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四环素类分子印迹聚合物的合成及其识别性能的研究

李倩  
【摘要】: 四环素类抗生素在畜禽生产中作为药物添加剂被广泛应用,其主要用于防治肠道感染和促生长。由于四环素类抗生素母体化学结构稳定,畜禽生产中所使用的四环素大部分以原药或代谢物的形式排泄到水体及土壤后不易分解,从而直接污染环境并可诱导耐药菌产生。四环素类抗生素在环境样品中以痕量存在且所处样品环境比较复杂,故建立一种专属性好且灵敏度高的痕量四环素类抗生素样品前处理方法具有重大意义。 目前,大部分国家对四环素类抗生素实施残留监控,并有大量方法应用于四环素类抗生素残留分析。现具有较高灵敏度及定量准确性的方法是色谱联用技术液相色谱-质谱联用,该方法是否能成功建立多取决于是否有恰当的样品处理方法。当前对于复杂样品中痕量四环素类抗生素的处理多选用不具特异性吸附的固相萃取(填料为C18等非特异性吸附材料)。 分子印迹(molecularly imprint)是近年来基于分子识别理论而迅速发展起来的一个新兴研究领域。由于分子印迹聚合物具有预定性,实用性及识别性等特点,基于分子印迹聚合物的分子印迹固相萃取技术(molecularly imprinted solid-phase extraction, MISPE)被广泛应用处理各种不同的实际样品。 本文以强力霉素为分子印迹模板,用沉淀聚合法合成了对四环素类抗生素(四环素,土霉素,金霉素)具有特异性吸附作用的分子印迹聚合物。用该材料填装了固相萃取小柱,并对该固相萃取小柱的最大载样量及上样条件进行了摸索与探讨。为下一步土样中四环素类抗生素的测定奠定了基础。本文主要内容如下: 一、首先概述了四环素类抗生素残留分析的现状,列举了四环素类抗生素的主要检测方法并比较了各方法的优劣。后介绍了分子印迹技术的原理,分子印迹聚合物的制备方法,分子印迹聚合物的表征手段。最后就分子印迹固相萃取技术及其应用进行了综述。 二、用沉淀聚合的方法以强力霉素为模板分子合成对四环素类抗生素(四环素,土霉素,金霉素)具有特异性识别的分子印迹聚合物。对该聚合物的合成条件进行了优化,最终确定合成条件为:1mmol(0.4809g)盐酸强力霉素,60ml乙腈,8mmol(0.68ml)MAA,16mmol(5.1ml)TRIM及AINB 45mg,通氮除氧后,60℃磁力搅拌条件下反应24小时。之后对该分子印迹聚合物进行了识别性能研究并对其物理特性进行了表征。验证表明,此聚合物对四环素类抗生素有特异性吸附作用,并具有良好的稳定性。 三、最后,我们以分子印迹聚合物作为固相萃取填料填充固相萃取小柱,考察了此固相萃取小柱的装柱条件并对其最大载样量及上样条件进行了摸索与探讨。最终得出结论,此固相萃取小柱的最大载样量为0.4mg。上样条件为:5ml甲醇活化,10ml水溶液上样,3ml的5%甲酸水溶剂淋洗,6ml的1%甲酸甲醇溶液洗脱。


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