收藏本站
《江汉大学》 2018年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

莱茵衣藻耐镉突变体的筛选及遗传分析

陈斌  
【摘要】:面对日益恶化的重金属污染,生物修复方法也逐渐发展起来。相对于传统的理化方法,利用莱茵衣藻进行重金属污染处理具有避免二次污染、低成本等优势。本课题首先通过电击转化方法,获得一批衣藻转化子。经过0.6mM氯化镉和0.4mM氯化镉筛选并鉴定,获得衣藻镉抗型突变体和衣藻镉敏感型突变体。通过RESDA-PCR技术,可获得突变体插入基因的侧翼序列。经序列比对,找出衣藻突变体突变基因。利用突变体和突变基因,本课题展开了一系列研究。1.实验中获得了获得两个衣藻镉抗型突变体(TC4和CB14)以及两个衣藻镉敏感型突变体(CB27和CB30)。经过序列比对TC4突变基因为SF56-ABT基因(SF56-ATP-BINDING TRANSPORT PROTEIN-RELATED)。2.通过分析SF56-ABT蛋白结构,发现该基因具有典型的AAA结构域。通过导入突变基因,筛选得到TC4的互补藻株TC4-6。根据蛋白质免疫印迹分析,在0.1mM液体氯化镉胁迫下,SF56-ABT蛋白表达量逐渐增多。测量不同藻株镉含量,结果表明TC4-6与21gr对镉吸附量较少,TC4对镉吸附较多。3.经过序列比对,发现CB14突变基因为SRrG(small Rab-related GTPase),CB27突变基因为FAP基因(Flagellar Associated Protein),CB30突变基因为MhABC基因(tMitochondrial half-size ABC transporter,membrane protein)。通过网站搜索,对三种突变基因进行了插入位点鉴定、克隆cDNA等研究,并分析了三种蛋白结构域。本课题研究了不同浓度氯化镉对衣藻的胁迫程度,并筛选获得衣藻镉抗型突变体和敏感型突变体。这表明我们成功构建了筛选衣藻镉相关突变体体系。根据对TC4突变体的研究,可以得知莱茵衣藻的SF56-ABT蛋白参与了细胞的镉代谢研究。通过对CB14、CB27、CB30三个突变体的研究,发现了三个镉调控相关基因,并具体分析了三个的基因的特点。总体而言,本文获得了四个镉代谢突变体,并进行了相关基因和蛋白的研究。
【学位授予单位】:江汉大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2018
【分类号】:X173

【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 邓旭;魏斌;胡章立;;转基因衣藻对重金属的抗性及对镉离子的富集[J];生物技术;2007年06期
2 江用彬;季宏兵;;藻类对重金属污染水体的生物修复[J];地理科学进展;2007年01期
3 吴文林;吴穗洁;;Rab蛋白的结构、功能与研究展望[J];台湾海峡;2006年04期
4 易建春;汪模辉;李锡坤;;土壤中镉的污染及治理[J];广东微量元素科学;2006年09期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 孟春晓;高政权;;微藻对重金属污染的生物修复研究现状与展望[J];水产科学;2009年12期
2 关光玉;王建平;Jack Ng;;二氯化镉对小眼虫细胞的毒性作用[J];宁夏医学杂志;2009年12期
3 李川;薛建辉;赵蓉;苏莹莹;;4种固定化藻类对污水中氮的净化能力研究[J];环境工程学报;2009年12期
4 李素霞;李刚;谢朝阳;;土壤-蔬菜系统中Cd与硝酸盐复合污染研究现状[J];安徽农业科学;2009年33期
5 梁帅;颜冬云;徐绍辉;;重金属废水的生物治理技术研究进展[J];环境科学与技术;2009年11期
6 张静霞;;小球藻去除污水中氮磷能力的研究[J];安徽农业科学;2009年32期
7 唐建勋;;藻类和水生植物对水体重金属的去除[J];金华职业技术学院学报;2009年03期
8 梁莎;冯宁川;郭学益;;生物吸附法处理重金属废水研究进展[J];水处理技术;2009年03期
9 胡肖容;;藻类对重金属污染水体的生物吸附[J];科技信息;2009年04期
10 李增新;王国明;孟韵;张道来;;壳聚糖对污染土壤中吸附态镉的提取效果研究[J];安全与环境学报;2008年05期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈秀娟,洪涛,沈方祥;氢化物发生-原子荧光光谱法测定土壤中的镉[J];分析仪器;2005年03期
2 张泓,吕维君,茅建人,吴连茂;微波消解—原子吸收分光光度法、原子荧光分光光度法测定土壤中的铜锌铅镉铬砷汞[J];中国卫生检验杂志;2005年07期
3 曹越,申铁莲,李建新;浅析土壤环境中的镉的影响[J];环境科学与管理;2005年03期
4 曾咏梅,毛昆明,李永梅;土壤中镉污染的危害及其防治对策[J];云南农业大学学报;2005年03期
5 吴双桃;镉污染土壤治理的研究进展[J];广东化工;2005年04期
6 刘莉,钱琼秋;影响作物对镉吸收的因素分析及土壤镉污染的防治对策[J];浙江农业学报;2005年02期
7 李永华,王五一,杨林生,李海蓉;汞的环境生物地球化学研究进展[J];地理科学进展;2004年06期
8 涂书新,韦朝阳;我国生物修复技术的现状与展望[J];地理科学进展;2004年06期
9 赵肖为,李清彪,卢英华,何宁,孙道华,邓旭;高选择性基因工程菌E.coli SE5000生物富集水体中的镍离子[J];环境科学学报;2004年02期
10 吴成;氢化物发生-原子荧光光谱法测定土壤中镉[J];光谱学与光谱分析;2003年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张慧冲;衣藻的早春采集[J];生物学教学;2000年06期
2 樊振川;吕玉洁;刘雁霞;王晶;董彬;孟德梅;;莱茵衣藻作为绿色细胞工厂生产高附加值重组蛋白的研究进展[J];天津科技大学学报;2017年01期
3 姜思;刘莹莹;佟少明;;4种常用抗生素对莱茵衣藻生长及光化学活性的影响[J];生物加工过程;2017年02期
4 王潮岗;陈爱娜;胡章立;于珊珊;;莱茵衣藻基因组文库的构建[J];生物技术通报;2013年04期
5 秦琅;朱毅;;莱氏衣藻鞭毛研究进展[J];首都师范大学学报(自然科学版);2012年01期
6 杨敏;胡鸿钧;李夜光;;中国衣藻属研究(Ⅰ)[J];武汉植物学研究;2009年06期
7 伍盈盈;;衣藻生物吸附铜的实验研究[J];贵州化工;2006年03期
8 王潮岗,胡章立;莱茵衣藻细胞核转化系统研究进展[J];仲恺农业技术学院学报;2005年02期
9 于宝霞;培养衣藻的几个关键因素[J];生物学通报;2005年06期
10 胡章立;王潮岗;吴锦霞;;增强型绿色荧光蛋白在莱茵衣藻中的高效表达[J];深圳特区科技;2005年00期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 左照江;李洪涛;朱晔荣;白艳玲;王勇;;酸胁迫对莱茵衣藻保护酶活性的影响[A];植物分子生物学与现代农业——全国植物生物学研讨会论文摘要集[C];2010年
2 徐丽华;林章凛;;莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)氢酶的定向进化[A];代谢工程和工业生物技术研讨会论文集[C];2004年
3 吾甫尔·米吉提;艾山江;徐琴;艾尔肯·热合蔓;A.S.Chunaev;;莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)中叶绿素b生成的遗传研究进展[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
4 陈阅增;张惟杰;李荫蓁;;几种元素对衣藻和酵母生长的影响[A];中国营养学会首届微量元素专题讨论会论文摘要汇编[C];1985年
5 吴志华;黎双飞;胡章立;;莱茵衣藻线粒体外源基因表达系统的初步研究[A];广东省植物学会第十七期学术研讨会论文集[C];2008年
6 陈俊;吴锦霞;胡章立;;表达人组织激肽释放酶基因莱茵衣藻的构建与功能研究[A];广东省植物学会第十九期学术研讨会论文集[C];2010年
7 宋燕子;贾彬;林柏成;胡章立;黄瑛;;莱茵衣藻酰基辅酶A合成酶功能验证及其调控脂肪酸代谢的研究[A];广东省遗传学会第九届代表大会暨学术研讨会论文及摘要汇编[C];2014年
8 兰利琼;卿人韦;吴巧玉;周密;刘翔;刘佳;刘萍;耿晓娟;傅华龙;;沙角衣藻的抗菌活性研究[A];中国海洋湖沼学会藻类学分会第七届会员大会暨第十四次学术讨论会论文摘要集[C];2007年
9 张玉兰;;衣藻视紫红质的位置及其在细胞分裂周期中的动态变化[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
10 徐田枚;张洪涛;吾甫尔·米吉提;艾尔肯·热合蔓;A.S.Chunaev;;莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)pds基因突变株的突变性质分析[A];第二届中国青年学者微生物遗传学学术研讨会论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前1条
1 本报驻美国记者 毛黎;美国也盯上了海藻[N];科技日报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李菲菲;编码基因CrAC3在莱氏衣藻中的转化与表达[D];西北农林科技大学;2014年
2 刘晨临;日本凋毛藻表达序列标记及南极衣藻分子系统学研究[D];中国海洋大学;2004年
3 丁燏;南极硅藻GJ01和南极衣藻ICE-L谷胱甘肽及其相关酶的研究[D];中国海洋大学;2005年
4 苏忠亮;一种抗肿瘤蛋白基因在衣藻叶绿体中的重组与表达[D];浙江大学;2005年
5 朱毅;微藻光合放氢的生理生化调控及生物技术研究[D];中国科学院研究生院(植物研究所);2006年
6 吕娜;雪衣藻响应和适应环境胁迫分子调节的多组学研究[D];华南理工大学;2014年
7 陈杏洲;衣藻叶绿体表达系统的改造和应用及木聚糖酶工程菌的发酵研究[D];华中农业大学;2009年
8 左照江;乙酸及NaCl和Na_2CO_3胁迫对莱茵衣藻的影响[D];南开大学;2012年
9 张丽萍;NO与CO调节莱茵衣藻铜铁胁迫[D];南京农业大学;2011年
10 许丽丽;莱茵衣藻与根瘤菌共培养提高产氢及其生理生态学机理[D];华东师范大学;2014年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘俊希;莱茵衣藻温度敏感型细胞分裂周期变异对其中性脂肪积累的影响[D];沈阳农业大学;2018年
2 陈斌;莱茵衣藻耐镉突变体的筛选及遗传分析[D];江汉大学;2018年
3 李松;莱茵衣藻泛素化蛋白提取纯化及功能验证[D];大连工业大学;2017年
4 黄婷婷;亚硫酸钠促进莱茵衣藻生长与光合制氢的功能机理研究[D];上海师范大学;2017年
5 胡佳南;莱茵衣藻对水环境中盐酸四环素的去除研究[D];山东农业大学;2017年
6 李捷;四环素对莱茵衣藻生长及去除再生水中营养物质的影响[D];山东农业大学;2017年
7 吴敏;基于多基因调控的莱茵衣藻油脂代谢及分泌的研究[D];深圳大学;2017年
8 卢玉婷;传染性造血器官坏死病病毒糖蛋白重组莱茵衣藻的构建及免疫特性初步研究[D];吉林农业大学;2015年
9 秦琅;莱茵衣藻放氢过程中氢子的来源研究[D];首都师范大学;2012年
10 李晓旭;藻菌共培养对莱茵衣藻产氢的影响[D];上海师范大学;2012年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026