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《北京市结核病胸部肿瘤研究所》 2001年
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1.结构分枝杆菌毒力相关基因的研究 2.结构分枝杆菌DNA指纹技术及其应用研究

王甦民  
【摘要】: 目的 采用mRNA差异显示技术研究结核分枝杆菌H_(37)Rv株与H_(37)Ra株的基因差异,以期最终获取结核分枝杆菌毒力相关基因。 方法 分别提取结核分枝杆菌H_(37)Rv株与H_(37)Ra株总RNA、经逆转录、PCR扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳和放射自显影进行mRNA差异显示。回收差异显示条带、再扩增差异条带和序列分析,进行同源性查询。 结果 结核分枝杆菌在改良苏通培养基培养,两周时结核分枝杆菌生长最旺盛。分别提取结核分枝杆菌H_(37)Rv株与H_(37)Ra株总RNA,纯化后260nm/280nm平均为1.912。提取的RNA纯度较高符合实验要求。经差异显示后,共回收与H_(37)Ra株不同的H_(37)Rv株mRNA差异条带10条。经美国国立图书馆数据库查询,发现其中2条差异条带与结核分枝杆菌H_(37)Rv株DNA序列具有较高的同源性。 结论 从本研究结果看mRNA差异显示方法具有高效、灵敏等优点,可在基因水平研究同种或异种属不同株间的差异,用于结核分枝杆菌相关毒力基因的研究。本研究获得的H_(37)Rv株与H_(37)Ra株的差异片段可能含有与结核分枝杆菌毒力相关的基因,需进一步研究证实。
【学位授予单位】:北京市结核病胸部肿瘤研究所
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R346

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