收藏本站
《中国人民解放军第一军医大学》 2003年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

三苯氧胺联合阿霉素、顺铂及紫杉醇抑制MCF-7细胞株增殖的实验研究

王雄文  
【摘要】: 背景 化疗和内分泌治疗在乳腺癌内科治疗中有重要的价值。尽管对三苯氧胺与细胞毒性药物联合应用有否定的研究结论,NSABP B-16试验和NSABP B-20试验分别肯定了AC方案和CMF方案与三苯氧胺联用的优势。紫杉醇类与铂类化疗药物在乳腺癌二线化疗中的地位已获肯定。辅助三苯氧胺与含紫杉醇类或铂类药物联用的协同作用及长期应用三苯氧胺对细胞毒性药物敏感性的影响未能引起更多的关注,需要进一步研究。 目的 研究在三苯氧胺治疗与阿霉素、紫杉醇或顺铂联合应用时,长期应用三苯氧胺对MCF-7细胞株药物敏感性的影响及其对策。 方法 1.MTT法确定紫杉醇及顺铂的IC50、IC30及IC10值。MTT法测定不同方法处理后MCF-7细胞的倍增时间。 2.流式细胞仪检测IC30及IC10两种不同剂量紫杉醇及顺铂单用、联用及与2×10~(-8)MOL/L三苯氧胺联用,三周期处理对MCF-7细胞周期的影响,C-myc、caspase-3、MT、GST-pi、p170、Bcl-2、Bax、E-cadherin、VEGF表达的变化;Annexin V/PI双标法检测细胞凋亡。 3 流式细胞术检测与1×10~(-7)MOL/LTAM共同孵育8周、16周对细MCF-7细胞周期的影响及MCF-7细胞ER/PR/EGFR/C-erbB-2表达的变化;West blot法检测EGFR/C-erbB-2蛋白表达的变化; RT-PCR检测EGF侧C一ethB一2 mRNA的变化。 4,M竹比色法检测与1 xlo一7MoUL工AM共同孵育一6周后MeF一7 对顺铂、紫杉醇敏感性的变化;三磷酸腺普发光法检测与1人M 共同孵育16周后MCF一7对阿霉素敏感性变化;流式细胞术检测 P170、Bd一2、Bax蛋白表达的变化:流式细胞术检测细胞内阿 霉素的荧光强度,及Ghvec对荧光强度的影响。 结果 l,不同剂量顺铂(D一10、D一30)、紫杉醇(T-10、T-30)单独使 用、联用(L2一10、LZ一30)及二者与Zx 10一SMoL几三苯氧胺联用 (L3一10、L3一30)四种处理方法均导致MCF一7细胞GZ/M期阻滞; 四种方法处理后的MCF一7细胞S期细胞比例降低、G夕G;期细胞 比例升高,细胞倍增时间明显延长(p0 .05)。2x10一SMo眺三 苯氧胺与IC10剂量强度的紫杉醇+顺铂联用(L3一10)与 IC10 剂量的紫杉醇+顺铂(L2一10),三周期处理后MCF一7细胞S期比 例分别为5.8%、7%,细胞倍增时间分别为59士6小时及55士8 小时;Zxlo.SMOL几三苯氧胺与IC30剂量强度的紫杉醇十顺铂 联用(L3一30)与IC30剂量强度的紫杉醇+顺铂(L2一30),三周期 处理后MCF一7细胞S期比例分别为5.3%、4.6%,细胞倍增时 间分别为82士12小时及80士16小时。 2,IC10及IC30剂量强度LZ、L3处理三周期后细胞增殖、凋亡、 耐药、转移、血管生成相关蛋白表达变化如下(表1,2)。 3,IC10剂量LZ一10、L3一10处理后第三周期凋亡+死亡细胞比例 分别为22%、23%,而IC30剂量LZ一30、L3一30处理相应则分别 为40%、37%,较未处理组凋亡+死亡细胞比例2%明显上升 (p0 .05),LZ一10、L3一10比较以及LZ一30、L3一30间比较均无统 计学差异(P0.05)。 4,lxlo一7MOL几JAM导致MCF一7细胞G了G,期细胞比例升高、S 期细胞比例降低;与1 x 10一7MOL/LEAM共同孵育16周后,McF一7 细胞ER、PR表达降低,EGFR、C一erbB一2表达升高:West blot 法检测EGF侧C一erbB一2蛋白表达升高;RT-PCR检测 EGF侧C一ethB一2 mRNA表达增强。流式检测Bcl一2表达稍降低, Bax表达明显降低,Bcl一2忍ax比值明显升高,p170表达稍升高。 5,与1 x 10一7MOL几JAM共同孵育16周后,MTT法检测MCF一7 细胞对顺铂、紫杉醇敏感性较未处理时均降低,三磷酸腺昔发光 法检测对阿霉素敏感性下降,流式检测细胞内阿霉素荣光强度降 低。而Glivec可部分恢复TAM处理后MCF一7对阿霉素的敏感 性,并可使下降的细胞内阿霉素的荧光强度有所回升。 结论 1,2 x 10一SMoL几三苯氧胺与Iclo剂量紫杉醇+顺铂联用对抑制 MCF一7的增殖有协同作用,而与IC30剂量的紫杉醇十顺铂联用 无明显的协同作用。 2,处理后的MCF一7细胞S期细胞比例及细胞倍增时间可作为对 三苯氧胺联合紫杉醇十顺铂化疗的效果评估的指标。单一指标可 作为独立疗效评价的指标。 3,处理后MCF一7细胞easPase一3、GST-Pi、P170、Bel一2、Bax、 E一cadherin、VEGF变化亦可作为疗效评价的指标,但单一指标 能否作为独立疗效评价的指标需进一步研究。 4,与1 x 10一7MOL/I JAM共同孵育16周后,MCF一7细胞对阿霉素、 J顶铂、紫杉醇敏感性均降低,Glivec可部分恢复TAM处理后 MCF一7对阿霉素的敏感性。 MT GST-Pi BCL一2 baxC一MYC 对照组10土2.0 10土1.4 7.58士2.0 14.2士2.2 17.2士2.2 LZ一10 12.4士1.0 16.2士1.5 12.3士1.5 10.9士2.0 15.3士2.0 L3一10 13.6士2.0 13.7士2.0 12.3士2.6 8.0士1.2 13.1士1.1 LZ一30 8.6士1.4 18.0士3.1 21.3士2.7 7.0士1.8 13.4士2.2 L3一30 8.6士1.0 19.7士2.2 20.5士3.5 7.2士2.3 10.6士2.7 表1 easPase一3P一1 70E一ead VEGF 对照组1.63士1.0 5.09士1.1 39.4士3.0 26.2士7.3 LZ
【学位授予单位】:中国人民解放军第一军医大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:R737.9

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前5条
1 廖美焱,水华,周秀芳,陈惠祯;顺铂引起卵巢癌细胞周期变化及凋亡的观察[J];武汉大学学报(医学版);2001年04期
2 彭玮丹,张杰,曹云新,惠宏襄,金明,王成济;紫杉醇诱导食管癌细胞的细胞周期阻断与细胞凋亡[J];中国药理学通报;1998年05期
3 皋岚湘,丁华野,邓永江,刘光,吴霞,田玉旺,黄晓楠;乳腺癌组织中金属硫蛋白过表达生物学意义的探讨[J];中国肿瘤临床;1998年09期
4 郑军,姚榛祥;三苯氧胺对乳腺癌细胞凋亡和耐药性的影响[J];中华肿瘤杂志;2000年01期
5 陈艺华,董敬朋,李春德,陆药丹,张盛;人乳腺癌c-erbB2基因扩增及过度表达的研究[J];中华肿瘤杂志;1995年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王雄文,张积仁,沈雁,郑刚,钟灿灿;格列卫增加获得性他莫昔芬耐受MCF-7细胞对阿霉素的敏感性[J];第一军医大学学报;2003年07期
2 施斌,林李嵩,陈乃俊,张伟建,林耿冰,朱小峰;紫杉醇对人腺样囊性癌细胞ACC-2体外辐射增敏作用机制初探[J];福建医科大学学报;2004年04期
3 黄华 ,吴俊伟 ,陈林兴 ,陈慎仁 ,陈式仪 ,翁建盛;金属硫蛋白在人不同结肠组织中的表达[J];放射免疫学杂志;2004年02期
4 陈林兴,陈慎仁,陈泽钦,吴俊伟,黄华,陈式仪;金属硫蛋白在人甲状腺肿瘤中的表达[J];广东医学;2004年05期
5 唐兴刚;郭世宁;仇微红;李志华;;中药调节细胞凋亡机理的研究进展[J];广东畜牧兽医科技;2008年06期
6 余楠;雌激素对凋亡调控基因Bcl-2家族的影响及与乳腺癌的关系[J];国外医学(肿瘤学分册);2002年03期
7 曾健,黎乐群,林进令;癌基因C-erbB-2表达与乳腺癌生物学行为的关系[J];广西医科大学学报;1997年01期
8 武国强,王晓宁,张会敏;中药对细胞凋亡的影响研究[J];河北中医;2004年11期
9 黄新苏;陈福;许锦阶;;复方中药“克瘤宁”对人食管癌的抗癌作用及其机理研究[J];河北医学;2006年03期
10 杨培英,孙力,杨书良;乳腺癌病因研究现状与展望[J];邯郸医专学报;1996年03期
中国重要会议论文全文数据库 前2条
1 孙华斌;江典模;郁勤;;浅谈乳腺癌的内分泌治疗[A];2009年中国药学大会暨第九届中国药师周论文集[C];2009年
2 孙华斌;江典模;郁勤;;浅谈乳腺癌的内分泌治疗[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 邵宏伟;抗癌中药有效成分诱导胰腺泡细胞凋亡治疗急性胰腺腺炎的可行性及机理研究[D];天津医科大学;2002年
2 邢旺兴;中药通光藤活性成分的研究[D];第二军医大学;2002年
3 孙路虹;人肝癌低表达基因MT1M的克隆和功能研究[D];南京师范大学;2003年
4 范志民;乳腺癌根治术和改良根治术治疗730例乳腺癌的结果[D];吉林大学;2004年
5 倪学文;银杏酚酸的分离纯化及其生物活性研究[D];华中农业大学;2004年
6 黄晓东;抗HER-2/Neu癌蛋白-p185抗体的研制及HER-2/Neu基因活化与腑窝淋巴结阴性乳腺癌患者预后关系研究[D];中国协和医科大学;2000年
7 张瑞芬;金属硫蛋白与乳腺癌关系的研究[D];中国协和医科大学;1999年
8 高德宗;γ-干扰素与他莫昔芬联合抗乳腺癌作用及其机制的实验研究[D];山东大学;2006年
9 张金山;GnRH及其受体在人肝癌组织中的表达及GnRH类似物对肝癌细胞增殖抑制作用的实验研究[D];第四军医大学;1998年
10 沈美萍;三苯氧胺治疗分化型甲状腺癌的实验研究[D];南京医科大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王姗娜;17-βE_2联合顺铂对卵巢癌细胞株HO-8910体外生长的影响及机制研究[D];泰山医学院;2010年
2 牛晓阁;ApoG2诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡及自体吞噬的机制研究[D];南方医科大学;2011年
3 宋霞;大蒜素对人卵巢癌细胞株A2780的作用及机制[D];泰山医学院;2011年
4 陈超;没药甾酮抑制RAW264.7细胞炎症反应的机制研究[D];福建师范大学;2011年
5 王永杰;非小细胞肺癌组织中金属硫蛋白及基质金属蛋白酶-2的表达及相关性研究[D];遵义医学院;2011年
6 袁理;西妥昔单抗抑制MCF-7/TAM~R乳腺癌细胞增殖及下调FUT4和LeY表达作用的研究[D];大连医科大学;2011年
7 施斌;紫杉醇对人腺样囊性癌细胞ACC-2体外辐射增敏作用研究[D];福建医科大学;2002年
8 徐晓妹;多药耐药基因MDR1及P-gp、C-erbB-2蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义[D];青岛大学;2002年
9 宋华;胡桃楸提取液对肿瘤细胞抑制作用的研究[D];大连理工大学;2002年
10 余楠;辛基酚和雌二醇对人乳腺癌细胞凋亡及其相关基因Bcl-2、Bax、Bcl-x、Bak转录和表达的比较研究[D];第三军医大学;2002年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 廖美焱,陈惠祯,水华,胡杰,杨庆忆,邱慧玲,陈红;顺铂、维拉帕米和环孢菌素诱导卵巢癌细胞凋亡的研究[J];中华妇产科杂志;2000年02期
2 连利娟;卵巢癌化疗的现况与趋向[J];中华妇产科杂志;1996年02期
3 周友珍,陈惠祯,杨庆忆,刘诗权,侯汉英;人卵巢癌顺铂耐药细胞株的建立及其耐药机制的研究[J];中华医学杂志;1996年09期
4 李培然,范维珂;细胞培养及涂片的免疫细胞化学染色[J];重庆医科大学学报;1991年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 林江涛,苏楠,黄铁群,贾玉萍,何洁;紫杉醇联合顺铂化疗治疗晚期非小细胞肺癌[J];中日友好医院学报;2000年06期
2 李爱敏,苗向红,梁慧玲;紫杉醇加顺铂联合化疗52例毒性反应观察[J];郑州大学学报(医学版);2004年06期
3 韦怀新!510515,蔡绍曦!510515;紫杉醇与顺铂联合化疗致听力下降二例[J];中国肺癌杂志;2000年05期
4 舒进忠;紫杉醇联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌32例临床观察[J];遵义医学院学报;2004年05期
5 陈梓宏,余忠华,唐志;顺铂或紫杉醇联合放射治疗中晚期鼻咽癌临床研究[J];中国肿瘤;2003年06期
6 许瑞莲,陈伟,叶建增,白桦,郑瑾;紫杉醇与顺铂联合治疗晚期鼻咽癌50例分析[J];肿瘤学杂志;2004年04期
7 邱全兰,李文瑜;紫杉醇加顺铂:进展期卵巢癌一线标准治疗方案[J];循证医学;2004年03期
8 祝玉存,左宝丰;紫杉醇、顺铂联合方案治疗原发晚期上皮性卵巢癌的临床观察[J];现代妇产科进展;2002年03期
9 周安喜;紫杉醇+顺铂联合治疗晚期鼻咽癌18例疗效分析[J];海南医学;2003年05期
10 侯松萍,刘晶,韩凤文;紫杉醇和顺铂联合治疗30例晚期非小细胞肺癌临床观察[J];中国癌症杂志;2001年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 梁颖;陈丽昆;林勇斌;杨群英;王志强;徐光川;;紫杉醇联合顺铂每周方案治疗老年晚期非小细胞肺癌临床观察[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年
2 周安喜;;紫杉醇+顺铂联合治疗晚期鼻咽癌18例疗效分析[A];海南省第二届肿瘤学术会议论文集[C];2005年
3 张晓东;束永前;张凤春;梁军;马学真;陈黎;黄建瑾;石根明;曹卫国;沈琳;金懋林;;紫杉醇联合顺铂和5-FU治疗晚期胃癌——全国多中心、前瞻性临床研究[A];第三届中国肿瘤内科大会教育集暨论文集[C];2009年
4 李淑芬;佟仲生;汪旭;王忱;何丽宏;史业辉;郝春芳;巴一;;紫杉醇联合铂类药物治疗晚期非小细胞肺癌临床研究[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
5 孙荔;张凤春;;安素泰联合LFP方案治疗晚期胃癌的疗效分析[A];第四届中国肿瘤学术大会暨第五届海峡两岸肿瘤学术会议论文集[C];2006年
6 张明;周梁;田洁;陆神斌;;TRAIL与放化疗联合应用诱导喉癌Hep-2细胞凋亡的实验研究[A];中华医学会第十次全国耳鼻咽喉-头颈外科学术会议论文汇编(上)[C];2007年
7 潘杰;陈萍;李莎莎;傅华;胡义德;;紫杉醇联合奈达铂与联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床观察[A];中华医学会第五届全国胸部肿瘤及内窥镜学术会议论文汇编[C];2011年
8 叶敏;朱珠;傅强;李大魁;;大鼠肝药酶活性改变对紫杉醇药物动力学的影响[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
9 康春生;任玉;原续波;浦佩玉;周旋;王广秀;韩磊;贾志凡;;反义微小RNA-21与药紫杉醇共作用抑制胶质瘤的生长[A];2009医学前沿论坛暨第十一届全国肿瘤药理与化疗学术会议论文集[C];2009年
10 褚玉敏;谭国林;马艳红;;人鼻咽癌紫杉醇耐药细胞株CNE-1/Taxol的建立及其机制初探[A];中华医学会第十次全国耳鼻咽喉-头颈外科学术会议论文汇编(下)[C];2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 阿迎;紫杉醇用于治疗卵巢癌令生命质量更优[N];医药经济报;2002年
2 和龙;“低价紫杉醇”背后的隐患[N];医药经济报;2006年
3 ;紫杉醇对人胆管癌RBE细胞凋亡及细胞外信号调节激酶表达的影响[N];中国医药报;2003年
4 过国忠;红豆攻克紫杉醇产业化难题[N];科技日报;2007年
5 ;市场前景巨大的植物抗癌药“紫杉醇”[N];云南经济日报;2003年
6 昆仑证券;G 华立——青蒿、紫杉醇、工业大麻[N];证券日报;2006年
7 徐铮奎;紫杉醇市场饥渴[N];医药经济报;2008年
8 记者 张玲娜;紫杉醇命途多舛[N];医药经济报;2010年
9 秦峰;四医大采用手性催化技术合成紫杉醇[N];中国医药报;2007年
10 黄东临;紫杉醇原料工艺掣肘待破[N];医药经济报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王雄文;三苯氧胺联合阿霉素、顺铂及紫杉醇抑制MCF-7细胞株增殖的实验研究[D];中国人民解放军第一军医大学;2003年
2 彭小伟;顺铂逆转鼻咽癌紫杉醇耐药分子机制的初步研究[D];中南大学;2010年
3 孟刚;紫杉醇及顺铂诱导MCF-7/ADR和Hela细胞调亡及其与凋亡相关蛋白和Ca2+的关系[D];安徽医科大学;2001年
4 丁勇;紫杉醇诱导成骨肉瘤细胞凋亡及Caspase-6基因对成骨肉瘤细胞的凋亡诱导作用[D];第四军医大学;2001年
5 郝星;卵巢癌化疗耐药与纺锤体检测点功能完整性的相关性研究[D];华中科技大学;2010年
6 武晓静;MSCs修复血管内膜及对平滑肌部分生物学行为的影响[D];第三军医大学;2004年
7 顾海宁;紫杉醇AB环骨架和喹诺酮等药物的绿色合成研究[D];浙江大学;2006年
8 耿长新;多烯紫杉醇在体内外对人肝细胞肝癌抑制生长及放射增敏实验研究[D];复旦大学;2003年
9 岳琴;云南红豆杉枝叶化学成分和紫杉醇半合成及其类似物构效关系的研究[D];中国协和医科大学;1995年
10 朱晓东;Survivin在紫杉醇抗肿瘤机制中作用及其反义核酸干预胃癌形成的研究[D];复旦大学;2003年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 么金平;紫杉醇与顺铂合用对卵巢癌细胞凋亡的影响[D];河北医科大学;2006年
2 史伟;Survivin mRNA在紫杉醇、顺铂及足叶乙甙作用卵巢癌细胞前后表达的变化[D];河北医科大学;2006年
3 韩琳琳;背向散射积分技术评价紫杉醇+顺铂联合化疗对肝肾毒性的临床研究[D];大连医科大学;2008年
4 洪建丽;应用紫杉醇联合顺铂治疗晚期上皮性卵巢癌的近期疗效分析[D];吉林大学;2004年
5 刘文革;多西紫杉醇联合顺铂治疗非小细胞肺癌的临床研究[D];延边大学;2004年
6 李军;紫杉醇对自体移植静脉内膜重构作用的研究[D];中国医科大学;2002年
7 于亮;TWIST在紫杉醇诱导喉癌Hep-2细胞凋亡中的作用研究[D];山东大学;2010年
8 尚晓飞;紫杉醇/伊立替康联合卡铂在局部晚期宫颈癌新辅助动脉栓塞化疗中的疗效对比研究[D];广西医科大学;2011年
9 陈超;G6PD在诱导合成紫杉醇中的作用及其抗氧化机理研究[D];华中科技大学;2004年
10 林青;白术内酯Ⅰ对紫杉醇诱导的人卵巢癌细胞存活素survivin表达的拮抗作用及促凋亡作用[D];成都中医药大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026