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《国家海洋局第三海洋研究所》 2003年
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褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)肝微粒体细胞色素P-450单加氧酶的研究——动力学反应条件、诱导和监测

余铭恩  
【摘要】: 本文以褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)为实验生物,以7-乙氧基异吩恶唑(7-ethoxyresorufin)为底物,较系统地研究和比较了0#柴油水溶性成分(WAF)诱导的和对照组的肝微粒体细胞色素P-450 EROD(7-乙氧基异吩恶唑-O-脱乙基酶)系统动力学反应的最适条件和Km、Vmax,建立了褐菖鲉肝EROD活性测定技术。在室内,以0#柴油WAF为诱导物,开展了褐菖鲉肝EROD的剂量—效应实验和时间—效应实验,采用生物统计学的方法,确定了这种诱导物对酶的最低诱导剂量和最短诱导时间。在野外,以褐菖鲉为监测生物,以EROD活性为指标,进行了海区现场污染监测的应用研究,并结合环境化学指标进行综合分析,肯定了这种鱼肝微粒体EROD在现场海区污染监测中的指示作用。另外,也初步开展了黄鳍鲷(Sparus latus)肝微粒体EROD的剂量—效应研究,探讨了这种鱼肝微粒体EROD酶作为污染监测指标的可能性。结果显示: 1.褐菖鲉肝脏Cyt.P-450 EROD反应系统最适pH为7.6,最适温度为15℃;对照组Km、Vmax分别为0.144μM、0.466nmol/min/mg,100μg/L诱导组Km、Vmax分别为0.357μM、2.360nmol/min/mg。 2.在10μg/L~100μg/L0#柴油WAF的诱导下,褐菖鲉肝脏EROD活性均有不同程度的提高,最高的诱导活性是对照组的2.85倍。单因素方差分析结果显示不同浓度的0#柴油水溶性成分对EROD活性的诱导达到统计学上的极显著水平。并且发现诱导物浓度与EROD活性有很好的线性关系,通过一元线性回归分析可得到回归方程(R~2=0.98)。 3.在40μg/L固定浓度0#柴油WAF的诱导下,与4天对照组相比,褐菖鲉肝脏EROD活性经过4天诱导即到达最大值,6天后酶活性出现下降趋势,这可能与污染物的抑制有关。 4.褐菖鲉野外现场污染监测的实验生物统计学分析结果表明,不同站位的褐菖鲉肝脏EROD活性水平与该站水体中油类的浓度呈正相关关系,其中第一码头尤其明显。选择褐菖鲉作为指示生物,以肝脏Cyt.P-450EROD活性为指标监测海区油类及其PAH污染是可行的,该方法在海洋环境有机污染监测及其生物效应评价中具有重要的应用价值。 一摘要一 5.在10林留L一100林岁LO#柴油场叭F的诱导下,黄鳍绸肝脏EROD活性随 诱导物浓度的提高呈迅速上升趋势,于75林创L剂量组到达峰值,是对照 组的13.30倍。但100“岁L组酶活性与75林叭组相比出现下降,可能与 竞争性抑制有关。单因素方差分析发现,虽然不同浓度0#柴油认叭F对 EROD活性的诱导未达到统计学上的显著水平,但t检验表明,与对照 组相比,75林留L组酶活性则显示显著的差别。与褐葛鳅比较,几乎在每 个诱导组黄鳍酮肝脏EROD活性的提高幅度都比较大,而且在100林留L 剂量组就已经出现抑制现象。所以对于0#柴油认叭F而言,黄鳍绸比褐 葛鳅更为敏感,但对诱导物的耐受性较低,EROD活性诱导范围较狭窄。
【学位授予单位】:国家海洋局第三海洋研究所
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:X834

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【同被引文献】
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