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《南方医科大学》 2011年
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低强度高频率振动对成骨细胞生物学特性的影响及机制

查丁胜  
【摘要】:研究背景 骨质疏松症是中老年人群的常见病,以全身骨量减少,骨组织的微细结构破坏,骨强度降低和骨折危险性增高为特征。骨质疏松症最大的危害是骨质疏松性骨折,其中以髋部骨折危害最大,不仅髋部活动功能损伤明显,而且死亡率高。随着老龄化社会的到来,骨质疏松症防治的临床与基础研究已成为医学界研究的热点。运动是预防和治疗骨质疏松的重要因素。近年来,具有无创、副反应小、依从性好等特点的物理因子疗法防治骨质疏松症逐渐受到重视。全身振动运动是振动疗法中的一种,是指借助于振动仪器,使振动刺激通过下肢或躯干作用于全身,使机体整体振动,以达到防治疾病目的的方法。对去卵巢模型动物、低骨量人群及绝经后女性的研究显示,低于引起组织损伤的机械振动信号---低强度高频率振动(Low-magnitude, high-frequency vibration, LMHFV),且有较好的增加骨形成和抑制骨吸收作用。作为一种治疗骨质疏松症的新方法,LMHFV具有无创、副反应小、高依从性的特点,能降低骨质疏松性骨折的发生率,在骨质疏松症的预防和治疗领域越来越受到重视。但是,LMHFV增加骨形成、抑制骨吸收的具体机制仍不清楚。 研究证明,振动应力可以影响成骨细胞的生物学特性,但振动应力影响成骨细胞生物学特性的具体机制尚不清楚。因此,研究振动应力影响成骨细胞生物学特性的分子机制,以其作为切入点进一步阐明LMHFV预防和治疗骨质疏松的机制,将为全身振动运动预防和治疗骨质疏松提供科学依据。 本研究通过自行研制的细胞振动仪,对体外培养的成骨前体MC3T3-E1细胞施加低强度(0.3g)、不同高频率(0、30、45、60、90Hz)振动(LMHFV),结合分子生物学检测技术,观察LMHFV对成骨前体MC3T3-E1细胞生物学特性的影响及其机制的初步研究。研究内容如下: 目的 1.研究低强度高频率振动(LMHFV)对成骨细胞生物学特性的影响。 2.研究环氧合酶-2(COX-2)在LMHFV影响成骨细胞生物学特性中的作甩。 3。研究LMHFV诱导成骨细胞COX-2蛋白表达的信号转导机制。 方法 I。低强度、高频率振动(LMHFV)影响成骨细胞生物学特性的作用 1. LMHFV影响成骨细胞OPG/RANKL比率的作用 (1)LMHFV对成骨细胞OPG/RANKL比率的影响 对MC3T3-E1细胞施加频率0、30、45、60、90Hz,强度0.3g,时间30min的振动,分别于振动后0、0.5、1.5、3、6h收集细胞培养上清液。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测LMHFV加载后不同时间MC3T3-E1细胞分泌可溶性OPG、RANKL的情况。通过计算OPG/RANKL比率,将增加OPG/RANKL比率最高的振动频率做为本实验继续研究的频率。 (2)LMHFV加载成骨细胞条件培养基(Conditioned medium, CM)对破骨细胞分化成熟的影响 LMHFV (30Hz)加载MC3T3-E1细胞后含OPG/RANKL比率最高的条件培养基(Conditioned medium, CM30HZ)及LMHFV (OHz)加载后的条件培养基(Conditioned medium, CM0Hz),分别与含40ng/ml sRANKL、20ng/ml M-CSF的1640培养基按体积比1:1混合形成混合培养基。将破骨细胞前体RAW264.7细胞随机分为Control组(CM0Hz)、实验组(CM30Hz),混合培养基分别诱导破骨细胞前体RAW264.7细胞分化5、7天。①实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative PCR, qPCR)分别检测第5、7天各组抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP) mRNA的表达水平;②TRAP检测试剂盒检测第5、7天各组TRAP活性;③TRAP染色计算第7天各组多核破骨细胞形成数目。 2. LMHFV影响成骨细胞分化的作用 (1) LMHFV对成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN) mRNA表达的影响: MC3T3-E1细胞随机分为Control组(0Hz)、LMHFV组(30Hz), Control组不予振动刺激,LMHFV组给予振动刺激(0.3g,30Hz,30min/day),分别加载4、8天后,收集细胞,提取细胞总RNA。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative PCR, qPCR)检测ALP mRNA、OCN mRNA表达,以GAPDH(?)内对照,分析ALP mRNA、OCN mRNA相对表达的变化。 (2) LMHFV对成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素(OCN)表达的影响: MC3T3-E1细胞随机分为Control组(0Hz)、LMHFV组(30Hz), Control组不予振动刺激,LMHFV组给予振动刺激(0.3g,30Hz,30min/day),分别加载4、8天后,收集细胞,提取细胞总蛋白,ALP检测试剂盒检测ALP活性;OCN ELISA试剂盒检测OCN表达;ALP活性、OCN表达均以细胞总蛋白量标准化,分析ALP活性、OCN表达相对改变的变化。 (3) LMHFV对成骨细胞矿化结节形成的影响: MC3T3-E1细胞随机分为Control组(0Hz)、LMHFV组(30Hz), Control组不予振动刺激,LMHFV组给予振动刺激(0.3g,30Hz,30min/day),培养14天后,茜素红染色观察矿化结节形成情况。 Ⅱ.环氧合酶(COX-2)在LMHFV影响成骨细胞生物学特性中的作用 1. LMHFV对成骨细胞COX-2 mRNA及蛋白表达的影响 MC3T3-E1细胞随机分为Control组(OHz). LMHFV组(30Hz), Control组不予振动刺激,LMHFV组给予振动刺激(0.3g,30Hz,30min)。分别于LMHFV干预结束后0、0.5、1.5、3、6h-①提取细胞总RNA, qPCR法检测COX-2 mRNA表达,以GAPDH为内对照,分析COX-2 mRNA相对表达的变化;②提取细胞总蛋白,Western blot检测COX-2蛋白表达,以β-actin为内对照,分析COX-2蛋白相对表达的变化。 2. LMHFV对成骨细胞表达PGE2活性的影响 MC3T3-E1细胞随机分为Control组(OHz)、LMHFV组(30Hz), Control组不予振动刺激,LMHFV组给予振动刺激(0.3g,30Hz,30min)。分别于LMHFV加载结束后0、0.5、1.5、3、6h收集细胞培养上清、提取细胞总蛋白;在COX-2特异性抑制剂NS-398抑制实验中,MC3T3-E1细胞先与10μM NS-398孵育1h,再施加LMHFV刺激,在LMHFV干预结束后0.5h分别收集细胞培养上清、提取细胞总蛋白;ELISA法检测细胞培养上清液中PGE2活性,并以细胞总蛋白量标准化,分析PGE2活性相对表达的变化。 3。COX-2特异性抑制剂NS-398对LMHFV增加成骨细胞OPG分泌的影响 MC3T3-E1细胞随机分为Control (OHz)+VEHICLE组、Control (OHz) +NS-398组、LMHFV (30Hz)+VEHICLE组、LMHFV (30Hz)+NS-398组。VEHICLE为溶解NS-398的等量DMSO, MC3T3-E1细胞先与10μMNS-398孵育1h,再施加LMHFV (0.3g,30Hz,30min)刺激,在LMHFV干预结束后6h分别收集细胞培养上清、提取细胞总蛋白;ELISA法检测细胞培养上清液中可溶性OPG活性,并以细胞总蛋白量标准化,分析OPG分泌的变化。 4。COX-2特异性抑制剂NS-398对LMHFV诱导成骨细胞分化作用的影响 MC3T3-E1细胞随机分为Control (OHz)+VEHICLE组、Control (OHz)+NS-398组、LMHFV (30Hz)+VEHICLE组、LMHFV (30Hz)+NS-398组。干预方法为:对细胞施加8天的LMHFV (0.3g,30Hz,30min/day)刺激,VEHICLE为溶解NS-398的等量DMSO,细胞与10μM NS-398孵育8天,干预结束后,分别收集细胞、提取细胞总蛋白;按前述方法分别检测ALP活性、OCN表达,并以细胞总蛋白量标准化,分析ALP活性、OCN表达相对改变的变化。 Ⅲ. LMHFV诱导成骨细胞COX-2表达的信号转导机制 1. LMHFV诱导成骨细胞COX-2表达的信号转导途径初探 分别于MC3T3-E1细胞施加LMHFV (0.3g,30Hz,30min)刺激前1h加入各种信号通路抑制剂NS-398、Staurosporine、H-89、U0126、SP600125、SB203580,于LMHFV加载结束后3小时,提取细胞总蛋白。Western blot检测COX-2蛋白表达,以β-actin为内对照,分析COX-2蛋白相对表达的变化。 2. cAMP/PKA信号通路对LMHFV诱导成骨细胞COX-2表达的影响 (1) LMHFV对成骨细胞PKA信号通路的影响 MC3T3-E1细胞随机分为Control组(OHz)、LMHFV组(30Hz), Control组不予振动刺激,LMHFV组给予振动刺激(0.3g,30Hz,30min),分别于LMHFV加载结束后0、0.5、1.5、3、6h收集细胞,提取细胞总蛋白。Western blot检测PKA总蛋白及磷酸化蛋白含量,以总蛋白为对照,分析PKA磷酸化蛋白含量相对值的变化。 (2) LMHFV对成骨细胞内cAMP水平的影响 MC3T3-E1细胞随机分为Control组(0Hz)、LMHFV组(30Hz), Control组不予振动刺激,LMHFV组给予振动刺激(0.3g,30Hz,30min),分别于LMHFV加载结束后0、0.5、1.5、3、6h收集细胞。cAMP ELISA试剂盒检测LMHFV对成骨细胞内cAMP水平的影响。 (3) LMHFV加载成骨细胞含PGE2条件培养基(Conditioned medium,CMPEG2)对成骨细胞内cAMP水平的影响: LMHFV加载MC3T3-E1细胞结束后0.5h,分别收集0Hz、30Hz组含PGE2的条件培养基(CMPGE2),随机将MC3T3-E1细胞分为CM0Hz组、CM30Hz组,与相应的CMPGE2分别共孵育0、0.5、1.5、3、6h后收集细胞,cAMP ELISA检测试剂盒检测CMPGE2对成骨细胞内cAMP水平的影响。 (4)腺苷酸环化酶激活剂(Forskolin, FSK)对成骨细胞内cAMP水平的影响: MC3T3-E1细胞与15μM FSK分别共孵育0、0.5、1.5、3、6h或分别与0、5、10、15、20μM FSK共孵育3h后,按cAMP ELISA检测试剂盒要求收集细胞,检测含FSK对成骨细胞内cAMP水平的影响。 (5)PKA抑制剂对LMHFV、FSK、CMPGE2诱导成骨细胞COX-2蛋白表达的影响 在MC3T3-E1细胞接受各种干预因素前加入30μM H-89孵育1h,分别于LMHFV (0.3g、30Hz、30min)加载细胞后3h、15μM FSK刺激细胞后3h、CMPGE2孵育细胞后3h,收集细胞,提取总蛋白。Western blot检测COX-2蛋白表达情况,β-actin为内对照,分析COX-2蛋白相对表达的变化。 结果 Ⅰ。低强度高频率振动(LMHFV)影响成骨细胞生物学特性的作用 1. LMHFV影响成骨细胞OPG/RANKL比率的作用 (1) LMHFV对成骨细胞表达OPG/RANKL比率的影响: LMHFV加载结束后6h,与0Hz相比,30Hz LMHFV能明显促进成骨细胞分泌OPG(P0.001),但对RANKL的分泌无明显影响,30Hz LMHFV提高成骨细胞OPG/RANKL比率最显著(P0.001)。 (2) LMHFV加载成骨细胞条件培养基(Conditioned medium, CM)对破骨细胞分化成熟的影响 LMHFV加载结束后6小时,与0Hz相比,30Hz形成的CM含OPG/RANKL比率最高。①与含CM0Hz的混合培养基组相比,在第5天,CM30Hz组TRAP mRNA及活性均较CM0Hz组低,差异无统计学意义(P=0.069,P=0.160);在第7天,CM30Hz组TRAP mRNA及活性均较CM0Hz组低,差异有统计学意义(P0.001,P=0.043);②与含CM0Hz的混合培养基组相比,在第7天,CM30Hz组形成的多核(≥3个核)破骨细胞数量减少,其中10核以上破骨细胞数量减少的差异有统计学意义(P0.001)。 2. LMHFV影响成骨细胞分化的作用 (1) LMHFV对成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN) mRNA表达的影响: LMHFV加载MC3T3-E1细胞4天,与0Hz组相比,30Hz组增加MC3T3-E1细胞ALP mRNA水平,其差异有统计学意义(P=0.006); LMHFV加载MC3T3-E1细胞8天,与0Hz组相比,30Hz组增加MC3T3-E1细胞ALP mRNA及OCN mRNA水平,其差异均有统计学意义(P=0.003,P=0.001)。 (2) LMHFV对成骨细胞ALP活性、OCN表达的影响: LMHFV加载MC3T3-E1细胞4天,与0Hz组相比,30Hz组增加MC3T3-E1细胞ALP活性,其差异有统计学意义(P=0.031);LMHFV加载MC3T3-E1细胞8天,与0Hz组相比,30Hz组增加MC3T3-El细胞ALP活性及OCN表达,其差异均有统计学意义(P=0.003,P=0.001)。 (3) LMHFV对成骨细胞矿化结节形成的影响: 生长至80%-90%汇合的MC3T3-E1细胞,经OHz.30Hz LMHFV加载14天后,茜素红染色结果显示0Hz组、30Hz组LMHFV均可见橘红色钙化结节,但30Hz组钙化结节数目较0Hz组多,颜色较0Hz组深。 Ⅱ.COX-2在LMHFV影响成骨细胞生物学特性中的作用 1.LMHFV对成骨细胞COX-2 mRNA及蛋白表达的影响 (1)与Control组相比,30Hz LMHFV加载成骨细胞后0、0.5、1.5、3、6h,振动组COX-2 mRNA表达均较Control组增加(all P0.01),其中LMHFV加载后0.5h COX-2 mRNA表达水平最高(P0.001); (2)与Control组相比,30Hz LMHFV加载成骨细胞后0.5、1.5、3、6h,振动组COX-2蛋白表达均较Control组增加(all P0.01),其中LMHFV加载后3h COX-2蛋白表达水平达到高峰(P0.01)。 2. LMHFV对成骨细胞PGE2活性表达的影响 与Control组相比,30Hz LMHFV加载成骨细胞后0、0.5、1.5、3、6h,振动组PGE2活性表达均较Control组增加(all P0.05),其中LMHFV加载后0.5h PGE2活性表达水平最高(P=0.032)。LMHFV加载后0.5h,COX-2特异性抑制剂NS-398对LMHFV诱导MC3T3-E1细胞PGE2活性增加具有明显的抑制作用(P0.001)。 3.COX-2特异性抑制剂对LMHFV增加成骨细胞OPG分泌的影响 COX-2特异性抑制剂NS-398对30Hz LMHFV加载成骨细胞后6h OPG的分泌具有抑制作用(P=0.012),NS-398可抑制LMHFV诱导的OPG/RANKL比率升高。 4.COX-2特异性抑制剂对LMHFV诱导成骨细胞分化作用的影响 对30Hz LMHFV加载成骨细胞8天,COX-2特异性抑制剂NS-398可明显抑制LMHFV诱导的ALP活性、OCN表达增加(P=0.005,P=0.001)。 Ⅲ. LMHFV诱导成骨细胞COX-2蛋白表达的信号转导机制 1.LMHFV诱导成骨细胞COX-2蛋白表达的信号转导途径初探 COX-2特异性抑制剂NS-398、PKA特异性抑制剂H-89、ERK1/2特异性抑制剂U0126、p38.特异性抑制剂SB203580均可抑制LMHFV诱导成骨细胞COX-2蛋白的表达(a11 P0.05),而PKC特异性抑制剂Staurosporine和JNK特异性抑制剂SP600125对LMHFV诱导成骨细胞COX-2蛋白表达无明显影响。 2. cAMP/PKA信号通路对LMHFV诱导成骨细胞COX-2蛋白表达的影响 (1) LMHFV对成骨细胞PKA信号通路的影响 与Control组相比,30Hz LMHFV加载成骨细胞后0、0.5、1.5、3h,LMHFV组PKA磷酸化活性均较Control组高,其差异均有统计学意义(allP0.01),其中LMHFV加载后1.5h PKA磷酸化水平最高(P0.001)。 (2) LMHFV对成骨细胞内cAMP水平的影响 与Control组相比,30Hz LMHFV加载成骨细胞后0、0.5、1.5h,振动组细胞内cAMP水平均较Control组增加(P0.001,P=001,P=008),其中LMHFV加载后0.5h cAMP水平最高(P=008)。 (3) LMHFV加载成骨细胞含PGE2条件培养基(Conditioned medium, CMPGE2)对成骨细胞内cAMP水平的影响: LMHFV加载成骨细胞后0.5h形成的CM含PGE2水平最高,与Control组相比,CMPGE2孵育细胞0.5、1.5、3h后,CMPGE2组细胞内cAMP水平均较Control组高(all P0.05),其中在1.5h, CMPGE2组细胞内cAMP水平最高(P0.05)。 (4)腺苷酸环化酶激活剂(Forskolin, FSK)对成骨细胞内cAMP水平的影响: 与Control组相比,15μM FSK与成骨细胞孵育0.5、1.5、3h后,FSK组细胞内cAMP水平较对照组明显升高(P=0.003,P0.001,P0.001),其中在3h, FSK组细胞内cAMP水平最高。 (5)PKA抑制剂对LMHFV、FSK、CMPGE2诱导成骨细胞COX-2蛋白表达的影响 与Control组相比,LMHFV, FSK及CMPGE2均能诱导成骨细胞COX-2蛋白表达(P0.001,P=001,P=008),PKA特异性抑制剂H-89均能抑制LMHFV,FSK及CMPGE2诱导成骨细胞COX-2蛋白的表达(P=001,P=001,P0.001)。 结论 1.低强度(0.3g),高频率(30Hz)振动(LMHFV)对成骨前体MC3T3-E1细胞生物学特性具有积极的影响:增加MC3T3-E1细胞OPG分泌,提高OPG/RANKL浓度比;促进MC3T3-E1细胞成骨分化。 2.COX-2信号参与了LMHFV对成骨细胞生物学特性的影响。LMHFV诱导MC3T3-E1细胞COX-2蛋白表达可能通过PKA、ERK1/2及p38信号通路;PGE2的自分泌作用在LMHFV通过PGE2/cAMP/PKA信号通路诱导MC3T3-E1细胞COX-2蛋白表达中起重要作用。
【学位授予单位】:南方医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R580

【引证文献】
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1 黄鹏;不同频率振动刺激对废用性肌萎缩大鼠康复效果及机制研究[D];北京体育大学;2012年
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1 任可;张春才;汪光晔;赵建宁;陆维举;李波;;持续动态压应力下骨折愈合时环氧化酶及相关信号分子的表达[J];第四军医大学学报;2007年19期
2 刘云山;骨钙素分子生物学研究进展[J];国外医学.内分泌学分册;1995年03期
3 吴文苑;骨型碱性磷酸酶的检测方法和临床应用[J];国外医学(临床生物化学与检验学分册);1999年02期
4 李志香;张春林;谈诚;;30Hz全身振动对骨质疏松的影响[J];航天医学与医学工程;2007年02期
5 郑晓辉,方秀斌;骨钙素的基础与应用研究进展[J];解剖科学进展;1999年04期
6 任可;张春才;赵建宁;陈勇;孙剑伟;李波;;持续动态压应力下骨折愈合时软骨内骨化的特点及其机制[J];解剖学杂志;2008年04期
7 徐青,田秀巧,张会丰;成骨细胞分化产物及其生化标志研究进展[J];临床荟萃;2003年01期
8 葛成,杨连甲,刘宝林,赵丽君;大鼠成骨细胞中蛋白激酶A的表达及信号作用[J];临床口腔医学杂志;2002年06期
9 唐林;林珠;李永明;;不同大小机械牵张力对MC3T3-E1成骨样细胞MMP-13/TIMP-1mRNA表达的影响[J];中国美容医学;2006年04期
10 郑陆;王智强;;运动与骨骼的力学信号转导[J];山东体育学院学报;2009年02期
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1 任可;三维记忆应力场下长骨干骨折愈合的生物学特征与相关成骨信号机制的研究[D];第二军医大学;2006年
2 唐林;不同大小机械牵张力对成骨细胞生物学特性的影响[D];第四军医大学;2006年
3 米晓晖;张、压应力刺激下成骨细胞早期应答及力学信号转导机制的初步研究[D];四川大学;2006年
4 权金星;前列腺素E_2对大鼠成骨细胞OCIL基因表达的调节及其分子机制的研究[D];天津医科大学;2007年
5 钟招明;生长分化因子-5诱导人黄韧带细胞成骨分化的作用及机制[D];南方医科大学;2009年
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3 张廷秀;成骨细胞对力学过载和少载的响应[D];重庆大学;2009年
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1 赵有红;;荷斯坦奶牛和藏系绵羊不同怀孕期血清骨型碱性磷酸酶活性的测定[J];安徽农业科学;2008年21期
2 肖锦华,王亚萍,孙钧铭,华文进;甲状腺功能亢进患者骨代谢指标和甲状腺激素水平变化及其临床意义[J];标记免疫分析与临床;2002年02期
3 徐成;阮狄克;张超;;机械振动对骨骼系统的生理作用及其应用的研究进展[J];北京医学;2009年07期
4 巩沅鑫;赵先英;刘毅敏;;成骨细胞生物矿化过程中的调控机制[J];重庆医学;2009年05期
5 梁春辉;菅景颖;张志胜;;胶原多肽螯合钙壮骨作用研究[J];河北农业大学学报;2010年05期
6 杨海英,董俊华,孔春研,王进;糖皮质激素对肾病综合征患儿成骨细胞功能的影响[J];中国当代儿科杂志;2005年02期
7 王凤翔;索士云;胡志强;董桂芳;佟建军;焦健;王泓;;绝经后膝关节骨性关节炎综合治疗的研究进展[J];中国医药导刊;2010年12期
8 范义湘,罗荣城,李贵平,黄凯;骨显像联合血清骨型碱性磷酸酶诊断恶性肿瘤骨转移[J];第一军医大学学报;2004年07期
9 韩锋;邝建;杨华章;;素尔松对大鼠成骨细胞增殖分化的影响[J];南方医科大学学报;2009年07期
10 江俊;闫福华;骆凯;钟泉;李艳芬;赵欣;;hBMP-7基因瞬时转染绝经后骨质疏松大鼠骨髓基质细胞的表达及对其生物学活性的影响[J];福建医科大学学报;2011年04期
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1 李艳萍;高宏;;恶性肿瘤骨转移相关生化指标研究[A];第十三届中国科协年会第18分会场-癌症流行病趋势和防控策略研讨会论文集[C];2011年
2 蒋晓萍;;细胞膜骨架蛋白Integrin与信号传导及在运动训练中的研究进展[A];2007全国运动生理学论文报告会论文集[C];2007年
3 施炳培;卜怀娣;史惟;杨红;王素娟;朱珍;赵瑞芳;;针刺治疗小儿脑性瘫痪的临床研究[A];中国康复医学会首届儿童康复学术会议暨中国残疾人康复协会第八届小儿脑瘫学术会议论文汇编[C];2004年
4 袁泉;李慨;侯书军;;机械振动与截肢康复强化技术[A];第七届全国康复医学工程与康复工程学术研讨会论文集[C];2010年
5 李东杰;贾晓明;;低温保存皮肤的细胞骨架在细胞力传导中的作用研究进展[A];第五届全国低温生物医学及器械学术大会会议论文集[C];2006年
6 曹克勇;叶积飞;方彩莲;;不同强度的负重对股骨干骨折愈合的影响[A];2013浙江省物理医学与康复学学术年会暨第八届浙江省康复医学发展论坛论文集[C];2013年
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3 卓祥龙;新型nanoHA涂层BCP人工骨的制备及在兔脊柱融合模型中的应用[D];中南大学;2011年
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8 禹宝庆;桡骨远端解剖型记忆聚合器的研制与临床应用[D];第二军医大学;2002年
9 唐丽灵;周期性机械拉伸对大鼠成骨细胞生理活性和力学性质的影响[D];重庆大学;2002年
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8 吴犀翎;补肾健脾活血法治疗原发性骨质疏松症的随机对照试验[D];北京中医药大学;2011年
9 程国政;正弦电磁场对成骨细胞分化成熟的影响及其机制研究[D];兰州理工大学;2011年
10 杜丹丹;乳铁蛋白对去卵巢大鼠骨代谢和相关细胞因子的影响[D];福建医科大学;2011年
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1 陈运生;王德;孙玲玲;陈月生;赵维玲;马祖祥;;原发性肾病综合征患儿血清IGF-Ⅰ和血脂变化及相关性研究[J];蚌埠医学院学报;2006年04期
2 陈伟婷;王志中;李晓浦;;振动刺激对肌肉疲劳进程的影响[J];北京生物医学工程;2007年01期
3 尹军;钟家银;杜艳艳;周志雄;;踝关节局部振动训练与肌力变化影响研究[J];北京体育大学学报;2010年06期
4 古松;尹洪满;薛维亮;王德燕;;振动力量训练提高排球运动员专项素质研究[J];北京体育大学学报;2010年06期
5 黄鹏;魏宏文;叶晶;矫玮;;振动刺激对废用性肌萎缩大鼠肌纤维形态结构的影响[J];北京体育大学学报;2011年02期
6 曾缨,张成,刘克玄,李才明,冯善伟,李群,柳太云,黄文;成肌调节因子MyoD与myogenin在肌肉损伤修复过程的动态变化[J];第一军医大学学报;2004年05期
7 杜广宇;赵文志;何盛为;米立东;张路;孙传秀;孙雪刚;;低频振动刺激BMSCs修复骨缺损在体实验研究[J];中国骨与关节损伤杂志;2011年12期
8 陈景藻;次声的产生及生物学效应[J];国外医学(物理医学与康复学分册);1999年01期
9 邢国刚,樊小力,宋新爱;废用性肌肉萎缩的研究[J];国外医学(物理医学与康复学分册);2000年04期
10 杨威;失重性肌萎缩及其对抗措施研究进展[J];国外医学(物理医学与康复学分册);2003年03期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 陈谦;;振动训练国内外研究近况[A];浙江省第十三届运动会体育科学论文报告会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 史仍飞;振动训练对大鼠骨骼肌运动能力的影响及其机制探讨[D];第二军医大学;2007年
2 朱晗;IGF-I和运动诱导骨骼肌肥大的机理研究[D];北京体育大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 孙越颖;不同频率振动训练对排球运动员下肢及核心力量的影响[D];北京体育大学;2011年
2 杜育峰;两种废用性肌萎缩动物模型与几种肌纤维分型方法的比较研究[D];西北大学;2006年
3 王静;抗阻练习对衰老大鼠骨骼肌中IGF-I、MGF及肌肉生长抑制素的影响[D];华东师范大学;2008年
4 廖艳萍;大强度离心运动对发育期大鼠骨骼肌纤维类型及MyoD、myogenin表达的影响[D];湖南师范大学;2009年
5 陈健;大鼠失重性肌萎缩运动恢复中MHC的转变和myogenin的作用[D];华东师范大学;2009年
6 徐勇;振动力量训练对排球运动员肩、肘关节肌力变化影响的实验研究[D];首都体育学院;2010年
7 吴新强;振动力量训练对标枪运动员肩、肘关节肌力变化影响的实验研究[D];首都体育学院;2010年
8 任媛媛;后肢悬吊大鼠骨骼肌废用性肌萎缩的蛋白组学研究[D];北京体育大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 叶超群;纪树荣;钟兴明;;RANKL-RANK-OPG骨调节轴[J];首都体育学院学报;2006年06期
2 王忠;高毅;汪艳;潘明新;;人骨髓间充质干细胞的分离培养与鉴定[J];中华神经医学杂志;2006年10期
3 张春才,许硕贵,王家林,禹宝庆,王秋根,张秋林,梁雨田,王仁;上肢骨干天鹅型记忆接骨器的设计与临床应用[J];第二军医大学学报;2001年10期
4 许硕贵,张春才,苏佳灿,刘晓华,吴亦农,吴建国,薛召军,丁祖泉;天鹅型记忆接骨器治疗肱骨骨折和骨不连的三维有限元分析[J];第二军医大学学报;2001年10期
5 许硕贵,张春才,苏佳灿,曾伟明,顾绍德,方如华,张林春;天鹅型记忆接骨器治疗肱骨骨折和骨不连的生物力学研究[J];第二军医大学学报;2001年10期
6 高堂成,张春才,康庆林,许硕贵,倪灿荣,王志伟,付青格;天鹅型记忆接骨器内固定对骨折局部转化生长因子β表达的影响[J];第二军医大学学报;2004年03期
7 高堂成,张春才,康庆林,倪灿荣,王志伟,许硕贵,沈洪兴;持续加压应力对兔骨折局部IGF-和骨钙素含量的影响[J];第二军医大学学报;2004年11期
8 胡蕴玉;成纤维细胞成骨能力的研究[J];第四军医大学学报;2001年11期
9 王哲,王全平,张俊华,李靖,吕荣;骨形成蛋白在黄韧带骨化中的表达定位[J];第四军医大学学报;2002年04期
10 傅青格,张春才,许硕贵,高堂成,宝建中,陆月良,万岷,王冠军;天鹅型记忆接骨器与钢板内固定术后软组织界膜的生物相容性[J];第四军医大学学报;2004年15期
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 唐丽灵;周期性机械拉伸对大鼠成骨细胞生理活性和力学性质的影响[D];重庆大学;2002年
2 郑翼;机械力作用下成骨细胞的早期应答反应及力学信号转导机制的初步研究[D];四川大学;2004年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王慧明,王模堂,王翰章,李芃;生物陶瓷对人胚成骨细胞体外生长及代谢影响的研究[J];华西口腔医学杂志;1994年03期
2 李可心,尚天裕,董福慧,张碧辉,陈楚楚,贝时璋,钱民全,赵笃风;间断压力对离体培养成骨细胞作用的研究[J];中国骨伤;1996年05期
3 王卫华,于世凤,高岩,庞淑珍,王晶;c─Fos、c─Jun在兔成骨样细胞内的表达[J];中国骨质疏松杂志;1996年03期
4 徐晋斌,樊学军,张火圣,吴文周,杨桂通;微管吸吮和半无限体模型在鼠成骨细胞粘弹性研究中的应用[J];生物物理学报;1998年02期
5 张伟国,刘正;氟和地塞米松对脱矿牙根面上生长的成骨细胞表型发育的影响[J];上海口腔医学;1998年02期
6 黄国伟,康静,高玉霞,董亚利;铝对体外培养人胚成骨细胞毒作用的形态学观察[J];天津医科大学学报;1999年04期
7 邓力,吴立志,陈槐卿;脉冲对成骨细胞和内皮细胞增殖的影响[J];医用生物力学;2000年02期
8 唐海涛!100050,唐海!100050,罗先正!100050,徐雍!100050,唐淑珍!100050;骨疏康对成骨细胞刺激作用的研究[J];中国骨质疏松杂志;2000年02期
9 杨维东!710032西安,史培良!710032西安,羊书勇!710032西安,陈希哲!710032西安,唐立辉!710032西安,毛天球!710032西安,顾晓明!710032西安;改善珊瑚表面成骨细胞粘附和增殖的研究[J];解放军医学杂志;2001年04期
10 张西正!300161天津,康少华!300161天津,匡震邦,蔡绍皙,王远亮,徐世荣,黄岂平;单向循环拉伸应变作用下成骨细胞动力学响应的实验研究[J];中华创伤杂志;2001年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 祝振华;;缺锌对生长期大鼠长骨成骨细胞维生素D受体及钙结合蛋白基因表达的影响[A];中华医学会第八次全国小儿外科学术会论文集[C];2010年
2 邹海滨;苏宜香;;大豆异黄酮类对体外培养大鼠成骨细胞的影响[A];中国营养学会第五届妇幼营养学术会议论文摘要汇编[C];2002年
3 杨茗;傅风华;张树平;;菝葜皂苷元对成骨细胞活性的影响[A];2008年全国抗衰老与老年痴呆学术会议论文集[C];2008年
4 全仁夫;杨迪生;苗旭东;李伟;吴晓春;汪宏斌;;二氧化锆梯度复合羟基磷灰石生物材料对大鼠成骨细胞体外活性的影响[A];2008年浙江省骨科学学术年会论文汇编[C];2008年
5 刘琴丽;孙树津;霍波;龙勉;;成骨细胞铺展形状和面积对其凋亡的影响[A];第九届全国生物力学学术会议论文汇编[C];2009年
6 顾琪;张学军;贺恒益;朱汉民;;体外培养大鼠颅骨成骨细胞生物学特性的初步研究[A];中国细胞生物学学会第七次会议论文摘要汇编[C];1999年
7 胡金家;王曼莹;;含药血清的制备及其对成骨细胞代谢的影响[A];中国生物化学与分子生物学会第八届会员代表大会暨全国学术会议论文摘要集[C];2001年
8 任高宏;林昂如;裴国献;胡罢生;;高分子量聚乙烯对成骨细胞活性及新骨形成的影响[A];中国康复医学会修复重建外科专业委员会第十四次全国学术交流会论文集[C];2004年
9 张保卫;李静;张富强;商庆新;曹谊林;;体外培养人骨髓基质干细胞诱导为成骨细胞的超微结构变化[A];2004年上海市口腔医学学术年会论文汇编[C];2004年
10 赵淑贤;;外周血干细胞与组织工程骨移植修复犬牙周骨缺损区转化生长因子-B的表达[A];中华口腔医学会老年口腔医学专业委员会换届选举暨第四届全国老年口腔医学学术研讨会论文汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 钱铮;日本利用人类胎盘培育出成骨细胞[N];中国劳动保障报;2006年
2 钱铮;日本利用人类胎盘培育出成骨细胞[N];医药经济报;2006年
3 杨丽佳通讯员 周宁人;骨折不愈合缘于成骨细胞“爬不动”[N];健康报;2008年
4 杨丽佳周宁人;骨折不愈合 缘于成骨细胞“爬不动”[N];大众卫生报;2008年
5 杨建辉;雌三醇对成骨细胞保护作用的研究[N];中国中医药报;2004年
6 香港麦迪信医学出版有限公司供稿;多因素影响骨代谢平衡[N];医药经济报;2003年
7 王婷 张金超 杨梦甦 肖培根;颇具潜力的抗骨质疏松症中药[N];中国医药报;2006年
8 指导专家 江苏省人民医院骨科特聘教授 殷国勇 重庆市中医骨科医院 向杰 副主任医师;小腿骨折10%“长不好”[N];医药导报;2008年
9 本报特约记者 吴远团;“林黛玉”要及早防驼背[N];健康时报;2005年
10 ;老人易患骨质疏松是何因[N];医药养生保健报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 吕红兵;颅神经嵴细胞的培养特性及向神经细胞、成骨细胞的定向诱导分化[D];第四军医大学;2002年
2 谭晓红;成骨细胞特异性Smad4基因剔除导致小鼠早期发生骨质疏松[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年
3 曹强;以藻酸钙为载体的可注射性组织工程骨研究[D];中国人民解放军第四军医大学;2003年
4 李良;力学刺激对绝经后骨质疏松大鼠成骨细胞作用的细胞分子基础[D];四川大学;2004年
5 罗晓中;组织工程骨低温保存的实验研究[D];四川大学;2005年
6 丁仲鹃;种植体表面微形态对骨形成影响的研究[D];四川大学;2004年
7 刘颖;应力刺激下成骨细胞c-fos基因表达及影响因素的实验研究[D];四川大学;2004年
8 仇丽鸿;静磁场对大鼠成骨细胞及其牙周炎组织影响的研究[D];中国医科大学;2004年
9 钟近洁;氟对成骨细胞增殖及其MCM3基因表达的影响[D];新疆医科大学;2006年
10 曾强成;谷氨酸受体在成骨细胞力学信号转导中作用的研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 金钫;MMPs在大鼠牙周组织改建以及体外培养成骨细胞中的表达[D];第四军医大学;2001年
2 郦光丰;骨组织力电效应及成骨细胞离体培养的数值分析[D];重庆大学;2002年
3 任高宏;成人骨髓基质干细胞体外培养及体内成骨的实验研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
4 周红星;兔活骨组织体外促同种成骨细胞与支架粘附的实验研究[D];第三军医大学;2003年
5 邬霞;成骨细胞玻璃化冷冻保护剂的研究[D];大连理工大学;2004年
6 赵宏艳;左归丸对破骨细胞骨吸收功能的影响以及成骨细胞的介导作用[D];中国中医研究院;2005年
7 梁衍涛;接骨散对家兔自体骨移植修复骨缺损的实验研究[D];黑龙江中医药大学;2005年
8 章永江;兔骨髓间充质干细胞生物学特性和自体皮下移植的成骨研究[D];天津医科大学;2005年
9 唐井钢;补肾中药血清对破骨细胞的生物学作用及OPG/OPGL与破骨细胞活性的相关性研究[D];第一军医大学;2005年
10 刘岳强;氟对体外培养的成骨细胞中Ras基因表达的影响[D];新疆医科大学;2007年
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