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《第一军医大学》 2000年
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大鼠脊髓损伤后一氧化氮合酶活性及其基因表达动态变化的研究

刘成龙  
【摘要】: 脊髓损伤是骨科临床工作中常见的疾患,因其致残率高,严重危害 患者身心健康,因而有着极高的研究价值。可是到目前为止,脊髓损伤 的治疗效果很不理想,这是因为脊髓组织的再生能力极弱,对由原发性 机械损伤造成的组织破坏难以从解剖结构上进行恢复,且现已认识到在 脊髓原发性损伤的基础上发生了一系列进行性的病理生理改变,引起了 不可逆的继发性结构破坏,成为导致神经功能丧失的重要原因。脊髓继 发性损伤是由多因素参与的复杂的病理改变过程,血管机制及神经生化 机制是贯穿其中的相互独立且相互关联的两大机制,由此人们研究了许 多针对性的实验治疗措施,但尚无一种方法能完全阻止继发性脊髓损伤 的发生,这主要是因为参与继发性损伤的各种因素互相渗透与制约,只 有找出其中相互关联的中间环节,才能从根本上阻止脊髓继发性损伤。 一氧化氮(NO)作为一种新型的神经介质,已被证明在多系统中 具有广泛的生理病理作用。一氧化氮合酶(NOS)是调节NO活性的关 键酶。为进一步研究NO在脊髓继发性损伤中的作用,建立了大鼠脊髓 压迫损伤的模型,并分别以分光光度法和RT-PCR法检测损伤后脊髓组 织中一氧化氮合酶的活性及各型基因表达的变化,以期探讨各型NOS在 脊髓继发性损伤中的作用。 本实验分以下几个部分: 一、健康成年SD大鼠30只,随机分为无损伤组及损伤后2、6、 12、24、48h组,每组5只。依Nystrom法后路压迫脊髓(35.0g×10min), 建立脊髓损伤模型,无损伤组仅行脊髓暴露而不致伤脊髓。 二、依不同的实验分组,腹腔麻醉、无菌操作下取出伤段或相应部 位脊髓组织,以分光光度法测定组织内NOS活性。 三、依不同的实验分组,腹腔麻醉、无菌操作下取出伤段或相应部 位脊髓组织,以半定量RT—PCR法检测3型NOS mRNA的表达情况。 结果:(1)大鼠脊髓在无损伤时即表现NOS活性,压迫损伤后NOS 活性明显增高(P<0.05),并呈现伤后6h和24h两个峰值。(2)nNOS mRNA及eNOS mRNA在正常的大鼠脊髓组织内有表达,且损伤后二者 的表达立即升高,并于伤后6h达峰值;iNOS mRNA于正常大鼠脊髓内 未见表达,伤后Zh始见表达,表达逐渐增强并于伤后24h达峰值。 结论:(l)NO参与了脊髓组织的干常生理调节。()脊髓损Di后 NO的生成有两个高峰期。(3)脊髓损伤后 nNOS、iNOS、eNOS。i首 基因表达的变化规律不尽相同,提示各亚型*OS在继发性脊髓损伤过,N 中可能起不同的作用。
【学位授予单位】:第一军医大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2000
【分类号】:R651.2

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