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亚麻韧皮部特异启动子克隆与26份种质DNA指纹图谱构建

于文静  
【摘要】: 亚麻是一种重要的韧皮纤维作物,木质素对亚麻纤维的性能和品质具有较大影响。为了调控木质素合成过程中某关键酶基因的表达部位和表达量,通过基因克隆的方法找到一种韧皮部特异启动子,来调控木质素合成中某个关键酶基因。本研究的第二章根据已经报道的其他植物的韧皮部特异启动子序列,设计了特异引物,以亚麻基因组DNA为模板进行PCR扩增,其中有一对引物克隆出了符合预测片段大小的目的片段,并将克隆的目的片段与pBI121构建成含有目的启动子片段和报告基因的植物表达载体。结果如下: (1)据已报道的韧皮部特异启动子序列设计特异引物,以亚麻基因组DNA为模板进行PCR扩增,得到916bp的DNA片段,序列分析表明,片段中含有启动子的一些顺式作用元件以及与启动子的韧皮部特异表达相关的特异基序。 (2)选用BamH I和HindⅢ两个内切酶将pBI121质粒双酶切,将目的片段与pBI121质粒大片段连接,得到含有报告基因的亚麻韧皮部特异启动子的植物表达载体。 亚麻种质资源是亚麻育种和生产发展的重要物质基础,其开发鉴定和评价研究非常重要。由于用形态特征鉴别亚麻种质和鉴定纯度具有一定的局限性,因而利用分子标记对亚麻材料进行鉴定是一种快速有效的方法。本研究的第三章利用SSR、RAPD两种分子标记对亚麻26个品种进行遗传相似性分析,并建立26个亚麻种质资源的DNA指纹图谱,为亚麻种质资源鉴定研究提供依据和参考。试验结果如下: (1)试验筛选出了具有稳定多态性的15对SSR引物和32个RAPD引物,在26个亚麻品种中15对SSR引物扩增出36条多态性片段,32个RAPD引物扩增80条特异片段,多态性比率分别为18.5%和44%。 (2)据对26份亚麻种质材料的SSR、RAPD标记研究,SSR遗传相似系数变异范围在0.57~0.98之间,RAPD遗传相似性系数在0.51~0.97之间,两种分子标记的聚类分析对26个品种的分类基本一致,但由于方法不同,所得结果并不完全一样。 (3)利用15个SSR引物和7个RAPD核心引物构建了26份亚麻种质资源的DNA指纹图谱,可以鉴别供试的亚麻品种。


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