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《中国中医科学院》 2011年
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基于水溶性成分分析的厚朴质量评价

余盛贤  
【摘要】:厚朴为木兰科(Magnoliaceae)植物厚朴(Magnolia officinalis Rehd. et Wils)、凹叶厚朴(Magnolia officinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rehd. et Wils.)的干燥干皮、枝皮和根皮。厚朴在临床上应用广泛,具有燥湿消痰、下气除满的功效,用于湿滞伤中、脱痞吐泻、食积气滞、腹胀便秘、痰饮喘咳。采用厚朴配方的中成药多达200多种。国内外对厚朴化学成分的研究主要集中在对脂溶性成分的研究上,中药厚朴的质量评价多以脂溶性成分和厚朴酚与厚朴酚的含量为指标,对水溶性成分的研究鲜有报道。传统上厚朴药材多为水煎入药,文献报道厚朴水煎剂对消化系统具有促进作用,故对水溶性成分的研究不容忽视。在本论文中,我们首次对厚朴水溶性成分进行了提取分离及活性研究,在此基础上,建立了基于水溶性成分分析的厚朴质量评价的方法,对目前以脂溶性为指标的厚朴质量评价是一个有益的补充。 本论文共分为四个部分。 第一章为文献综述。 系统地查阅了有关厚朴的国内外文献资料,对厚朴植物分类、显微研究、群体遗传学、化学成分及药理作用等方面进行了分析与整理,为本课题的顺利实施提供了有益的借鉴。 第二章为厚朴水溶性化学成分研究。 采用溶剂提取,大孔树脂、LH-20及反相C-18层析柱分离的方法,从厚朴干皮中分到11个水溶性成分,利用质谱、核磁共振等现代波谱技术对这11个化合物进行结构鉴定。它们分别为:magnoloside A(1)、magnoloside D (2)、magnoloside E (3)、magnoloside B (4)、magnoflorine (木三(?)碱,51,trans-syringin(反式紫丁香苷,6)、methyl caffeate(咖啡酸甲酯,7)、syringaresinol-4,4'-O-bis-β-D-glucoside(丁香脂素双氧葡萄苷,8)、1,1'-dibenzene-6',8',9'-trihydroxy-3-allyl-4-O-β-D-glucopyranoside (9)、manglieside D (10)、saikolignanoside A (11)。其中化合物2、3为新化合物,化合物1、4-5、7-11为首次从厚朴中分离得到。 第三章为厚朴水溶性成分药效活性研究。 考察了水溶性成分木兰花碱、紫丁香苷、magnoloside A、magnoloside B对乙酰胆碱所致痉挛性离体大鼠肠管平滑肌的作用,并与厚朴酚及和厚朴酚进行了比较。结果表明,厚朴酚在3.0×10-6-2.4×104 mo1.L-1,和厚朴酚、紫丁香苷、magnoloside A在9.0×10-6-2.4×10-4 mol·L-1, magnoloside B在2.7×10-5-2.4×10-4m0l·L-1范围内剂量依赖性抑制乙酰胆碱所致痉挛性离体鼠肠平滑肌运动,与模型组比较具有显著性差异。同时,采用ORAC及DPPH法,对13个化合物抗氧化活性进行评价,结果显示magnoloside A、magnoloside B、magnoloside D、magnoloside E 4个苯乙醇苷类成分清除AAPH自由基及DPPH自由基的活性较强;木兰花碱、nanglieside D、saikolignanoside A、化合物9对AAPH自由基的清除能力与厚朴酚相当,对DPPH自由基的清除能力很弱;丁香脂素双葡萄糖苷、紫丁香苷、咖啡酸甲酯清除AAPH及DPPH自由基的能力很弱。化合物的抗氧化活性强弱与其结构中酚羟基、邻二酚羟基的数目有关。 第四章为基于水溶性成分分析的厚朴质量评价。 对中药厚朴中的水溶性成分进行定性定量分析,建立了水溶性化学成分的HPLC指纹图谱及4个主要成分的含量测定方法。对采自各产地的92份厚朴药材质量进行了评价,结果显示,各产地厚朴药材对照指纹图谱之间相似度差别很大,样品中nagnoloside B、magnoloside A的含量远高于木兰花碱和紫丁香苷,含量均值95%置信区间分别为1.04-1.28%、0.922-1.112%、0.102-0.121%、0.087-0.106%。同时考察了不同基源,产地,贮藏时间及药用部位对厚朴质量的影响。结果表明,不同产地的厚朴药材水溶性成分含量差别较大,以湖北道地产区厚朴药材中水溶性成分含量为质量评判标准,对各产地厚朴药材的质量进行评价,结果显示湖南产厚朴药材质量最优;不同种源的厚朴药材水溶性成分含量无大的差别;贮藏时间对厚朴药材水溶性成分的含量有较大影响,贮藏时间愈久,水溶性成分含量愈低;厚朴不同药用部位木兰花碱、紫丁香苷、总苯乙醇苷含量也有差别,从高至低分别为:枝朴筒朴=靴朴根朴。对29份市售厚朴药材水溶性成分进行了质量评价,magnoloside B、magnoloside A、木兰花碱和紫丁香苷含量均值95%置信区间分别为0.065-0.148%、0.086-0.159%、0.034-0.048%、0.012-0.019%,远低于直接从各产地收集的厚朴药材,其中茼朴商品较饮片水溶性成分含量高,表明药材加工与贮藏是影响厚朴药材中水溶性成分含量的主要因素。
【学位授予单位】:中国中医科学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R284

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