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《北京市结核病胸部肿瘤研究所》 2000年
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免疫复合物5F11-ADM对人肺癌细胞杀伤作用的研究

唐俊舫  
【摘要】: 目的:化疗在肺癌的综合治疗中占有重要地位。化疗药物对正常组织、器官的毒副作用及耐药、多药耐药(MDR)情况的存在,是限制肺癌化疗疗效提高的主要原因。单克隆抗体-化疗药物复合物常用于肿瘤的导向治疗,降低化疗药物的毒副作用。近年来又发现其尚具有逆转MDR的作用。本研究的目的是评价一种抗肺癌单抗5F11与阿霉素(ADM)的复合物对肺癌细胞的导向治疗作用,及其对一种耐药细胞系的耐药逆转作用。 方法:通过两种方法将ADM与5F11联接起来:(1)以氧化的葡聚糖DextranT40作为中介体;(2)用稀释的戊二醛交联。免疫复合物5F11-ADM的导向治疗作用是通过其对几个细胞系的细胞毒作用来评价的:人肺腺癌细胞系A2,对ADM敏感且可被5F11识别;人大细胞肺癌细胞系801-D,对ADM耐受且可被5F11识别;大细胞肺癌细胞系801-D~(ADM),对ADM高度耐受且可被5F11识别;艾氏腹水癌细胞系,不能被5F11识别。通过集落形成试验和染料排斥试验评价复合物的细胞毒作用。用免疫组化方法评价5F11交联前后抗体活性的变化。 结果:通过集落形成试验比较戊二醛、葡聚糖两种方法制备的5F11-ADM复合物对801-D细胞系的体外活性,发现在所含ADM浓度为0.04ug/ml时,戊二醛法制备的复合物抑制率为90.1%,葡聚糖法为0%;所含ADM浓度为1ug/ml时,戊二醛法制备的复合物抑制率为100%,而葡聚糖法仅为19.4%(P0.01)。噻唑蓝(MTT)法测定结果示801-D对ADM耐药,A2对ADM敏感。免疫组化法测定结果示801-D染色为阳性,801-D~(ADM)为强阳性,A2为阴性。集落形成试验结果为:对于801-D细胞,ADM及ADM+5F11的100%杀伤浓度均为1ug/ml,而5F11-ADM则为0.1 ug/ml,降低了10倍(P0.01);对于A2细胞,ADM及ADM+5F11的100%杀伤浓度均为1ug/ml,而5F11-ADM则为0.04ug/ml,降低了25倍(P0.01);对于801-D~(ADM)细胞,在所含ADM浓度为0.4ug/ml时,5F11-ADM的抑制率较ADM、ADM+5F11分别增加68.5%(P0.01)、39.4%(P0.001);在所含ADM浓度为1ug/ml时,ADM、ADM+5F11的抑制率分别为26.3%、50.5%,而5F11-ADM为100%。24孔板集落法试验发现,在所含ADM浓度为0.4ug/ml 硕士研究生毕业论文 中文摘要 时,sn卜**M对SO卜D细胞的杀伤较**M增强10倍左右0<015人 在所含 ADM浓度为 0.lug/ml、04 "g/ml时,SFllADM对 AZ细胞的杀伤较 ADM增 强100O倍以上o功刀5人 台盼蓝染料排斥试验结果示SFI卜AD M对SO卜D、AZ 细胞的杀伤增强,而对艾氏腹水癌细胞的杀伤率较ADM、ADM+SFll 略低, 其差别无统计学意义。 结论:戊二醛法制备的复合物对靶细胞的杀伤作用增强,对非靶细胞的杀 伤作用与游离ADM相比无明显差别;可有效地逆转80iD及801*”细胞对 ADM的耐受。戊二醛法制备的SFllADM中ADM与SFll的克分子比低于葡 聚糖法,但体外对靶细胞的杀伤活性却高于葡聚糖法。
【学位授予单位】:北京市结核病胸部肿瘤研究所
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:R734.2

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【参考文献】
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