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过氧化氢气体等离子体灭菌器灭菌影响因素的研究

张剑  
【摘要】: 目的: 观察过氧化氢气体等离子体灭菌器在实验室条件下的灭菌结果,研究影响灭菌效果的条件和参数;通过现场调查,了解和掌握医院中用于过氧化氢气体等离子体灭菌的器械一般情况;为医院正确使用过氧化氢气体等离子体灭菌提供实验室基础;为制定我国过氧化氢气体等离子体卫生标准提供技术资料。 方法: 1.过氧化氢气体等离子体灭菌器现阶段在医院的使用情况。包括主要灭菌物品种类、装载量的情况、管腔类器械的种类、灭菌前的对物品的清洗和干燥情况以及物品清洗的监测情况。 2.灭菌效果培养基灵敏度的测定。将嗜热脂肪杆菌芽孢和枯草杆菌黑色变种芽孢悬液用水进行系列稀释,然后分别接种灭菌后的溴甲酚紫蛋白胨培养液和TSB,按照要求进行培养,观测结果。 3.过氧化氢气体等离子体灭菌过程中过氧化氢扩散杀菌效果和等离子体杀菌效果的比较。过氧化氢扩散,作用时间为6s、18s、30s、42s和1min;作用浓度为2.5mg/L和5mg/L,运行温度设置为50℃。等离子过程,作用时间为5min、10min和15min,运行温度设置为50℃。 4.研究在相应的压力下温度对灭菌的影响。采用PSR-100过氧化氢等离子体灭菌抗力仪对嗜热脂肪杆菌芽孢进行实验室测试,作用时间为1min、2min、3min和5min,作用浓度为2.5mg/L,运行温度设置为25℃。 5.注入过氧化氢的浓度对灭菌穿透性结果的影响。再加过氧化氢提纯前后,灭菌效果的比较。 6.将温度压力数据记录器放置在强生、白象、易路和抗力仪中,测试等离子放电对温度的影响。 7.研究水分对过氧化氢气体等离子体灭菌器灭菌的影响。采用注水管腔的方式,使管腔潮湿,用A过氧化氢气体等离子体灭菌器进行潮湿管腔和干燥管腔的灭菌,对管腔进行无菌监测和定量培养,比较湿度的影响。 8.研究有机物对过氧化氢气体等离子体灭菌器灭菌结果的影响。选用有机物影响实验中的小牛血清和悬液法中的有机干扰物BSA进行试验,用无菌去离子水将小牛血清稀释成50%和25%的小牛血清,配置25%、12%和6%的BSA溶液,分别污染菌片,进行表面灭菌和管腔内部灭菌的比较。 9.研究盐水对过氧化氢气体等离子体灭菌器灭菌结果的影响。分别配置双倍的生理盐水、生理盐水和50%的生理盐水,分别滴染菌片,进行表面灭菌和管腔内部灭菌的比较 10.研究血液对过氧化氢气体等离子体灭菌器灭菌结果的影响,选用羊血作为试验用血液。将血液用无菌去离子水稀释为10%和1%的浓度,分别滴染菌片,进行表面灭菌和管腔内部灭菌的比较。 11.研究不同材质的管腔对过氧化氢气体等离子体灭菌器灭菌效果的影响,采用不同品牌的等离子体灭菌器,分别灭菌不锈钢管腔和聚四氟乙烯的管腔,不锈钢管腔内径1mm,长度500mm和600mm;聚四氟乙烯管腔内径lmm,长度2000mm。 结果: 1.过氧化氢气体等离子体灭菌器灭菌物品有:胸腔镜,腹腔镜、手术电钻及电池、电刀线、微动力马达、电烧刀头、三用枪头、激光脱敏光纤头、喉镜、纤维电缆、硅胶管、鼻腔镜、无影灯灯把、灭菌管腔类器械最小内径1mm、灭菌管腔类器械最大长度为1500mm、灭菌装载量一般都在灭菌舱容积的60%左右。多数器械选择多酶洗液清洗,并且干燥,用肉眼对清洗效果进行检测。 2.接种10-100cfu的嗜热脂肪杆菌芽孢在高压后的溴甲酚紫蛋白胨培养液中,经过24小时后,溴甲酚紫蛋白胨培养液完全变色。接种10-100cfu的枯草杆菌黑色变种芽孢在TSB中,经过48小时后,TSB出现菌膜。 3.嗜热脂肪杆菌芽孢菌片,2.5mg/L的过氧化氢,在温度为50℃的情况下,42s可以达到无菌的要求;5mg/L的过氧化氢,在温度为50℃的情况下,6s可以达到灭菌要求;在50℃,等离子放电5min、10min和15min,杀灭对数值小于2。 4.嗜热脂肪杆菌芽孢菌片,运行温度为20℃,过氧化氢浓度为2.5mg/L,作用时间为1min、2min和3min,都有菌生长。运行温度为50℃,过氧化氢浓度为2.5mg/L,作用时间为lmin,能完全杀灭嗜热脂肪杆菌芽孢。 5.B等离子体灭菌器、C和D等离子体灭菌器在不装备过氧化氢分纯系统,运行温度55℃,灭菌流程相同的情况下对60个不锈钢管腔(内径1mm长度500mm)的灭菌,没有达到灭菌要求;配备过氧化氢提纯系统后对60个不锈钢管腔(内径lmm长度500mm)的灭菌全部合格。。 6.通过测量强生、易路、白象和三源过氧化氢气体等离子体灭菌器预等离子期间温度变化,可以明显看到经过10min左右的等离子放电,温度都可以上升到50℃以上,说明等离子放电对温度的上升有明显的作用。 7.在同样的灭菌周期下,未经加湿处理的管腔灭菌合格,经过加湿处理的管腔达不到灭菌要求;加湿后管腔经过54℃烤箱干燥30min后灭菌,依然不能达到无菌要求;用气枪干燥15s后的管腔灭菌,只有少数达不到灭菌要求,但是灭菌效果远好于烤箱干燥的管腔。 8.小牛血清和BSA污染的菌片,放置在表面对灭菌没有明显影响,将污染后的菌片放置于管腔最难点,发现没有添加污染物的菌片完全可以灭菌,但是污染后的菌片出现灭菌不合格。 9.生理盐水污染的菌片,放置在表面对灭菌没有明显影响,将滴染生理盐水后的菌片放置于管腔最难点,发现没有添加生理盐水的菌片完全可以灭菌,但是滴染生理盐水后的菌片出现灭菌不合格。 10.羊血污染的菌片,放置在表面对灭菌没有明显影响,将羊血污染后的菌片放置于管腔最难点,发现没有滴加羊血的菌片完全可以灭菌,但是羊血污染后的菌片出现灭菌不合格。并且1%的羊血对灭菌影响非常明显。 11. STERRAD 100S过氧化氢低温等离子灭菌系统、三源牌CDMJ-100型常温等离子体灭菌器、凯斯普低温等离子体灭菌机casp-50、白象PS120低温等离子体灭菌器、易路牌ETP-100低温等离子灭菌器、老肯(?)低温过氧化氢等离子体灭菌柜LK/MJG-100型可以有效灭菌内径lmm,长度500mm的不锈钢管腔以及内径1mm,长度2000mm的聚四氟乙烯管腔。但是,对内经lmm,长度600mm的不锈钢管腔灭菌处理,会出现灭菌不合格现象。 结论: 1.管腔类器械的内径和长度都在卫生部批准的范围内,多数医院装载量超标,清洗基本符合要求,缺乏对管腔类器械内表面清洗监测。 2.溴甲酚紫蛋白胨培养液和TSB符合条款的要求,在接种菌落数不超过100CFU的情况下,培养基出现颜色变化或出现菌膜。 3.过氧化氢汽化和扩散可以在极短的时间内杀灭芽孢,随着浓度的增加,杀灭时间减少。等离子放电对芽孢也有一定的杀灭作用,但是时间会相对较长,所以说,在过氧化氢气体等离子体灭菌器中,起主导作用的还是过氧化氢的作用。 4.在过氧化氢气体等离子体灭菌器中,随着温度的升高,过氧化氢对芽孢的杀灭时间会减少。这是因为不同压力下,过氧化氢的沸点会不同,在灭菌舱内的压力下(一般1000pa---2000pa之间),过氧化氢的沸点大于50℃。 5.相比不加过氧化氢提纯装置的仪器,添加提纯装置的同样品牌的仪器可以有效灭菌内径1mmm,长度500mm的不锈钢管腔,说明过氧化氢的浓度越高对管腔类器械灭菌效果越好。 6.在过氧化氢气体等离子体灭菌器中,等离子体阶段对灭菌舱内的物品有明显的升温作用,在10min左右的预等离子期间,可以使温度探头的温度升高到50℃以上。 7.水分影响过氧化氢气体等离子灭菌器对管腔器械的灭菌效果。经过加湿处理的管腔达不到灭菌要求,但是未经加湿的管腔可以灭菌。加湿管腔经过54℃烤箱干燥30min后,依然达不到灭菌,用气枪干燥官腔15s后灭菌也是失败。 8.小牛血清和BSA影响过氧化氢气体等离子体灭菌器对管腔类器械的灭菌效果,随着小牛血清和BSA浓度的提高对灭菌效果影响越大。 9.生理盐水影响过氧化氢气体等离子体灭菌器对管腔类器械的灭菌效果,随着氯化钠浓度的提高对灭菌效果影响越大。 10.稀释到1%的羊血影响过氧化氢气体等离子体灭菌器对管腔类器械的灭菌效果,随着羊血浓度的提高对灭菌效果影响越大。 11.在过氧化氢气体等离子体灭菌器对管腔类器械灭菌中,同样内经1mm的情况下,相比不锈钢材质,聚四氟乙烯材质的管腔可以灭的更长一些。说明材质对过氧化氢气体等离子体灭菌有影响。


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