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《第一军医大学》 2001年
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乙型肝炎病毒感染与肝细胞凋亡的关系研究

倪宏  
【摘要】: 乙型肝炎病毒(Hepatitis B Virus,HBV)相关的慢性肝病在我国 广泛流行,是当前危害人民健康最严重的传染病。细胞凋亡参与HBV相 关肝病的发病机制,但病毒与肝细胞凋亡的关系还未完全阐明,究竟是抑 制肝细胞凋亡还是促进肝细胞凋亡,尚无最后结论。 本实验通过体外连接HBV(ayw亚型)DNA获得6.4kb的双拷贝 DNA片段,然后将其插入pcDNA3载体的EcoR V位点获得连接;通过 聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)和酶切筛选并验 证,获得头尾串联双拷贝HBV全基因重组真核表达质粒,构建了HBV全 基因重组真核表达质粒。 应用脂质体介导法,把头尾串联双拷贝HBV全基因重组真核表达质 粒转染肝癌细胞。通过G418筛选,对阳性克隆细胞进行十二烷基硫酸 钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析,证明 已把HBV全基因重组真核表达质粒转染肝癌细胞并获得稳定表达,建立 HBV复制状态的细胞克隆。 本实验用肝癌细胞系HepG2细胞及转染HBV DNA的肝癌细胞HKS_5 细胞进行比较研究,并设立以空载体pcDNA3转染的肝癌细胞HpcD细胞 作为照,对HBV与肝细胞凋亡的关系做进一步的研究,发现转染HBV DNA的肝癌细胞对凋亡的敏感性大为减低,提示HBV可能抑制肝细胞凋 亡。 阐明HBV与肝细胞凋亡的关系,有助于对HBV感染慢性肝病的发病 机制的进一步研究。
【学位授予单位】:第一军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R373.21

【引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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2 刘萍;丛国正;常惠芸;杨孝朴;;口蹄疫病毒非结构蛋白3C真核表达载体的构建及表达[J];中国兽医杂志;2007年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李发武;乙型肝炎病毒L60V、I97L变异核壳蛋白对HepG2细胞HLA-A表达和细胞凋亡的影响[D];中南大学;2007年
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1 刘萍;口蹄疫病毒3C基因的真核表达及其诱导宿主细胞凋亡的研究[D];甘肃农业大学;2007年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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10 徐世文;三氧化二砷抗鸡MD肿瘤效应及其机理的研究[D];东北农业大学;2001年
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1 高明;女贞子有效成分齐墩果酸对S180荷瘤小鼠P53蛋白表达及TNF-α的诱生作用[D];黑龙江中医药大学;2010年
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9 李征;姜黄素对血管平滑肌细胞增殖抑制作用及机理探讨[D];中南大学;2010年
10 李慧敏;青鹏软膏干预佐剂性关节炎大鼠作用研究[D];天津医科大学;2011年
【同被引文献】
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1 曹轶梅;口蹄疫病毒非结构蛋白基因3ABC的克隆及3AB基因在大肠杆菌中的表达[D];甘肃农业大学;2002年
【二级引证文献】
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
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2 倪宏,骆抗先,刘定燮,朱幼芙,马佩球,朱科伦;乙型肝炎病毒全基因重组真核表达质粒的构建[J];第一军医大学学报;2001年03期
3 胡拥军,徐链,王珮;高效感受态菌制备方法比较探索[J];细胞生物学杂志;1994年02期
【相似文献】
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7 钱振宇;胆管癌与乙型和丙型肝炎病毒感染的相关性研究[D];复旦大学;2003年
8 陈永标;线粒体转录因子A对肝外胆汁淤积肝细胞mtDNA氧化损伤的保护作用及机制研究[D];第三军医大学;2012年
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1 王东平;乙型肝炎病毒感染对造血干细胞移植的影响[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
2 赵书民;乙型肝炎病毒pres_2-s基因(ayw亚型)转基因小鼠的建立[D];第二军医大学;2002年
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4 李为民;抗ICAM-1单克隆抗体在大鼠肝移植急性排斥反应中的应用及肝细胞凋亡[D];中国人民解放军军医进修学院;2002年
5 肖杰;高钼对雏鸡肝肾影响的机理研究[D];四川农业大学;2010年
6 章仕坚;乙型肝炎病毒感染中2’,5’寡腺苷酸合成酶和Th应答模式的研究[D];暨南大学;2001年
7 王晓黎;乙型肝炎病毒DNA逆转录酶基因特异基因变异检测方法的建立及评价[D];河北医科大学;2003年
8 张胜权;N-乙酰半胱氨酸(NAC)抗乙肝病毒(HBV)作用[D];安徽医科大学;2001年
9 葛军辉;乙型肝炎病毒变异型s基因疫苗逆转转基因小鼠免疫耐受的研究[D];第二军医大学;2003年
10 贺启贵;门脉高压性胃病病理初步分析[D];山西医科大学;2003年
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