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天然高分子中N-聚糖的O-乙酰化分析及其应用于钙钛矿光伏材料的毒性评价

付仙  
【摘要】:作为天然高分子化合物的蛋白质是生命活动中不可或缺的一部分。N-连接糖基化作为广泛且重要的蛋白质翻译后修饰丰富了蛋白质的结构和功能,修饰物N-聚糖因此参与到有机体各个阶段的生命活动中,丰富的生物功能使得N-聚糖的研究具有重要的临床医学价值和生物学意义。鲫鱼作为湿地生态系统中一类重要的生物群体与水体及其他生物之间存在广泛的相互影响。研究鲫鱼体内生物大分子的结构与功能,有助于探讨鲫鱼的生命活动特征以及对水体环境进行风险评估等,可谓意义重大。然而,与鲫鱼相关的生物大分子研究发展缓慢,尤其是糖组学方面报道鲜少。本文基于MALDI-TOF-MS鉴定了毒理暴露的鲫鱼血清N-聚糖,对血清N-聚糖随暴露时间的丰度差异进行了比较和讨论,发现钙钛矿材料FAPbBr_3对N-聚糖的含量有一定影响。借助温和的甲胺化衍生方法发现了鲫鱼血清唾液酸化N-聚糖含有丰富的氧乙酰化修饰,并采用LC-MS/MS分析了唾液酸的氧乙酰化分布不均匀情况及N-聚糖上的修饰位点。通过苯胺化、甲胺化双衍生法及LC-Orbitrap-MS/MS进一步分析唾液酸N-聚糖上的修饰位点及修饰等具体细节,将完整糖链分子打碎对碎片峰进行解析,最终实现了唾液酸化N-聚糖氧乙酰基分布不均匀的同分异构体定性分析。同时将双衍生法结合苯胺同位素标记,通过相对分子质量相差5 Da实现不同样品中N-聚糖的同时相对定量分析。论文工作丰富了鲫鱼糖组学的生物信息,所建立方法在研究糖链修饰以及寻找糖蛋白生物标志物方面有着广泛的应用前景。


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