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《第一军医大学》 2001年
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双染色法对大鼠心肌微血管几何结构的研究

杨绍青  
【摘要】: 目的:1.建立一种新的组织化学方法,该方法以毛细血管内皮细胞 酶的差异分布为基础,动脉段毛细血管和静脉段毛细血管分别呈现碱性 磷酸酶(AP)和二肽肽酶(DPP IV)活性,将毛细血管进行双变量标定, 区分为动脉段毛细血管和静脉段毛细血管。从而为组织的氧供提供更近 实际的毛细血管的结构信息,可以从多角度估价各种负荷条件下毛细血 管几何结构的变化。与此同时,建立大鼠冠状动脉梗阻模型,用双染色 法观察冠脉阻塞大鼠及老年鼠左心室毛细血管几何结构的改变。目前国 内未见本法相关报道。2.通过铸型的方法获得心肌微血管的三维结构, 观察人,猪,大鼠冠状动脉种属间的差异。 方法:1.双染色法的建立。16只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠(体 重300±20g)苯巴比妥钠麻醉(4mg/100g.)后将15μm彩色微球经大鼠 的主动脉根部及冠状动脉直接注入,心脏快速切下,称重,液氮冷冻, 冰冻切片。左室心肌切片进行双染色和CD31、CD34免疫组化标记,结果 进行形态学分析。2.大鼠经左侧开胸暴露心脏,人工通气,结扎冠状动 脉左降支,术后45天取下心脏做组织切片进行形态学分析。伪手术组作 为对照。3.用玻璃单体灌注人,猪和大鼠的心脏,收集冠状动脉树和微 血管的扫描电镜资料进行人,猪和大鼠冠状动脉间的比较分析。 结果:1.正常大鼠的毛细血管的域面积(CDA)在VC段显著减少 (P<0.01)。VC段毛细血管有更大的直径(AC vs VC 5.6±0.2μm vs 6.9±3.2μm);变异系数VC段明显高于动脉段(0.06±0.01 vs 0.82±0.05) 双染色所得毛细血管的密度和数量与CD31和CD34的免疫组化结果比较 没有显著性差异。2.冠脉梗阻组大鼠毛细血管几何结构的改变。非缺血 带的毛细血管密度较伪手术组高(2712±359 vs 2411±21 p<0.05),毛细 血管的域面积在过渡带显著高于非缺血带(635±201μm vs 502±143 p<0.01)。心肌细胞的横断面积伴随毛细血管/心肌纤维比值的增高而增 高3.老年鼠组:老年鼠组与正常成年对照示微动脉和毛细血管的动脉段 毛细血管的密度减少,域面积增加,毛血血管总的密度没有显著性改变,。 结论:l.本方法在大鼠心肌内微血管结构的研究中从方法学上讲是 可行的;研究发现毛细血管的几何结构在动脉段和静脉段之间存在着显 著的差异,在毛细血管的静脉段,血管的直径和密度增加,毛细血管片 段的长度减少。这样随着血液在趋向静脉流动伴随氧分压的降低,这些 结构上的特点更有利于氧的弥散。2.在冠状动脉梗阻的大鼠,心肌组织 内毛细血管床的塑型是不一致的,非缺血带毛细血管的域面积减少,与 此同时,过渡带毛细血管的域面积增加,在梗塞后45天的大鼠,毛细血 管的增生速度落后于心肌细胞的肥厚。3.在老年鼠冠脉系统的微小动脉 减少,毛细血管的结构没有显著的改变。
【学位授予单位】:第一军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2001
【分类号】:R540.2

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【参考文献】
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