎西平措:用部队战斗力说话[N];人民武警;2007年
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1 芦晓飞;西藏米拉山高寒草甸土壤微生物多样性研究[D];中国农业科学院;2009年
2 阎冰;红树林土壤细菌和古菌的16S rDNA多样性研究[D];华中农业大学;2007年
3 金裕华;武夷山不同海拔土壤微生物多样性的变化特征[D];南京林业大学;2012年
4 姜海燕;大兴安岭兴安落叶松林土壤微生物与土壤酶活性研究[D];内蒙古农业大学;2010年
5 孙镇平;清代西藏法制研究[D];中国政法大学;2000年
6 王立艳;民国西藏法制研究[D];中国政法大学;2002年
7 周娟;山东省典型农产品基地土壤微生物多样性与地球化学元素关系研究[D];山东大学;2008年
8 储新民;南海海洋微生物宏基因组文库中酯酶基因的筛选与鉴定[D];中国科学技术大学;2008年
9 郭华;草萘胺对土壤环境的影响以及农药多残留分析方法研究[D];南京农业大学;2007年
10 陈继东;西藏开拓南亚市场及其特殊性研究[D];四川大学;2003年
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1 任芳菲;石油污染土壤的理化性质和微生物群落功能多样性研究[D];东北林业大学;2009年
2 卢金金;西藏职业教育现状与发展对策研究[D];天津大学;2004年
3 靖丹丹;果园套种不同牧草对土壤微生物多样性的影响[D];福建农林大学;2008年
4 徐子敏;西藏寺院宗教教育及其对现代教育的影响研究[D];苏州大学;2000年
5 高远;鄂霍次克海天然气水合物区柱状沉积物LV39-18H微生物多样性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2009年
6 包静;盐胁迫对黄瓜根系分泌物及土壤微生物的影响[D];东北农业大学;2009年
7 崔清新;论西藏史诗《格萨尔王》和其中的女性形象—森姜朱牧[D];对外经济贸易大学;2003年
8 谢红;西藏特色经济发展研究[D];天津大学;2004年
9 李爱琴;西藏乡镇企业跨越式发展面临的困境与对策研究[D];厦门大学;2009年
10 高铁山;西藏外经贸企业开展电子商务的构想[D];四川大学;2003年
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