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《中国农业科学院》 2010年
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欧文氏杆菌突变体的构建及枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶基因的克隆和表达

石岩  
【摘要】: 纤维是人类生存的第二大必需物质,伴随石油、森林和土地资源的短缺以及人类生活质量的提高,开发非棉、非木纤维资源迫在眉睫。 由于生物法提取草本纤维能有效降低传统方法和常规方法对环境造成的严重污染,提高产品质量,降低生产成本,因此该研究已经在国内外广泛开展起来。 构建细菌突变体是发现新基因、分析基因功能、了解某些生物机理的一个重要途径。本研究通过转座子Mini-Tn10对迄今报道的草本纤维提取效率最高的菌株胡萝卜软腐欧文氏杆菌(Erwinia carotovora)变异菌株CXJZU-120进行随机突变,获得5523个突变体。采用非纤维素降解实效法和水解圈法等进行功能性鉴定,筛选出3个非纤维素降解活性降低或丧失的突变体,这为深入研究非纤维素降解机理,寻找与非纤维素降解相关基因和构建新一代高效菌株奠定了基础。 以可水解魔芋葡甘露聚糖的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BE-91为材料,运用PCR技术从该菌的基因组中扩增出β-甘露聚糖酶基因(β-manA)片段,经过克隆、测序、BLAST分析,证实由该DNA片段推导的编码蛋白具有β-甘露聚糖酶的保守结构域,是该家族成员,又经SDS-PAGE分析,在相对分子质量为35kD附近可见明显的蛋白表达带。将其与表达载体PET28a连接后获得的重组载体通过电击的方式转化到草本纤维提取高效菌种胡萝卜软腐欧文氏杆菌(E. carotovora)CXJZU-120中,经DNS法测定,该工程菌与出发菌株相比,β-甘露聚糖酶的活力提高了183-259%。其非纤维素物质降解的多项参数较原始菌株有明显提高。
【学位授予单位】:中国农业科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:Q78

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王立群,关凤芝,张福修,赵德宝,徐丽珍,宋宪友,果瑞平,宣世纬;亚麻微生物脱胶技术的研究──1脱胶菌株的筛选[J];东北农业大学学报;1994年02期
2 王立群,关凤芝,王玉富,张福修,乔广君,果瑞平,宣世伟;亚麻微生物脱胶技术的研究 Ⅲ.脱胶菌株适宜生长繁殖条件的测试[J];东北农业大学学报;1998年02期
3 李惠,赵明磊,尹隽,钟江;利用Tn5转座子构建杆状病毒AcMNPV随机突变体的初步研究[J];复旦学报(自然科学版);2005年04期
4 刘正初,彭源德,孙庆祥,冯湘沅;苎麻纤维形态结构物理特性与脱胶方法的关系[J];纺织学报;1994年12期
5 刘正初,彭源德,冯湘沅,杨喜爱;苎麻生物脱胶新技术工业化生产应用研究[J];纺织学报;2001年02期
6 刘自镕,程海,任建平,冯瑞良,殷立德,王侠;大麻酶法脱胶机理初探[J];纺织学报;2001年03期
7 蒋国华;苎麻微生物脱胶研究[J];纺织学报;2001年06期
8 郑来久,张宁;红麻粗纱酶解效果测定及其分析[J];纺织学报;2005年04期
9 吴君南;郝新敏;唐宗留;张加忠;陈建勇;;大麻纤维高温闪爆联合脱胶技术[J];纺织学报;2007年11期
10 李伟如,袁金伦,陈淑颜,李惠波;苎麻短程不打麻脱胶[J];广东化纤;1994年01期
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1 杜秉海;苜蓿中华根瘤菌042BMnoeAB基因的克隆、表达调控和功能分析[D];中国农业大学;2004年
【共引文献】
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1 王子迎;;美国大学微生物学教学的特点与思考[J];合肥师范学院学报;2010年03期
2 鲍明东,陈卓,刘自镕,任建平;罗布麻生物脱胶研究初报[J];山东农业科学;2002年06期
3 聂光军;岳文瑾;林星星;陆晓兰;;丙酮沉淀法提取β-甘露聚糖酶的研究[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2007年04期
4 许敏;许德生;;大麻纤维机械-生物酶联合脱胶技术[J];安徽工程科技学院学报(自然科学版);2009年02期
5 王宗乾;李长龙;宋春丽;黄承君;;罗布麻短纤碱膨化改性制备吸附材料[J];安徽工程大学学报;2011年02期
6 游玟娟;;紫外线诱变选育酸性α-淀粉酶高产菌株[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年11期
7 段晨凯;刘树文;;自选酵母发酵性能的研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2011年23期
8 李永富;钟为章;马金生;蒋立凤;;复合酶对沙门氏菌杀灭作用的研究[J];安徽农业科学;2006年05期
9 朱劼;;β-甘露聚糖酶的研究现状[J];安徽农业科学;2007年19期
10 张辉;;1株青霉固体发酵产酸性β-甘露聚糖酶条件优化[J];安徽农业科学;2008年05期
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1 蒋少军;李志忠;张新璞;胥顺吉;;大麻纤维性能及生物酶脱胶工艺研究[A];第八届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2008年
2 蒋少军;李志忠;张新璞;胥顺吉;;大麻纤维的生物酶脱胶技术[A];铜牛杯第九届功能性纺织品及纳米技术研讨会论文集[C];2009年
3 蒋少军;李志忠;张新璞;;亚麻纤维的酶处理技术[A];雪莲杯第10届功能性纺织品及纳米技术应用研讨会论文集[C];2010年
4 李艳丽;许少春;柳永;许尧兴;;微生物发酵生产β-甘露聚糖酶的最适条件研究[A];饲用酶制剂开发与应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
5 ;Mutation breeding of Aspergillus niger strain LW-1 for producing high-yield β-mannanase[A];饲用酶制剂开发与应用技术交流研讨会论文集[C];2010年
6 赵新波;祝诗平;;沼气研究和利用的现状与发展趋势[A];自主创新与持续增长第十一届中国科协年会论文集(2)[C];2009年
7 吴春华;庞杰;;魔芋功能活性成分的研究进展[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
8 高龙;王全杰;杨小岚;范怀林;;艾蒿精油的研究进展及其在皮革中的应用[A];2010年全国皮革化学品会议论文集[C];2010年
9 庄志凯;曹文红;吉宏武;;南美白对虾虾头内源碱性蛋白酶的分离纯化及其酶学特性研究[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
10 肖峰;陈伟;;现代食品微生物控制面临的挑战[A];“食品加工与安全”学术研讨会暨2010年广东省食品学会年会论文集[C];2010年
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1 隋建新;单增李斯特菌鸡卵黄抗体的抑菌性能及其机理研究[D];中国海洋大学;2010年
2 高卫华;芽孢杆菌胞外蛋白酶合成及抑菌功能的调控机制研究[D];南开大学;2010年
3 林文凭;Bacillus subtilis ZJU15产生的抗菌肽研究[D];浙江大学;2010年
4 刘咏梅;产精氨酸脱亚胺酶变形假单胞菌的筛选鉴定及酶的定向改造[D];江南大学;2010年
5 莫章桦;产双酶恶臭假单胞菌的选育与酶法制备D-pHPG[D];中南林业科技大学;2007年
6 田玉庭;辅酶Q_(10)高产菌株选育及发酵过程优化研究[D];西北农林科技大学;2010年
7 赵龙飞;西北地区苦豆子根瘤菌遗传多样性和系统发育研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 詹冬玲;超嗜热古菌Pyrococcus horikoshii OT3半胱氨酸蛋白酶的研究[D];吉林大学;2011年
9 周博如;阿特拉津降解菌的分离、鉴定及特性研究[D];东北林业大学;2011年
10 王国英;玫瑰孢链霉菌代谢通量分析及戊糖磷酸途径改造[D];天津大学;2010年
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1 曲丽洁;用于动物性食品中莱克多巴胺快速检测的SPR技术研究[D];华中农业大学;2010年
2 胡慧磊;产聚半乳糖醛酸酶菌株的筛选、发酵条件及酶学性质的研究[D];华中农业大学;2010年
3 杨砚;中度嗜盐菌新种Pontibacillus yanchengensis sp. nov.的鉴定与多相分类学研究[D];华中农业大学;2010年
4 袁怡;沼液作为生菜、柑橘叶面肥的试验研究[D];华中农业大学;2010年
5 宋庆平;水溶性壳聚糖衍生物的制备及其抗菌性能研究[D];安徽工程大学;2010年
6 路晓萌;Pseudomonas mediterranea G-229-21T铁载体相关基因purL的克隆及功能分析[D];山东农业大学;2010年
7 杨玉静;微生物絮凝剂产生菌的筛选[D];山东农业大学;2010年
8 于忠良;根霉ZM-10脂肪酶酶学性质和化学修饰[D];山东农业大学;2010年
9 高冬余;厌氧固态发酵菜籽粕研究[D];安徽农业大学;2010年
10 张亚丽;产γ—谷氨基甲酰胺合成酶的菌株的选育[D];安徽农业大学;2010年
【二级参考文献】
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1 李恒义,陆筱斋;大麻快速脱胶新工艺[J];中外技术情报;1996年06期
2 张杰,周永凯,张建春;大麻落麻制备粘胶纤维浆粕的蒸煮工艺初探[J];北京服装学院学报;2005年01期
3 邵自强,廖双泉,李晓萌,白松,谭惠民;棉纤维蒸汽闪爆改性及其化学反应性能[J];火炸药学报;2001年01期
4 沈妙福;皂荚的临床运用[J];北京中医;1997年02期
5 李振华,董颀;苎麻快速化学脱胶技术研究[J];成都纺织高等专科学校学报;2000年04期
6 邱存家,陈礼仪;植物胶的改性及其在钻探工程中的应用[J];成都理工大学学报(自然科学版);2003年02期
7 田乃林,郑若芝;阳离子胍胶的研制及性能评价[J];承德石油高等专科学校学报;2002年01期
8 潘超,卢秀文,孙焕新,顾立新;羟丙基瓜尔胶的性能及其在牙膏中的应用[J];日用化学工业;2001年01期
9 於勤,郑赛华,汪原;化烫头发蛋白质丢失的测定及护发香波对其修护的作用[J];日用化学工业;2002年05期
10 刘爱红,姜发堂,张声华;魔芋粉接枝丙烯酸(钠)超强吸水剂的制备[J];材料科学与工程学报;2004年04期
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1 谭秀山;CXJZ95-198菌株分泌果胶酶和半纤维素酶的活性研究及果胶酶的分离纯化[D];新疆农业大学;2004年
2 李宝坤;CXJZ菌株分泌β-甘露聚糖酶的分离纯化及其酶学性质研究[D];新疆农业大学;2005年
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1 周海燕;吴永尧;;点突变对枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶结构和功能的影响[J];高等函授学报(自然科学版);2008年01期
2 崔福绵,石家骥,鲁茁壮;枯草芽孢杆菌中性β-甘露聚糖酶的产生及性质[J];微生物学报;1999年01期
3 马建华,高扬,牛秀田,邹俊,毕汝昌,崔福绵;枯草芽孢杆菌中性β-甘露聚糖酶的纯化及性质研究[J];中国生物化学与分子生物学报;1999年01期
4 罗强,孙启玲,张兴宇,岑谷荣,汪红;β-甘露聚糖酶菌株的复合诱变选育及发酵条件的优化[J];四川大学学报(自然科学版);2003年01期
5 孔建;王文夕;赵白鸽;程红梅;申效诚;张桂芬;;枯草芽孢杆菌B-903菌株抗菌物质的研究[J];微生物学报;1992年06期
6 陈中义,张杰,曹景萍,丁之铨,黄大昉 ,陈志谊;杀虫防病基因工程枯草芽孢杆菌的构建[J];生物工程学报;1999年02期
7 张蓓,王健,陈宁,张克旭,浅井博,方杰;枯草芽孢杆菌生产鸟苷的途径分析(英文)[J];南开大学学报(自然科学版);2005年01期
8 彭其安;张西峰;吴思方;王伟平;;同源重组法构建枯草芽孢杆菌转酮酶缺失突变菌株[J];生物技术;2006年06期
9 李忠玲;张强;马齐;岳淑宁;张红艳;胡云红;秦涛;;产蛋白酶枯草芽孢杆菌的复壮及生产初步研究[J];中国酿造;2009年04期
10 彭福中;陈雪岚;徐锋;熊勇华;;核心链霉亲和素的原核表达[J];食品科学;2009年23期
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1 刘桂君;孟佑婷;杨素玲;尚宏忠;;生防菌枯草芽孢杆菌的辐射诱变研究[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
2 蒋思婧;马立新;;枯草芽孢杆菌的寡聚-1,6-葡萄糖苷酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[A];中国生物工程学会第三次全国会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2001年
3 李华;沈立荣;冯凤琴;李铎;;细菌型豆豉发酵菌株的鉴定[A];2009食品科技(北京)论坛会议指南[C];2009年
4 杨明明;;枯草芽孢杆菌高效表达系统的构建[A];第六次全国饲料营养学术研讨会论文集[C];2010年
5 钟娟;周金燕;李志东;雷宝良;谭红;;一种新型抗菌肽——捷安肽素的研究[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年
6 游银伟;尤升波;岳寿松;;枯草芽孢杆菌YYW-1蛋白酶缺陷株诱变与筛选[A];2006中国微生物学会第九次全国会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2006年
7 亓雪晨;齐俊生;王琦;梅汝鸿;;枯草芽孢杆菌启动子片段的克隆及其在绿色荧光蛋白标记中的应用[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
8 刘辉;魏祥法;井庆川;刘雪兰;刘瑞亭;石天虹;;一株枯草芽孢杆菌发酵培养基的优化[A];第三届第八次全国学术研讨会暨动物微生态企业发展战略论坛论文集[C];2006年
9 孙璐;文欣;谭英;李贺阳;赵月芳;牛聪伟;席真;;原卟啉原氧化酶及其突变体的酶学性质研究[A];中国化学会第26届学术年会化学生物分会场论文集[C];2008年
10 冀志霞;钱风光;陈守文;;西瓜枯萎病生防菌的筛选与鉴定[A];粮食安全与植保科技创新[C];2009年
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1 ;浅谈枯草芽孢杆菌在水产养殖上的应用[N];中国海洋报;2003年
2 记者 王丹;我国建成大型小鼠基因突变体库[N];健康报;2010年
3 江苏省淡水水产研究所研究员 徐在宽 江苏省海洋与渔业局工程师 仇丽;复合型枯草芽孢杆菌活菌生物净水剂在特种水产养殖中的应用探讨[N];科技日报;2001年
4 本报记者 仇方迎;还水体以清新[N];科技日报;2001年
5 河北远征药业 赵茂华王东军;早期仔猪断奶后常见问题及对策⑤[N];河北农民报;2007年
6 水清;活菌剂在农业生产上的应用[N];江苏农业科技报;2008年
7 ;蛋白酶[N];中国畜牧兽医报;2008年
8 香红星;走进微生物世界让这个“小精灵”为你增效[N];中国畜牧兽医报;2007年
9 王化民 本报记者  张会斌;法库创出服务农民新模式[N];辽宁日报;2006年
10 华南农业大学动物科学学院 冯定远左建军;微生物添加剂在动物营养中的应用现状及发展前景[N];中国畜牧兽医报;2008年
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1 卢海强;嗜热微生物来源的甘露聚糖酶的克隆表达、热稳定性及催化机理的研究[D];中国农业科学院;2013年
2 钱静亚;脉冲磁场对枯草芽孢杆菌的灭活作用及其机理研究[D];江苏大学;2013年
3 杨明明;枯草芽孢杆菌关键遗传调控元件及表达系统的研究[D];西北农林科技大学;2013年
4 李晶;黄瓜枯萎病高效拮抗枯草芽孢杆菌的筛选及生防机制研究[D];哈尔滨工业大学;2010年
5 伍辉军;枯草芽孢杆菌脂肽化合物合成调控基因功能研究及多功能生防工程菌株的构建[D];南京农业大学;2008年
6 任建军;枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis RN-61)抗菌蛋白的纯化及鉴定[D];北京林业大学;2013年
7 陈云;枯草芽孢杆菌生物膜在青枯病生防中的功能研究及Cyclic-di-GMP信号通路初探[D];南京农业大学;2012年
8 齐东梅;药食源芽孢杆菌的分类鉴定及枯草芽孢杆菌H110抑菌特性研究[D];中国农业大学;2005年
9 邵勤;一个新的甜瓜叶色黄化突变体研究[D];东北农业大学;2013年
10 吴宇;拟南芥耐低硫突变体高通量筛选的建立和鉴定[D];中国科学技术大学;2010年
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1 石岩;欧文氏杆菌突变体的构建及枯草芽孢杆菌甘露聚糖酶基因的克隆和表达[D];中国农业科学院;2010年
2 徐晶;弹性蛋白酶发酵生产条件优化及性质研究[D];东北农业大学;2008年
3 李小明;甘露聚糖酶产生菌的筛选及酶学性质研究[D];大连理工大学;2010年
4 王振宇;拟南芥光周期敏感型多效突变体ldd1的表型及遗传分析[D];兰州大学;2010年
5 马振;水稻Tos17突变体库的创建和应用[D];华中农业大学;2010年
6 吴宝昌;枯草芽孢杆菌混合发酵制备豆粕饲料的研究[D];山东轻工业学院;2010年
7 汤文浩;解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens T27甘露聚糖酶的发酵及酶学性质研究[D];华中农业大学;2011年
8 徐广军;枯草芽孢杆菌BS_(3-1)对小麦赤霉病(Fusarium graminearum)的生物防治研究[D];四川农业大学;2003年
9 莫宏春;枯草芽孢杆菌6-磷酸葡萄糖脱氢酶的分离纯化和部分性质[D];四川大学;2003年
10 李雪华;大豆突变体库的初步构建及突变类型的鉴定[D];南京农业大学;2003年
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