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《南方医科大学》 2011年
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RNA干扰Racl基因对髓母细胞瘤细胞生物学行为影响的实验研究

陈保东  
【摘要】:研究背景目的 髓母细胞瘤(medulloblastoma, MB)属神经上皮肿瘤,是小儿脑部最常见的恶性肿瘤之一。MB大约占小儿脑肿瘤的1/4,发病年龄高峰在5-10岁,男性多于女性,发病率在小儿仅次于星形胶质细胞瘤;在成人,80%的MB发病年龄在21-40岁。MB是来源于神经外胚层肿瘤之一,一般认为神经外胚层肿瘤具有向神经元及胶质细胞的双向分化的特征,2000年WHO将MB分型分为五种,分别是经典型、成结缔组织型、大细胞型、髓肌母细胞型和黑色素型。另外,MB还具有侵袭性生长的特性,有极强的浸润性和转移性,肿瘤细胞可沿脑脊液途径转移,可以向侧脑室及三脑室播散,也可以沿硬脊膜下腔播散,侵犯脊髓,造成神经根压迫症状或截瘫,其治愈率低、死亡率高,预后差。近年来,由于神经外科手术技巧及放疗技术的不断进步、化疗药物的应用以及治疗的不断规范化,MB的死亡率及致残率均明显下降,目前,MB 5年生存率在50%~70%,10年生存率在30%-50%。尽管近年来MB的治疗取得了很大的进步,但仍有相当一部分患者死于肿瘤的复发和侵袭、转移,因此与MB增殖、侵袭等相关机制的生物学研究成为近年来研究的热点。 肿瘤的侵袭转移是一个非常复杂的多步骤的过程,需要突破细胞外基质和基膜组成的多个结构屏障:癌细胞从原发灶脱落,通过上皮基底膜,侵入周围基质和邻近组织,然后进入血管或淋巴管,逃避免疫监视,接着从脉管中渗出,在远隔部位建立新的增殖旺盛的细胞集落。这其中的每个事件都相当复杂,其整个过程受到由许多条信号通路相互交联组成的信号转导网络的精确调控。从肿瘤的侵袭转移过程可以看出,肿瘤细胞的粘附和迁移活性的交替变换对肿瘤的侵袭转移至关重要。 Rho蛋白(包括Rho、Rac1、Cdc42)具有GTP酶活性,在肿瘤的发生发展中扮演重要角色,尤其是Rho蛋白及其下游的效应分子,通过多种信号转导通路,参与肿瘤的恶性转型、浸润转移及血管生成等多方面过程,它们已成为非常有希望肿瘤治疗的新靶点。Rac1(Ras相关的C3肉毒杆菌底物蛋白1)则是其重要成员之一,它位于人类7号染色体短臂2区2带(7p22),分子量是25KD,Genebank NO:NM_006908, Genebank概述Rac1基因编码的蛋白属于Ras超家族小GTP结合蛋白,它的作用是调节细胞的多种功能,包括控制细胞生长、细胞骨架的重组和蛋白激酶的激活。研究发现Rac1在细胞迁移、细胞与细胞及细胞与细胞外基质的黏附、细胞分裂和细胞失巢凋亡等方面也有重要作用。人类基因组中有三种Rac蛋白,即Rac1、2和3。这三种蛋白高度同源,但在转录调节和组织分布中却不同,Rac1广泛分布,Rac2在造血组织中表达,Rac3在脑组织中高表达,在其他组织中低表达。Rac1蛋白存在Rac1-GDP(失活状态)和Rac1-GTP(激活状态)两种形式,在细胞的信号转导通路中作为信号转换器或分子开关,作用于细胞骨架或其它的靶蛋白而产生生物效应。Rac1的上游调节分子是Tiaml,即T淋巴瘤侵袭转移诱导因子;其下游效应分子是PAK1,即P21激活激酶1。Racl的不同作用是通过调节不同的信号转导通路来实现。Salhia等用RNAi的方法沉默Rac1基因,观察Rac1基因沉默对星形细胞瘤细胞形态变化、运动能力及侵袭力的影响;Amanda等通过RNAi沉默Rac1基因,结果发现恶性胶质瘤细胞和乳腺癌细胞侵袭力明显减弱;Klooster等又进一步研究了Racl如何调节PAK1的分子机制,并发现Rac1的激活启动了细胞(HEK293细胞株)肌动蛋白的聚合、胞膜的突出和细胞移动。 RNA干扰是通过实验手段向细胞内导入一段双链RNA (dsRNA),宿主细胞对这段dsRNA迅即产生反应,其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA,即siRNA,这些siRNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效特异地阻断体内特定基因的表达,使细胞出现特定基因缺失的表型,从而达到某些实验或治疗目的。目前,国内外对于Rac1与MB的相关研究报道还很少,为了阐明其确切功能,我们以MB组织和细胞株为研究对象,以胶质瘤为参照、探讨Rac1基因在MB中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系。首先探讨Racl蛋白在不同级别胶质瘤、MB组织和正常脑组织中的表达,初步明确Racl蛋白与肿瘤发生、发展的可能关系;并在此基础上以Daoy细胞株为研究对象,构建RNAi重组载体,利用RNA干扰技术抑制Daoy细胞中Rac1基因的表达,观察Rac1基因沉默后肿瘤细胞的移动、侵袭、增殖、凋亡能力的变化并观察细胞骨架、细胞形态的变化。从多个角度对假设的功能进行进一步了解和验证。为全面研究MB中Rac1的生物学特性奠定基础,并为今后基因治疗MB提供理论依据。 材料与方法 1.Rac1在MB、胶质瘤组织中的表达及其临床意义用免疫组织化学S-P法、RT-PCR, Western blot方法检测Rac1在MB、胶质瘤组织中的表达,并分析Rac1表达与胶质瘤、MB临床病理特征的关系。 2.Rac1对MB表型的影响 为检测Rac1对MB Daoy细胞增殖、粘附、移动和侵袭等表型的影响,利用基因重组技术构建Rac1 shRNA真核表达载体(RNA interference, RNAi),并以Daoy细胞作为模型,转染重组载体后观测对MB Daoy细胞株细胞表型的影响,并分析Rac1在MB发生、发展和转移中的作用及其可能机制。 2.1. Rac1 shRNA重组载体的构建根据siRNA设计的原则,设计合成siRNA核苷酸序列,并设计一对非相关核苷酸序列作为对照,按常规操作处理后把shRNA序列克隆到pGPU6/Neo载体中,重组质粒酶切和测序鉴定。 2.2.转染细胞和建立稳定转染细胞克隆采用脂质体进行细胞转染,细胞转染后用分别用800μg/ml G418筛选阳性细胞克隆,挑取单克隆细胞扩增培养。 2.3.Racl表达调控效应检测逆转录聚合酶链式反应和免疫印迹检测Rac1mRNA和蛋白质水平表达改变。 2.4.激光共聚焦显微镜观察Rac1对Daoy细胞形态、骨架的影响观察MB Daoy细胞株中Rac1基因沉默和Rac1基因表达增强后,Daoy细胞形态和细胞骨架的变化。 2.5.平板克隆试验检测Rac1对Daoy细胞增殖的影响。 2.6.单层细胞划痕愈伤实验单层细胞划痕愈伤实验分析Rac1对Daoy细胞移行的影响。 2.7.侵袭实验观察Rac1基因表达对Daoy细胞侵袭能力的影响。 2.8.细胞周期与凋亡试验探讨Rac1基因表达对Daoy细胞细胞周期和细胞凋亡的影响。 结果 1.星形细胞肿瘤、MB及正常脑组织中Rac1蛋白的检测 Rac1免疫组化阳性细胞为胞浆着色或胞浆、胞膜均着色。112例星形细胞肿瘤组织中均有不同程度Rac1的阳性表达,Rac1阳性指数(Rac1 LI, Rac1 Label index)为2.3%~63.0%,平均Rac1 LI为13.80%,正常脑组织少见Rac1阳性染色。Ⅰ~Ⅳ级星形细胞肿瘤相邻级别Rac1阳性率之间差异有显著性意义(P0.01)。Rac1表达与星形细胞肿瘤的级别密切相关(r=0.484,P0.01),与年龄、性别无关。40例MB组织中Rac1均有不同程度的阳性表达,Rac1 LI为23.4%~87.5%,平均Rac1 LI为50.5%,正常脑组织少见Rac1阳性染色,二者阳性率之间差异有显著性意义(P0.01)。31例胶质瘤组织中均有Rac1mRNA呈高表达(1.077±0.025),25例MB组织中Rac1mRNA也呈高表达(1.067±0.104):,8例正常大脑组织中不表达Rac1mRNA(0.025±0.005);胶质瘤组织灰度值显著高于正常脑组织,(P=0.000),差异具有统计学意义;MB组织与正常脑组织相比,(P=0.000),差异也有统计学意义。31例胶质瘤组织中均有Rac1蛋白的高表达(1.25±0.10),显著高于正常脑组织(0.013±0.006),(P=0.000),差异具有统计学意义;25例MB组织中Rac1蛋白呈高表达(1.200±0.100),显著高于正常脑组织,(P=0.000),差异也有统计学意义。 2. Rac1RNAi重组载体的构建及鉴定 2.1.成功构建Rac1shRNA真核表达载体,经酶切和测序证实插入序列与设计序列完全一致; 2.2.重组质粒转染MB Daoy细胞株,经G418抗性筛选得到稳定细胞克隆株; 2.3.转染后,RT-PCR和Western blot分别从mRNA、蛋白水平证实Rac1 shRNA抑制Daoy细胞内源性Rac1的活性; 2.4.Rac1沉默后Daoy细胞骨架和细胞膜伪足的变化:Daoy细胞转染Rac1shRNA后,细胞交联的F-actin网的形成紊乱,且数量减少,细胞膜伪足形成也减少;而对照质粒组Daoy细胞F-actin网的形成正常,可以见到细胞膜伪足的形成; 2.5.通过平板克隆实验,证实转染pGPU6/Neo/Rac1-352后对Daoy细胞的增殖具有明显抑制作用; 2.6.单层细胞划痕24 h后,与对照组比较,Rac1/shRNA组和Rac1/N17组细胞迁移数明显减少;Rac1/L61组细胞迁移数增加,各组细胞迁移数分别是Rac1/shRNA组:90±10;Rac1/N17组:744±11;Rac1/L61组:2764±11;对照组:216±12。经统计学分析,Rac1/shRNA组与对照组(P0.01),Rac1/N17(93±5)与对照组(P0.01),Rac1/L61组与对照组(P0.05);Transwell侵袭试验中,各组细胞迁移数计数结果:Rac1/shRNA组:44±5, Rac1/N17组:35±5, Racl/L61组:90±5,对照组:76±7。经统计学分析,肿瘤细胞侵袭能力比较,Rac1/shRNA组与Racl/N17组比较,差异均无统计学意义(P0.05),Rac1/shRNA组与对照组比较, Racl/N17与对照组比较, Racl-L61组与对照组比较差异均有统计学意义(P0.01)。 2.7. Rac1-shRNA质粒(Rac1-shRNA)转染Daoy细胞48小时后,经流式细胞仪检测结果显示,细胞周期受阻于Go-G1期,Go-G1期细胞所占比例明显增加,平均为80.93%,而S期所占细胞比例减少,平均为11.86%;空质粒对照组(Control)Go-G1期和S期所占细胞比例平均分别为58.80%和30.67%。Rac1基因沉默抑制Daoy细胞的细胞周期进程(P0.05)。 2.8. Daoy细胞转染后在不同时间点测定细胞凋亡的变化:结果Rac1-shRNA质粒组Daoy细胞凋亡率为36.767±3.950%,而空质粒对照组细胞凋亡率为8.567±0.987%,Racl基因沉默促进细胞凋亡(P0.01)。 结论 Rac1基因在MB中存在着的过表达,过表达Racl基因可以促进MB Daoy细胞的增殖及克隆形成能力,增强其迁移、侵袭能力并抑制肿瘤细胞的凋亡,促进肿瘤的形成;靶向抑制Rac1基因可抑制MB Daoy细胞的增殖、降低其克隆形成能力、抑制肿瘤细胞的迁移、侵袭并促进细胞凋亡。本研究证实Rac1基因与MB的侵袭、发生、发展密切相关,是与MB相关新的癌基因;Rac1在MB病程演进中发挥正向调控作用;深入研究MB中Rac1生物学行为为MB的防治提供了新的思路和干预靶点。
【学位授予单位】:南方医科大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R739.4

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【参考文献】
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1 丁蕾;朱声荣;汤国雄;向国林;;碱性成纤维细胞生长因子对人涎腺腺样囊性癌ACC-2细胞株增殖及MEK/ERK、MKP-1通路的影响[J];实用医学杂志;2007年14期
2 杨天燕;王劲;张靖贤;王乃平;韦锦斌;;两种方法介导外源基因稳定转染大鼠肝癌细胞株的有效性及其对细胞生长影响的比较[J];西部医学;2010年10期
3 孙丽娜;魏建春;张慧娟;张恩民;俞东征;海荣;;三种方法转染绿色荧光蛋白质粒的效果评价[J];医学研究杂志;2010年01期
4 ;Cortactin Overexpression Correlates with Poor Prognosis in Hepatocellular Carcinoma[J];Chinese Journal of Cancer Research;2010年02期
5 张阳德,蔡素娜,廖允军;阳离子脂质体及其在基因转移和基因治疗中的应用[J];中国现代医学杂志;2001年07期
6 袁彩霞;顾双;张淑红;张向宁;;低氧依赖低氧诱导因子-1α增强卵巢癌细胞SKOV3中乙酰肝素酶的表达及其侵袭力[J];中国医学科学院学报;2008年06期
【共引文献】
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1 孟国路;李红利;张懋植;王硕;徐宇伦;赵继宗;;整合素β1、β5基因在人脑胶质瘤中表达的研究[J];北京医学;2008年07期
2 康春生;浦佩玉;王广秀;李捷;;反义及显性负调节AKT2抑制胶质瘤侵袭和迁移的实验研究[J];中国神经肿瘤杂志;2004年04期
3 杨柳松;胡锦;;胶质瘤侵袭性的分子生物学机制[J];中国神经肿瘤杂志;2005年03期
4 董雪涛;杨学军;李瑜;于圣平;张斌;王维;王华民;;EGF上调hMena的表达促进人胶质瘤细胞迁移能力的体外研究[J];中国神经肿瘤杂志;2011年02期
5 刘鑫;向学熔;范小平;;牙髓中基质金属蛋白酶的生物调节[J];重庆医学;2007年23期
6 胡洁;王亚东;李余发;王雅娟;韩慧霞;;T淋巴瘤侵袭转移诱导因子与大肠癌上皮间质转化的关系[J];南方医科大学学报;2009年02期
7 何吉文;李华;姜楠;台艳;张琪;杨扬;陈规划;;肿瘤靶向性细胞穿膜肽的固相合成及体外活性研究[J];南方医科大学学报;2011年02期
8 陈启伟;王永录;;DNA干扰研究进展[J];动物医学进展;2009年01期
9 尹志明;张贺;王健;;上皮-钙粘素和粘着斑激酶在星形细胞瘤中的表达及意义[J];临床医学;2009年02期
10 侯莹;杨庆伟;刘延庆;;基质金属蛋白酶2表达与胃癌侵袭及转移的关系[J];国际内科学杂志;2009年10期
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1 刘培峰;cRGD修饰的mPEG-PLGA-PLL靶向纳米药物递送系统对乳腺癌的治疗研究[D];东华大学;2010年
2 王智宇;胸腺素β4对膀胱癌上皮—间质转化调控作用的实验研究[D];华中科技大学;2011年
3 王庭阔;脂质体介导NT-3基因转染对离体小鼠耳蜗细胞的保护作用研究[D];中南大学;2010年
4 毛正发;SPARC在胰腺癌中的作用及其增加化疗敏感性的机制[D];复旦大学;2011年
5 刘怀民;Tiaml在食管鳞癌中的表达及Tiaml siRNA联合索拉非尼在食管鳞癌中的初步功能研究[D];郑州大学;2011年
6 郭昊;白介素35基因治疗协同地西他滨抑制小鼠心脏移植排斥反应的研究[D];天津医科大学;2011年
7 谢辉;用于大鼠脑胶质瘤磁共振成像的乳铁蛋白偶联的超顺磁性氧化铁纳米粒的研究[D];华中科技大学;2011年
8 葛彦;干细胞样脑胶质瘤细胞株的建立及CD40信号对肿瘤干细胞生物学行为的作用机制[D];苏州大学;2011年
9 李凌浩;上调Fas表达增强前体T淋系肿瘤细胞体外凋亡敏感性及抑制其动物体内肿瘤形成[D];苏州大学;2011年
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1 刘宝峰;盐酸阿霉素脂质体注射液有效性和安全性研究[D];山东大学;2010年
2 赵杰;整合素β1、纤维粘连蛋白和层粘连蛋白在胶质瘤中的表达及临床意义[D];山西医科大学;2011年
3 陈茜;HAMSC分化过程的生物力学特性及纳米金对血管生成抑制作用的研究[D];暨南大学;2011年
4 李永元;IL-15慢病毒表达载体的构建及体外实验[D];天津医科大学;2011年
5 董雪涛;胶质瘤中hMena蛋白表达与恶性胶质瘤侵袭方式的研究[D];天津医科大学;2011年
6 刘克君;谷氨酸促进胶质瘤U251细胞侵袭的机制研究[D];广州医学院;2011年
7 赵凌云;3.0T磁共振灌注加权成像与扩散张量成像在脑胶质瘤分级诊断中的应用价值[D];华中科技大学;2011年
8 李玉梅;Tiam1、Ki67和p53蛋白在肺癌中的表达及预后意义[D];南方医科大学;2011年
9 董琛琛;整合素αvβ3和αvβ5在前列腺癌的表达与临床意义[D];苏州大学;2011年
10 李震;Nemo-like kinase(NLK)的表达变化与脑创伤和脑胶质瘤的相关性的实验研究及其作用机制的初步探讨[D];苏州大学;2011年
【二级参考文献】
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1 农晓琳,王大章,蒙敏,周诺,蒙宁,李佳荃,张宏;血管生成抑制剂与化疗联合对裸鼠腺样囊性癌移植瘤生长的影响[J];华西口腔医学杂志;2004年04期
2 何发尧,王跃建,陈伟雄,潘衍基;头颈部腺样囊性癌的治疗[J];实用医学杂志;2005年12期
3 程根阳,陈香美,白雪源,冯哲,刘章锁,付博,洪权;绿色荧光蛋白与人肾脏NaDC3融合基因的构建及其在肾小管上皮细胞中的定位[J];细胞生物学杂志;2003年03期
4 夏娟,李秉琦,曾昕,陈谦明,何园,蔡扬;EMS1基因扩增与口腔黏膜癌变的相关研究[J];中华口腔医学杂志;2005年02期
5 陈绍维,黄洪章,刘习强;腺样囊性癌肺转移模型的动态观察[J];中华口腔医学杂志;2005年05期
6 羊正纲,陈智,倪勤,徐宁,潘修成,金晗英,李星仪;小干扰RNA体外抑制HBs-GFP融合基因的表达[J];浙江大学学报(医学版);2005年02期
7 郭语彬,伍新尧,罗超权,林达,李芳,许道松;脂质体介导的融合基因pCEAcd/tk转染肺癌细胞株效率的差异性[J];中国现代医学杂志;2000年05期
8 张景迎,陈诗书;阳离子脂质体——病毒增强质粒复合物在肝细胞癌基因治疗中的应用[J];肿瘤;1998年06期
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1 张福林,刘健,黄抗美,曹世龙;髓母细胞瘤的临床病理观察与DNA含量分析[J];中国临床神经科学;1994年01期
2 付学玲;髓母细胞瘤14例术后放疗的远期观察[J];徐州医学院学报;1997年03期
3 甄文春,王成敏,任立红;脑髓母细胞瘤误诊结核性脑膜炎1例[J];哈尔滨医科大学学报;1998年05期
4 李灵敏,冀春萱;小脑髓母细胞瘤的形态学观察[J];临床与实验病理学杂志;2001年05期
5 徐辉,罗定泰,沈建三;髓母细胞瘤的术后治疗分析[J];肿瘤研究与临床;2002年04期
6 江荣才,浦佩玉,申长虹,于士柱,焦宝华,王虎,王春艳,康春生;应用微阵列初步分析髓母细胞瘤的基因表达谱[J];中华医学遗传学杂志;2004年02期
7 刘彩侠;王智;;儿童髓母细胞瘤的MRI诊断[J];科技成果纵横;2008年06期
8 赵学林;王可耕;李建民;丰玉功;;幕上髓母细胞瘤1例报告[J];滨州医学院学报;1990年02期
9 叶劲;;髓母细胞瘤16例临床分析[J];广州医药;1992年01期
10 张良,杨开勇,蔡博文;56例儿童后颅凹髓母细胞瘤的诊断与治疗[J];河南诊断与治疗杂志;1999年02期
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1 岳洋;朱化彬;郝海生;杜卫华;赵学明;王栋;;牛精子总RNA制备及mRNA线性扩增的初步研究[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
2 李士泽;赵雅楠;李玉恒;杨焕民;;冷诱导RNA结合蛋白的结构与功能[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
3 王洁;刘金亮;阴筱;高瑞;李向东;刘焕庭;;HC-Pro三个参与抑制RNA沉默氨基酸位点的鉴定[A];植保科技创新与病虫防控专业化——中国植物保护学会2011年学术年会论文集[C];2011年
4 康磊;王荣福;闫平;;放射性标记对小干扰RNA在体内分布的无创性示踪研究[A];中华医学会第九次全国核医学学术会议论文摘要汇编[C];2011年
5 王峰;张秋平;陈金湘;;棉花总RNA的快速提取方法[A];中国棉花学会2011年年会论文汇编[C];2011年
6 赵庆华;田纪伟;王雷;董双海;王震;刘诚袆;;RNA干扰环氧化酶2对人腰椎退变终板软骨细胞生长增殖及凋亡的影响[A];第十九届中国康协肢残康复学术年会论文选集[C];2010年
7 孙凯;汪谦;;液相芯片技术在小分子RNA检测分析中的应用[A];肝脏病防治学术研讨会及新进展学习班专刊[C];2005年
8 张晖;覃君慧;柳金雄;冯亚玫;陈秋生;;Sox2 RNA探针的制备及其mRNA在早期鸡胚中的原位杂交检测[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
9 孔瑞瑞;;hALP,一个新的t-UTP,通过结合并乙酰化UBF促进RNA Pol I的转录[A];“细胞活动 生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会论文摘要集[C];2011年
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1 记者 常丽君;新技术让研究进入单细胞内RNA的世界[N];科技日报;2011年
2 聂翠蓉;RNA:纵是配角也精彩[N];科技日报;2009年
3 伊瑶;RNA干扰技术成明日黄花?[N];医药经济报;2011年
4 王小龙;科学家发现控制个体稳定的RNA片段[N];科技日报;2009年
5 本报记者 衣晓峰 聂松义 通讯员 陈英云;微小RNA揭开心律失常之谜的“金钥匙”[N];健康报;2010年
6 冯卫东;RNA干扰机制首次在人体中获得证实[N];科技日报;2010年
7 记者 常丽君;新RNA转录变体可简化生物线路[N];科技日报;2011年
8 记者 聂翠蓉;细胞“垃圾”也能变废为宝[N];科技日报;2008年
9 记者 刘海英;病毒会利用微RNA对人体实施攻击[N];科技日报;2010年
10 陈蕾;赛默飞世尔启动RNA干扰研究/药物筛选资助项目[N];中国包装报;2009年
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1 陈保东;RNA干扰Racl基因对髓母细胞瘤细胞生物学行为影响的实验研究[D];南方医科大学;2011年
2 于丽;纳米基因载体介导RNA干扰沉默Survivin基因治疗大肠癌的实验研究[D];中南大学;2009年
3 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 马进;水稻条纹病毒(RSV)RNA3、RNA4的克隆与抗RSV转基因水稻的培育[D];山东农业大学;2011年
5 金哲秀;RNA干扰抑制基质金属蛋白酶对小鼠动脉粥样硬化影响的实验研究[D];吉林大学;2011年
6 李建华;髓样细胞分化蛋白88抑制乙型肝炎病毒复制的机制研究[D];复旦大学;2010年
7 孙永刚;核干细胞因子RNA干扰对HT29细胞CDX2表达的影响[D];第三军医大学;2009年
8 刘爱军;脑内冷诱导RNA结合蛋白的表达及其神经保护作用研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2010年
9 靳宇;RNA带扭结结构的组合研究[D];南开大学;2010年
10 鄂继福;应用RNA干扰技术沉默Med-19基因及其对大肠癌细胞增殖影响研究[D];第二军医大学;2010年
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1 李喜英;黄瓜花叶病毒2b蛋白在RNA沉默通路中的作用方式研究[D];浙江理工大学;2010年
2 王冕;棉花RNA依赖的RNA聚合酶6(GhRDR6)基因的分离及功能分析[D];山东农业大学;2011年
3 王庆晓;RNA干扰逆转HeLaB2/DDP细胞顺铂耐药的研究[D];南京大学;2011年
4 石杜娟;利用RNA干扰技术抑制日本血吸虫酪氨酸羟化酶的合成[D];安徽医科大学;2011年
5 张旭;表达猪let-7c细胞株的建立及其对猪瘟病毒的调控作用[D];西北农林科技大学;2010年
6 王少军;RNA解旋酶p68在创伤愈合中的作用及机制研究[D];第三军医大学;2010年
7 丁艳杰;葡萄病毒A MP基因RNA干扰载体的构建及其鉴定[D];中国农业科学院;2011年
8 崔广迪;基于H1N1的RNA二级结构的相似性比较研究[D];吉林大学;2010年
9 孟益聪;哺乳动物细胞有丝分裂中期染色体上RNA成分的研究[D];兰州大学;2010年
10 杨娟;非编码RNA片段化方法的建立及验证[D];浙江理工大学;2010年
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